本发明专利技术公开了Aphanalide J在制备治疗肝癌药物中的应用，属于药物领域。Aphanalide J能够有效抑制HepG2细胞的生长增殖，干预组细胞的存活率较对照组显著降低，且降低程度与Aphanalide J浓度呈现一定的剂量效应趋势，同时在同一Aphanalide J浓度下，细胞存活率随着干预时间的增加而呈现持续降低的趋势。与此同时，相同剂量的Aphanalide J干预对L02正常肝细胞并不产生抑制作用，无细胞毒作用。Aphanalide J可以进一步研究开发成制备治疗肝癌的药物。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及化合物AphanalideJ的新用途，具体涉及AphanalideJ在制备治疗 肝癌药物中的应用。
技术介绍
YaoZhang等人首次分离纯化出化合物AphanalideJ，并将成果发表在著名天然 产物杂志JournalofNaturalProduct上（BioactiveTerpenoidsfromtheFruitsof Aphanamixisgrandifolia，J.Nat.Prod.，2013, 76,1191-1195)〇目前尚未有该化合物的活性报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种AphanalideJ的医药用途。 上述目的是通过如下技术方案实现的：AphanalideJ在制备治疗肝癌药物中的应用，所述AphanalideJ化学结构式如 下， 进一步地，所述肝癌为人肝癌HepG2。【附图说明】 图I:AphanalideJ对IfepG2 及L02 细胞增殖的影响（n= 3)。【具体实施方式】 下面结合实施例进一步说明本专利技术的实质性内容。 实施例I:AphanalideJ的分离制备及结构确证 AphanalideJ的制备方法同文献报道的制备方法（BioactiveTerpenoidsfrom theFruitsofAphanamixisgrandifolia，J.Nat.Prod.，2013,76,1191-1195)〇 结构确证：白色无定形粉末，分子式为C26H34O7，不饱和度为10。核磁共振氢 谱数据sH(ppm，DMS0-d6,500MHz) :H-1 (6. 72,d，J=12. 5)，H-2(5. 85,d，J=12. 5)，H-5 (2. 29,dd，J= 13. 2,4. 0)，H-6 (I. 85,dd，J= 16. 0,4. 0)，H-6 (I. 64,ddd，J= 16. 0， 13. 2,4. 0)，H-7(4. 61，s)，H-9(2. 60,d，J= 4. 0)，80,q，J= 4. 0)，H-12(3. 50， t，J= 6. 5)，H-15(4. 51，q，J= 3. 5)，H-16(l. 61，ddd，J= 12. 0,10. 5,3. 5)，H-16(l. 71， dt，J= 12. 0, 5. 5)，H-17 (3. 25,dd，J= 10. 5, 5. 5)，H-18 (0? 55,s)，H-19 (I. 30,s)， H-21(7.30,s)H-22 (6. 40,s)，H-23(7.45,s)，H-28 (I. 23,s)，H-29 (I. 35,s)，H-30 (I. 48,s)， 11-0H(5. 00,d，J= 4. 0)，12-0H(4. 91，d，J= 6. 5)，15-0H(4. 78,d，J= 3. 5);核磁共振碳 谱数据Sc(ppm，DMS0-d6,125Hz):156.I(CH，1-C)，118.I(CH，2-C)，165. 6 (C，3-C)，84. 0 (C， 4-C)，52.I(CH，5-C)，27. 2 (CH2,6-C)，81. 2 (CH，7-C)，44.I(C，8-C)，47. 9 (CH，9-C)，44. 3 (C， 10-C)，74. 0 (CH，11-C)，80. 6 (CH，12-C)，49. 2 (C，13-C)，96. 5 (C，14-C)，75. 