本发明专利技术公开了一种血清葡萄糖检测试剂，是由试剂R1和试剂R2组成的；所述试剂R1是由缓冲液、Mg2+、三磷酸腺苷(ATP)、NAD+、氟碳表面活性剂、BSA、蔗糖、海藻糖、甘露醇和防腐剂组成的；所述试剂R2是由缓冲液、Mg2+、BSA、蔗糖、海藻糖、甘露醇、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、己糖激酶、氟碳表面活性剂、防腐剂组成的。本发明专利技术试剂的准确度和稳定性好，价格便宜，使用方便，完全可以满足临床需要。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及葡萄糖检测
，特别涉及一种血清葡萄糖检测试剂。
技术介绍
血清葡萄糖（GLU)，即人们常说的血糖，是指血液中葡萄糖浓度。在人体其主要来 源于食物中的淀粉、肉内肌糖原及麦芽糖等经消化吸收而生成的葡萄糖。血糖大部分以糖 原形式储存在肝脏和肌肉内，小部分随血液循环输送至组织器官中，进行氧化分解，为生命 活动提供能量。 在正常情况下，在胰岛素等激素参与下，血清葡萄糖的分解与合成处于动态平 衡，血糖保持相对稳定。正常人在空腹血糖浓度为3.61~6. llmmol/L。空腹血糖浓度超过 7.0mmol/L称为高血糖。血糖浓度低于3.61mmol/L称为低血糖。血清葡萄糖（GLU)检测是 一种常用的生化检测项目，它在糖尿病的诊断、疗效观察和一般的临床诊疗中的应用非常 广泛。 目前，通过酶学方法测定血液葡萄糖是临床化学中的主流方法。其中最常用的有 葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法。葡萄糖氧化酶法的原理：葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下， 被氧化成葡萄糖酸，产生过氧化氢。在辣根过氧化物酶催化下，过氧化氢和各种色原反应， 生成有色化合物，可进行比色测定。该法的缺点是易受还原性物质如胆红素、抗坏血酸、尿 酸和谷胱甘肽等的干扰。与葡萄糖氧化酶方法相比，己糖激酶方法对葡萄糖的特异性高，不 受尿酸和抗坏血酸的干扰。但其反应底物ATP及相关酶的稳定性稍差，解决己糖激酶法试 剂稳定性已成当务之急。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种用于检测葡萄糖（GLU)的试剂及使用该试剂检测葡萄 糖含量的方法。该试剂盒采用己糖激酶法，可以有效检测葡萄糖的含量，具有抗干扰能力 强，稳定性好的优点。 本专利技术是通过以下步骤得到的： 一种血清葡萄糖检测试剂，是由试剂R1和试剂R2组成的； 所述试剂R1是由以下含量的成分组成的： 缓冲液 100mmol/L Mg2+ 5mmol/L 三磷酸腺苷（ATP) 2mmol/L NAD+ 3mmol/L 氟碳表面活性剂 3ml/L BSA 2g/L 鹿糖 20g/L 海藻糖 5g/L 甘露醇 20g/L 防腐剂 〇. 5g/L ; 所述试剂R2是由以下含量的成分组成的： 缓冲液 100mmol/L Mg2+ 5mmol/L BSA 2g/L 鹿糖 20g/L 海藻糖 5g/L 甘露醇 20g/L 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 2KU/L 己糖激酶 2KU/L 氟碳表面活性剂 3ml/L 防腐剂 0? 5g/L。 所述的，R1试剂和R2试剂的体积比为4:1。 所述的，缓冲液为25°C，pH7. 5的哌嗪-1，4-二乙磺酸缓冲液。 所述的，氟碳表面活性剂为非离子型氟碳表面活性剂。 所述的，防腐剂为NaN3。 本专利技术的基本原理如下： 在己糖激酶（HK)催化下，葡萄糖和ATP发生磷酸化反应，生成葡萄糖-6-磷酸（G6P) 与ADP。然后在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD)催化下，葡萄糖-6-磷酸（G6P)脱氢生成 6_磷酸葡萄糖酸（6PG)，同时使NADP还原成NADPH。反应式如下：因此，吸光度tf」伊項尚俚与獨匈榍m反肷止。旭过愰测34U nm Y及长处吸光度的变化， 可计算血清中葡萄糖浓度。 本专利技术在己糖激酶法的基础上，优化反应体系，通过采用哌嗪-1，4-二乙磺酸缓 冲液（Good' s缓冲液之一)，该缓冲液不参加和不干扰生物化学反应过程，对酶化学反应等 无抑制作用，可有效提高各底物酶的活性和稳定性，增强试剂的抗干扰能力。并且体系中添 加BSA、蔗糖、甘露醇、海藻糖等组成的复合稳定剂，使三磷酸腺苷（ATP)及各底物酶的稳定 性进一步提尚。 此外，本专利技术采用的非离子型氟碳表面活性剂，该表面活性剂具有高效、稳定，即 高表面活性，高热力学和化学稳定性等显著优点。