一种从荷叶中提取荷叶碱的方法技术

本发明专利技术公开了一种从荷叶中提取荷叶碱的方法，包括以下步骤：1)将荷叶用乙醇提取，将提取液过滤，取滤液备用；2)将滤液回收乙醇，上AB-8大孔吸附树脂柱层析，用酸性溶液洗柱，收集酸洗液和流出液，得到混合液；3)将混合液静置分层，取上清液备用；4)向上清液中加碱调节pH至10～12，静置分层，过滤，取滤渣水洗2～3次，即得粗提物；5)将粗提物溶于95v％乙醇，浓缩至原体积的一半，加入有机溶剂调节极性至5.8～6.0，静置冷却，析出晶体；6)将晶体溶于95v％乙醇制成饱和溶液，加入有机溶剂调极性至5.8～6.0，静置，析出晶体，干燥，即为荷叶碱。本发明专利技术提取的荷叶碱纯度高达98％以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物提取
，具体涉及。
技术介绍
荷叶为睡莲科植物莲(Nelumbo nucifera Gaertn.)的干燥叶，在食用及药用等方面均有较广泛的应用。荷叶具有清热利湿、升发清阳、降脂减肥、止血散瘀等作用。药理研究表明，荷叶中含有多种生物碱，如荷叶碱、N-去甲基荷叶碱、O-去甲基荷叶碱等，这些生物碱尤其是荷叶碱具有明显的降脂、平衡胆固醇等生理活性。荷叶碱是一种阿朴啡型生物碱，药理研究表明荷叶碱为荷叶中主要的降脂活性成分。目前对于荷叶碱提取纯化工艺如有如下几种:聚酰胺树脂吸附荷叶中荷叶碱，洗脱率在66.8%，浓缩解析液，低温干燥，纯化的荷叶碱在90%以上。还有利用DlOl树脂吸附荷叶碱，提取的荷叶碱用不同浓度乙醇洗脱，荷叶碱主要在70%乙醇洗脱液中完全洗脱，通过高效液相色谱法测定荷叶碱的总回收率在1.3%左右。树脂吸附对荷叶碱富集效果明显，但是对于纯度提高有待改善。采用高效液相色谱法制备荷叶碱，用HCl提取荷叶中荷叶碱，采用氯仿溶液萃取，浓缩萃取液，依靠色谱柱极性分离少量的荷叶碱，纯度在98%以上，回收率49 %左右。这种方法制备荷叶碱纯度高，收率低，成本高，不适合产业化制备。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供，该方法成本低廉，提取的荷叶碱纯度高。本专利技术提供的技术方案是，包括以下步骤:I)以荷叶为原料，粉碎，加入原料重量8?20倍的70?95v%乙醇，回流提取I?3次，每次提取I?2h，合并提取液，过滤，收集滤液备用；2)将滤液回收乙醇，上AB-8大孔吸附树脂柱层析，用pH为2?4的酸性溶液洗柱，收集酸洗液和流出液，得到混合液；3)将混合液静置12?24h，分层，取上清液备用；4)向上清液中加碱调节pH至10?12，静置分层，过滤，取滤渣水洗2?3次，即得粗提物；5)将粗提物溶于95v%乙醇，浓缩至原体积的一半，加入有机溶剂调节极性至5.8?6.0，静置冷却，析出晶体；6)将步骤5)中的晶体溶于95v%乙醇制成饱和溶液，加入有机溶剂调极性至5.8?6.0，静置，析出晶体，干燥，即为荷叶碱。步骤I)中，用70?95v%乙醇作为溶剂，可以将荷叶中的生物碱以及黄酮物质提取充分。步骤2)中，AB-8大孔吸附树脂为弱极性树脂，其比表面积为480?520，平均孔径为13?14nm，对黄酮有较好的吸附性，因此会优先吸附黄酮至饱和，生物碱则不经吸附或者少量吸附后而直接流出。用pH为2?4的酸性溶液，酸性溶液为盐酸溶液或磷酸溶液，用其洗柱可将少量吸附的生物碱转化成盐，并被酸洗液洗脱下来，因此，得到的混合液中，富集了大量的生物碱，而黄酮已除去。上样流速为0.5?lBV/h ;由于酸性溶液洗脱时，酸要与生物碱进行反应生成盐，盐然后溶于水，边反应边溶液，因此，洗脱流速越慢越好，以0.05?0.lBV/h为宜，用量为为2 ?2.5BVo步骤3)中，将混合液静置12?24h，分层，取上清液备用，可进一步除去黄酮、蛋白质等杂质。步骤4)中，所述碱液为氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液。用碱液调pH至10?12，可重新生成生物碱，由于生物碱不溶于水，静置后，生物碱会沉淀，取滤渣水洗2?3次，即得生物碱的粗提物。步骤5)中，采用极性较大的有机溶剂来提高浓缩液的极性至5.8?6.0，此时浓缩液中的荷叶碱甲因溶解度降低而析出，所述有机溶剂为乙二醇或二甲基甲酰胺，乙二醇的极性值为6.9，二甲基甲酰胺的极性为6.4。步骤6)中，采用极性较大的有机溶剂来提高饱和溶液的极性至5.8?6.0，此时饱和溶液中的荷叶碱因溶解度降低而优先析出，所述有机溶剂为乙二醇或二甲基甲酰胺，乙二醇的极性值为6.9，二甲基甲酰胺的极性为6.4，得到的晶体为高纯度的荷叶碱。