本发明专利技术公开了Terreumol B在制备治疗胰腺癌药物中的应用，属于药物领域。Terreumol B对缺氧培养条件下人胰腺癌MiaPaCa-2细胞有明显的增殖抑制作用，随着Terreumol B浓度的增加和作用时间的延长，抑制作用愈明显，即在一定浓度范围内存在时间-剂量依赖性，可以进一步研究开发成制备治疗胰腺癌的药物。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及化合物TerreumolB的新用途，具体涉及TerreumolB在制备治疗胰腺癌药物中的应用。
技术介绍
XiaYin等人首次分离纯化出化合物TerreumolB，并将成果发表在著名天然产物杂志JournalofNaturalProduct上(HighlyOxygenatedMeroterpenoidsfromFruitingBodiesoftheMushroomTricholomaterreum，J.Nat.Prod.，2013，76，1365-1368)。目前尚未有该化合物关于胰腺癌的活性报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种TerreumolB的医药用途。上述目的是通过如下技术方案实现的：TerreumolB在制备治疗胰腺癌药物中的应用，所述TerreumolB化学结构式如下，进一步地，所述胰腺癌为人胰腺癌MiaPaCa-2。具体实施方式下面结合实施例进一步说明本专利技术的实质性内容。实施例1：TerreumolB的分离制备及结构确证TerreumolB的制备方法同文献报道的制备方法(HighlyOxygenatedMeroterpenoidsfromFruitingBodiesoftheMushroomTricholomaterreum，J.Nat.Prod.，2013，76，1365-1368)。结构确证：黄色粉末，分子式为C17H20O7，不饱和度为8。化合物在362和286nm有紫外吸收。核磁共振氢谱数据δH(ppm，DMSO-d6，600MHz)：H-2(6.42，s)，H-5(3.58，d，J＝15.8)，H-5(3.01，d，J＝15.8)，H-7(2.82，d，J＝8.0)，H-8(3.75，m)，H-9(2.44，m)，H-9(1.80，t，J＝13.0)，H-11(3.78，s)，H-15(1.33，s)，H-16(1.43，s)，1-OH(11.93，s)，4-OH(5.60，s)，8-OH(5.42，s)，3-OCH3(3.97，s)；核磁共振碳谱数据δC(ppm，DMSO-d6，600Hz)：159.3(C，1-C)，99.1(CH，2-C)，153.7(C，3-C)，138.3(C，4-C)，30.1(CH2，5-C)，61.5(C，6-C)，70.0(CH，7-C)，68.8(CH，8-C)，43.1(CH2，9-C)，61.9(C，10-C)，63.8(CH，11-C)，198.1(C，12-C)，114.5(C，13-C)，120.8(C，14-C)，21.2(CH3，15-C)，17.3(CH3，16-C)，56.6(CH3，3-OCH3)。结构确证数据与文献报道一致，因此可以确定本专利技术制备的化合物即为文献报道的TerreumolB。实施例2：TerreumolB的药理作用试验一、材料和仪器人胰腺癌MiaPaCa-2细胞由天津医科大学附属肿瘤医院肿瘤研究所惠赠。TerreumolB自制，HPLC归一化纯度大于98％。FBS、胰蛋白酶-EDTA消化液购于美国Hyclone公司。PBS粉购于天津润泰科技发展有限公司。DMEM低糖培养液购于美国Gibco公司。MTT购于美国Sigam公司。DMSO购于北京化工厂。注射用青霉素钠购于哈药集团制药总厂。注射用硫酸链霉素购于大连美罗大药厂。超净工作台、细胞培养箱(美国Thermo公司)，4℃冰箱、-20℃冰箱(山东青岛海尔公司)，-80℃冰箱(FormaScientific)，电热鼓风干燥箱(天津实验仪器厂)，光学显微镜(日本Olympus公司)，倒置相差显微镜(德国leica公司)，超速低温离心机(日本日立公司)，酶标仪(上海科华生物工程股份有限公司)，E-Centrifuge(Wealtec)，微量加样器(德国Eppendorf)，电子恒温水浴锅(余姚市东方电工仪器厂)，高压灭菌锅(山东新华医疗器械有限公司)，电子天平(上海天平仪器厂)。二、试验方法1、细胞培养:(1)常氧培养：将人胰腺癌MiaPaCa-2细胞放入5％CO2、37℃、饱和湿度的CO2孵箱中贴壁培养，适时换培养液，细胞贴壁生长融合至80％～90％时传代。(2)缺氧培养：将人胰腺癌MiaPaCa-2细胞放在5％CO2、94％N2、1％O2、37℃、饱和湿度的缺氧小室中培养。缺氧小室建立：缺氧装置为可调式培养容器，有一进气孔和一出气孔。实验时，将缺氧培养的细胞放入可调式培养容器内，由进气孔充入低氧混合气体(5％CO2+95％N2+1％O2)，测得小室内氧气浓度维持在1％后密闭，移入细胞培养箱中，37℃培养。每24h再冲气和换气一次后置37℃培养箱继续培养，分别在24h、48h、72h后收集各组细胞，用于MTT实验。2、细胞增殖的检测(1)收集对数生长期MiaPaCa-2细胞，制备成单细胞悬液进行计数，调整浓度以每孔5×l03个细胞接种96孔细胞培养板中，每孔总体积100μL(边缘孔用同体积的无菌PBS填充)，于5％CO2、37℃、饱和湿度的CO2培养箱中培养，待细胞形成单层后弃上清给予不同浓度TerreumolB处理。(2)分空白对照组(不加药物处理的等体积培养液)和TerreumolB药物20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L)，每组设6个平行孔，实验重复三次，置入37℃，5％CO2、94％N2、1％O2的缺氧小室中分别培养24h、48h、72h。(3)用PBS轻轻冲洗96孔细胞培养板2次后，每孔加入l0μLMTT(5mg/mL)，继续培养4h后离心弃上清，每孔加入15μL的DMSO，放在摇床上振荡15min，使结晶物充分溶解。(4)酶联免疫检测仪于570nm处测量各孔的吸光度值(A值)，计算细胞增殖抑制率。(5)抑制率(％)＝(空白对照组平均A值-药物组平均A值)/空白对照组平均A值×100％。(6)以浓度为横轴，抑制率(％)为纵轴绘制抑制率直方图。3、统计学方法采用SPSS17.0进行数据处理，计量资料计量资料符合正态分布的，以均数士标准差表示，均数间比较采用单因素方差分析或t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。三、结果及结论MTT结果显示：(1)TerreumolB干预人胰腺癌MiaPaCa-2细胞同等时间(24h、48h、72h)时，随着TerreumolB浓度(在实验浓度范围间内)的增加，其所对应的OD值越小，表明在缺氧条件下TerreumolB对人胰腺癌MiaPaCa-2细胞干预时间相同时，随着药物浓度的本文档来自技高网...
【技术保护点】
Terreumol B在制备治疗胰腺癌药物中的应用，所述Terreumol B化学结构式如下，
【技术特征摘要】
1.TerreumolB在制备治疗胰腺癌药物中的应用，所述TerreumolB化学结构式如下，
2.根据权利要求1所...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵东顺，
申请(专利权)人：赵东顺，
类型：发明
国别省市：浙江;33
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