一种伞房花耳草组培苗的快速繁殖方法，包括如下步骤：(1)取伞房花耳草未开裂果实作为外植体进行消毒；(2)将消毒后的外植体在超净工作台剥开，将种子接种到MS培养基上诱导发芽得到无菌试管苗；(3)将所述无菌试管苗置于MS繁殖培养基中进行试管苗快速繁殖培养获得丛生芽；(4)将所述丛生芽置于MS生根培养基中培养得到完整的带根苗；(5)取完整的带根苗进行炼苗后移植于苗床生长一个月，再移栽至大田。采用本发明专利技术所述的培养方法得到的伞房花耳草丛生芽增殖系数达到20-30倍，获得的组培苗生根率达到98.5％，移栽苗床成活率达到95％，有效解决了伞房花耳草的规模化育苗问题。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种植物繁殖方法，特别是。
技术介绍
伞房花耳草，拉丁学名Oldenlandia corymbosa L.，又名蛇舌草、水线草，为茜草科耳草属植物，分布于我国南方各省，产量较大，其干燥全草入药，药材中含有多种三萜类化合物，其中乌索酸含量最高，为其主要活性成分。药理研究发现，乌索酸具有抗肿瘤、抗肝炎、抗病毒、抑菌等多种药理作用，具有重要的开发应用价值。目前伞房花耳草药材及种苗主要来源于野生资源，还没有人工繁育及人工种植技术的报道。为了防止伞房花耳草野生资源遭到严重的人为破坏，保证伞房花耳草资源的可持续利用，需要对伞房花耳草进行种苗繁育技术研究，以保障大规模采挖后能够提供充足的种苗满足资源更新的需要。通过生物技术的组织培养技术，可以有效快速地生产伞房花耳草种苗，实现伞房花耳草优质种苗的工厂化育苗，以满足生产上的需要。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供，它能够提高伞房花耳草种苗的繁殖速度和质量，实现伞房花耳草优质种苗的工厂化育苗，以满足生产上的需要。本专利技术通过以下技术方案达到上述目的:，包括以下步骤:(I)外植体的选择与消毒:取伞房花耳草的成熟未开裂果实作为外植体，依次用2 % (v/v)洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15_30min、添加了 2_3滴吐温-20的100毫升0.1% (v/v)升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水，(2)种子萌发获得无菌试管苗:将步骤(I)得到的外植体在超净工作台上剥开，将种子接种到MS培养基中，在培养温度为23-27°C，光照强度15001UX，光照时间为8_10小时/天的条件下培养30天，种子发芽后获得无菌试管苗，其中MS培养基中添加0.2mg/L的苄基腺嘌呤6-BA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养:将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23-27°C，光照强度15001ux，光照时间为8_10小时/天的条件下培养30天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加0.5-3.0mg/L的苄基腺嘌呤6-BA、0.l-ο.3mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1-1.0mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，(4)丛生芽生根培养:将步骤(3)中得到的丛生芽切成带顶芽或叶芽的茎段，置于1/2MS生根培养基中，在培养温度23-27°C，光照强度15001ux，光照时间为12-14小时/天的条件下培养30天得到带根的完整植株，其中1/2MS生根培养基中添加0.1-1.0mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1-0.3mg/L的生根粉ABT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，(5)炼苗与移栽:步骤(4)获得带根的完整植株后，在室温为25°C的室内打开瓶盖，在瓶中加入少量自来水，炼苗2-4天，表面角质形成后将苗取出，洗净根部培养基，立即移栽到苗床中，在苗床中生长一个月后移栽大田。移栽后一个星期内，每天早8点到晚6点喷雾3-5次，每次lOmin，此后每天早8点、晚6点各喷雾I次，每次1min ;移栽时的温度条件为20_28°C，相对湿度75-80%，遮阳率为80%。本专利技术的突出优点在于:(I)采用组织培养技术繁育伞房花耳草种苗具有繁殖速度快、种苗质量均一，且不受时间、空间、季节限制的突出优点，缩短了种苗繁育周期，提高了种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要。(2)采用本专利技术所述的培养方法得到的伞房花耳草丛生芽增殖系数达到20-30倍，丛生芽健壮，接种到生根培养基后容易生根，生根率可达98.5%以上，炼苗后移栽苗床成活率达到95%。【具体实施方式】下面结合实施例对本专利技术的技术方案进一步说明。