具体如下：（1)在极低应用浓度下便能显 著降低水溶液的表面张力。极高的表面活性，即可将水溶液表面张力降到极低水平。（2)氟 碳表面活性剂热稳定性高、化学稳定性好，可在强酸、强碱、强氧化介质等特殊应用体系中 稳定有效地发挥其表面活性剂作用，不会与体系发生反应或分解。（3)氟碳表面活性剂能与 其它各类活性剂很好地相容。通过添加氟碳表面活性剂可以显著促进各底物的溶解，维持 体系的稳定。并且可以有效避免测试过程血清中干扰物质造成的体系浑浊等干扰，极大的 增强了试剂的抗干扰能力。 本专利技术的有益效果： 1) 本专利技术采用哌嗪-1，4-二乙磺酸缓冲液，添加多种抗干扰物质和稳定剂，可以有效 保证底物ATP及体系中相关酶的稳定，显著改善了试剂的稳定性可抗干扰能力； 2) 本专利技术采用新型非离子型氟碳表面活性剂，不仅显著改善测定的性能，而且增强了 试剂的稳定性和抗干扰能力； 3) 本专利技术试剂的准确度和稳定性好，价格便宜，使用方便，完全可以满足临床需要。【附图说明】 图1为相关性检测结果； 图2为稳定性检测结果。【具体实施方式】 下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步说明： 实施例1 一种血清葡萄糖检测试剂，是由试剂R1和试剂R2组成的； 所述试剂R1是由以下含量的成分组成的： 缓冲液 100mmol/L Mg2+ 5mmol/L 三磷酸腺苷（ATP) 2mmol/L NAD+ 3mmol/L 非离子型氟碳表面活性剂 3ml/L BSA 2g/L 鹿糖 20g/L 海藻糖 5g/L 甘露醇 20g/L NaN30. 5g/L ； 所述试剂R2是由以下含量的成分组成的： 缓冲液 100mmol/L Mg2+ 5mmol/L BSA 2g/L 鹿糖 20g/L 海藻糖 5g/L 甘露醇 20g/L 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 2KU/L 己糖激酶 2KU/L 氟碳表面活性剂 3ml/L NaN3 0. 5g/L〇 所述的，R1试剂和R2试剂的体积比为4:1。 所述的，缓冲液为25°C，pH7. 5的哌嗪-1，4-二乙磺酸缓冲液。 本实施例检测试剂的检测方法： 本实施例的血清葡萄糖检测试剂，在使用时采用具有双试剂功能的全自动生化分析 仪，如日立7180全自动分析仪，利用终点法进行测定。具体的检测方法如表1所示。 表1血清葡萄糖检测试剂的检测方法计算：血清葡萄糖含量（mmol/L) = (AA测定+ AA标准）XC标准。抗干扰性实验 取新鲜混合血清，分成2等份，然后将每等份再分成5等份，加入不同的干扰物质，使其 在血清中的浓度达到表2的要求，然后分别用实施例1所得试剂，与市场常见并认可的葡萄 糖（GLU)试剂同时对比测定血清中GLU的含量，对照组测定结果与加入不同干扰物质后各 组的实验结果见表2。其中：相对偏差（%) =(干扰样本的测定均值一对照样本的测定均值）/ 对照样本的测定均值X 100%。 表2抗干扰性实验结果由表2可以看出，实施例1试剂在抗坏血酸彡1704ymol/L、胆红素彡684ymol/L、血 红蛋白<5g/L、甘油三酯< 22. 6mmol/L的条件下，对测试结果没有明显干扰。而对照组试 剂在上述浓度干扰物质存在时，受到明显干扰，这说明通过优化反应缓冲体系、添加新型非 离子表面活性剂后，本专利技术的检测试剂的抗干扰性能显著提高，远远优于对比试剂。 相关性实验 利用实施例1制得的检测试剂，对照组使用市场常见的国家食品药品监督管理局认可 的某公司的葡萄本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种血清葡萄糖检测试剂，其特征在于，是由试剂R1和试剂R2组成的；所述试剂R1是由以下含量的成分组成的：缓冲液 100mmol/LMg2+ 5mmol/L三磷酸腺苷(ATP) 2mmol/LNAD+ 3mmol/L氟碳表面活性剂 3ml/LBSA 2g/L蔗糖 20g/L海藻糖 5g/L甘露醇 20g/L防腐剂 0.5g/L；所述试剂R2是由以下含量的成分组成的：缓冲液 100mmol/LMg2+ 5mmol/LBSA 2g/L蔗糖 20g/L海藻糖 5g/L甘露醇 20g/L葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶 2KU/L己糖激酶 2KU/L氟碳表面活性剂 3ml/L防腐剂 0.5g/L。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：郁东，李志明，谭柏清，甘宜梧，谢清华，
申请(专利权)人：郁东，
类型：发明
国别省市：山东;37
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