2 (CH，15-C)， 37.0(CH2, 16-C)，41.6(CH，17-C)，14.3(CH3, 18-C)，18. I(CH3, 19-C)，126.2 (C，20-C)， 139. 6(CH，2卜C)，112. 5(CH，22-C)，141. 7(CH，23-C)，30.I(CH3,28-C)，23. 6(CH3,29-C)， 17. 7(CH3,30-C)。结构确证数据与文献报道一致，因此可以确定本专利技术制备的化合物即为 文献报道的AphanalideJ。 实施例2:AphanalideJ的药理作用试验 -、材料和仪器 HepG2人肝癌细胞株购自中科院生物化学与细胞生物学研究所。L02正常人 肝细胞株由复旦大学中山医院肝癌研究所馈赠。AphanalideJ自制，HPLC归一化纯度 大于98 %。RPMI-1640培养基、胰酶购自Gibco公司。标准小牛血清购自Biowest公 司。3-(4, 5-二甲基噻唑-2)-2, 5-二苯基四氮唑溴盐（MTT)、二甲基亚砜（DMSO)、台盼蓝 (TrypanBLue)、二氯荧光素双醋酸盐（DCFH-DA)均购自上海国药集团化学试剂有限公司。 其他常用试剂均为分析纯。 微量天平（瑞士梅特勒-托利多，METTLRERAE2000)。普通台式离心机（上海安亭 科学仪器厂）。数显电热恒温水浴箱（上海跃进医疗机械厂，HH.W21.600S)。二氧化碳细 胞培养箱（美国FormaScientific公司）。高速冷冻离心机（美国Thermo公司）。超微 量紫外分光光度计（美国ThermoHsher公司，NanoDrop-1000)。紫外成像系统（上海复日 科技有限公司，FR-200A)。酶联免疫检测仪，荧光分光光度计（HitachiF2500)。 二、试验方法 1、细胞培养 将细胞常规接种于含10% (体积分数）小牛血清的RPMI-1640培养基中，置于 37°C、5% 0)2浓度的培养箱中培养。 2、AphanalideJ干预培养液的配置 将45. 44mgAphanalideJ溶于IOmL二甲基亚砜（DMSO)制得储备液并分别稀释2 倍、4倍，分别得到2mmol/L、4mmol/L及8mmol/L的AphanalideJ应用液。进行细胞干预 前，将50yL应用液与4950yL常规培养液（含10%体积分数的小牛血清）充分混合，得到 AphanalideJ干预培养液（20ymol/L、40iimol/L、80iimol/L)。 3、MTT法检测细胞存活率 取对数生长期细胞接种于96孔培养板，每孔200yL(5XIO3细胞）。培养12h 待细胞贴壁后，弃去原培养液，加入200yL不同浓度的AphanalideJ培养液（DMS0溶解 AphanalideJ后以1 %体积分数与常规培养液混合，使AphanalideJ终浓度为20ymol/ 1、40^111〇1/1、80^111〇1/1)，每组6个平行孔。同时设6个溶剂（01^0)对照孔。培养2411、 48h、72h，每24小时更换AphanalideJ干预培养液。干预结束后，吸去培养液，向各孔加 入20yLMTT溶液，37°C孵育4h后吸去各孔上清液，加入150yLDMS0,置摇床上低速震荡 lOmin，待结晶充分溶解后，以DMSO调零，用酶联免疫检测仪在490nm处测定各孔吸光度，计 算细胞存活率（survivalrate，SR)。SR=实验组A490/对照组A490X100% 4、台盼蓝染色測定存活细胞数 将相同数量（2X106)的细胞接种于细胞培养瓶，培养一段时间待细胞贴壁后， 弃去培养液，用PBS洗细胞两遍后，加入5mL的AphanalideJ干预培养液（20ymol/L、 40ymol/L、80ymol/L)。每组三本文档来自技高网...
【技术保护点】
Aphanalide J在制备治疗肝癌药物中的应用，所述Aphanalide J化学结构式如下，。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘高志，
申请(专利权)人：刘高志，
类型：发明
国别省市：浙江;33
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