本专利技术工艺简单，对设备要求低，适合大规模工业化生产，可大大节约生产成本，成品纯度达到98%以上。【具体实施方式】以下具体实施例对本专利技术作进一步阐述，但不作为对本专利技术的限定。实施例1I)以荷叶为原料，粉碎至20目，加入原料重量8倍的70v%乙醇(体积浓度为70%的乙醇溶液)，回流提取lh，将提取液过滤，收集滤液备用；2)将滤液回收乙醇，上AB-8大孔吸附树脂柱层析，上样流速为0.5BV/h，用pH为2的盐酸溶液洗柱，洗脱流速为0.05BV/h，用量为为2BV，收集酸洗液和流出液，得到混合液；3)将混合液静置12h，分层，取上清液备用；4)向上清液中加氢氧化钠调节pH至10，静置分层，过滤，取滤渣水洗2次，即得粗提物；5)将粗提物溶于95v%乙醇，浓缩至原体积的一半，加入乙二醇调节极性至5.8?6.0，静置冷却，析出晶体；6)将晶体溶于95v%乙醇制成饱和溶液，加入乙二醇调极性至5.8?6.0，静置，析出晶体，干燥，即为荷叶碱。经HPLC法检测，其纯度为98.3%。实施例2I)以荷叶为原料，粉碎至20目，加入原料重量20倍的95v%乙醇(体积浓度为95%的乙醇溶液)，回流提取3次，每次提取2h，合并提取液，过滤，收集滤液备用；2)将滤液回收乙醇，上AB-8大孔吸附树脂柱层析，上样流速为lBV/h，用pH为4的盐酸溶液或磷酸溶液洗柱，洗脱流速为0.lBV/h，用量为为2.5BV，收集酸洗液和流出液，得到混合液； 3)将混合液静置24h，分层，取上清液备用；4)向上清液中加氢氧化钠或氢氧化钾调节pH至12，静置分层，过滤，取滤渣水洗3次，即得粗提物；5)将粗提物溶于95v%乙醇，浓缩至原体积的一半，加入二甲基甲酰胺调节极性至6.0，静置冷却，析出晶体；6)将晶体溶于95v%乙醇制成饱和溶液，加入二甲基甲酰胺调极性至6.0，静置，析出晶体，干燥，即为荷叶碱。经HPLC法检测，其纯度为98.1 %。实施例3I)以荷叶为原料，粉碎至20目，加入原料重量15倍的80v%乙醇，回流提取2次，每次提取1.5h，合并提取液，过滤，收集滤液备用；2)将滤液回收乙醇，上AB-8大孔吸附树脂柱层析，上样流速为0.5BV/h，用pH为3的盐酸溶液或磷酸溶液洗柱，洗脱流速为0.05BV/h，用量为为2BV，收集酸洗液和流出液，得到混合液；3)将混合液静置18h，分层，取上清液备用；4)向上清液中加氢氧化钠或氢氧化钾调节pH至11，静置分层，过滤，取滤渣水洗2次，即得粗提物；5)将粗提物溶于95v%乙醇，浓缩至原体积的一半，加入二甲基甲酰胺调节极性至5.9，静置冷却，析出晶体；6)将晶体溶于95v%乙醇制成饱和溶液，加入乙二醇调极性至5.9，静置，析出晶体，干燥，即为荷叶碱。经HPLC法检测，其纯度为98.2%。实施例4I)以荷叶为原料，粉碎至20目，加入原料重量8倍的95v%乙醇，回流提取3次，每次提取lh，合并提取液，过滤，收集滤液备用；2)将滤液回收乙醇，上AB-8大孔吸附树脂柱层析，上样流速为lBV/h，用pH为2的盐酸溶液或磷酸溶液洗柱，洗脱流速为0.lBV/h，用量为为2BV，收集酸洗液和流出液，得到混合液；3)将混合液静置24h，分层，取上清液备用；4)向上清液中加氢氧化钠或氢氧化钾调节pH至10，静置分层，过滤，取滤渣水洗3次，即得粗提物；5)将粗提物溶于95v%乙醇，浓缩至原体积的一半，加入乙二醇调节极性至5.8，静置冷却，析出晶体；6)将晶体溶于95v%乙醇制成饱和溶液，加入二本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从荷叶中提取荷叶碱的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)以荷叶为原料，粉碎，加入原料重量8～20倍的70～95v％乙醇，回流提取1～3次，每次提取1～2h，合并提取液，过滤，收集滤液备用；2)将滤液回收乙醇，上AB‑8大孔吸附树脂柱层析，用pH为2～4的酸性溶液洗柱，收集酸洗液和流出液，得到混合液；3)将混合液静置12～24h，分层，取上清液备用；4)向上清液中加碱调节pH至10～12，静置分层，过滤，取滤渣水洗2～3次，即得粗提物；5)将粗提物溶于95v％乙醇，浓缩至原体积的一半，加入有机溶剂调节极性至5.8～6.0，静置冷却，析出晶体；6)将晶体溶于95v％乙醇制成饱和溶液，加入有机溶剂调极性至5.8～6.0，静置，析出晶体，干燥，即为荷叶碱。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：卢照凯，钟德品，谢冬养，陆美珍，赵明东，盘秋梅，
申请(专利权)人：桂林三宝药业有限公司，
类型：发明
国别省市：广西;45