实施例1本专利技术所述的伞房花耳草的组织培养快速繁殖方法的一个实例，包括以下步骤:(I)外植体的选择与消毒:取伞房花耳草的成熟未开裂果实作为外植体，依次用2 % (v/v)洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15_30min、添加了 2_3滴吐温-20的100毫升0.1% (v/v)升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水，(2)种子萌发获得无菌试管苗:将步骤(I)得到的外植体在超净工作台上剥开，将种子接种到MS培养基中，在培养温度为23-27°C，光照强度15001UX，光照时间为8_10小时/天的条件下培养30天，种子发芽后获得无菌试管苗，其中MS培养基中添加0.2mg/L的苄基腺嘌呤6-BA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养:将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23-27°C，光照强度15001ux，光照时间为8_10小时/天的条件下培养30天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加0.5mg/L的苄基腺嘌呤6_BA、0.3mg/L的吲哚乙酸IAA、1.0mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，丛生芽增殖系数为23.5，(4)丛生芽生根培养:将步骤(3)中得到的丛生芽切成带顶芽或叶芽的茎段，置于1/2MS生根培养基中，在培养温度23-27°C，光照强度15001ux，光照时间为12-14小时/天的条件下培养30天得到带根的完整植株，其中1/2MS生根培养基中添加0.lmg/L的吲哚乙酸IAA、0.3mg/L的生根粉ABT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，生根率为 93.0%，(5)炼苗与移栽:步骤(4)获得带根的完整植株后，在室温为25°C的室内打开瓶盖，在瓶中加入少量自来水，炼苗2-4天，表面角质形成后将苗取出，洗净根部培养基，立即移栽到苗床中，在苗床中生长一个月后移栽大田，移栽成活率为95.5%。实施例2本专利技术所述的伞房花耳草的组织培养快速繁殖方法的另一个实例，包括以下步骤:(I)外植体的选择与消毒:取伞房花耳草的成熟未开裂果实作为外植体，依次用2 % (v/v)洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15_30min、添加了 2_3滴吐温-20的100毫升0.1% (v/v)升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水，(2)种子萌发获得无菌试管苗:将步骤(I)得到的外植体在超净工作台上剥开，将种子接种到MS培养基中，在培养温度为23-27°C，光照强度15001UX，光照时间为8_10小时/天的条件下培养30天，种子发芽后获得无菌试管苗，其中MS培养基中添加0.2mg/L的苄基腺嘌呤6-BA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养:将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23-27°C，光照强度15001ux，光照时间为8_10小时/天的条件下培养30天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加3.0mg/L的苄基腺嘌呤6_BA、0.lmg/L的吲哚乙酸IAA、0.本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种伞房花耳草组培苗的快速繁殖方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：(1)外植体的选择与消毒：取伞房花耳草的成熟未开裂果实作为外植体，依次用2％(v/v)洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15‑30min、添加了2‑3滴吐温‑20的100毫升0.1％(v/v)升汞消毒8‑10min、无菌水冲洗3‑5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水，(2)种子萌发获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的外植体在超净工作台上剥开，将种子接种到MS培养基中，在培养温度为23‑27℃，光照强度1500lux，光照时间为8‑10小时/天的条件下培养30天，种子发芽后获得无菌试管苗，其中MS培养基中添加0.2mg/L的苄基腺嘌呤6‑BA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23‑27℃，光照强度1500lux，光照时间为8‑10小时/天的条件下培养30天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加0.5‑3.0mg/L的苄基腺嘌呤6‑BA、0.1‑0.3mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1‑1.0mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，(4)丛生芽生根培养：将步骤(3)中得到的丛生芽切成带顶芽或叶芽的茎段，置于1/2MS生根培养基中，在培养温度23‑27℃，光照强度1500lux，光照时间为12‑14小时/天的条件下培养30天得到带根的完整植株，其中1/2MS生根培养基中添加0.1‑1.0mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1‑0.3mg/L的生根粉ABT、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，(5)炼苗与移栽：步骤(4)获得带根的完整植株后，在室温为25℃的室内打开瓶盖，在瓶中加入少量自来水，炼苗2‑4天，表面角质形成后将苗取出，洗净根部培养基，立即移栽到苗床中，在苗床中生长一个月后移栽大田。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：韦范，韦坤华，李林轩，黄宝优，缪剑华，徐建平，李旻辉，
申请(专利权)人：广西壮族自治区药用植物园，
类型：发明
国别省市：广西;45
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