一种参芪扶正注射液中依地酸二钠和焦亚硫酸钠的定量检测方法技术

本发明专利技术建立了一种定量分析参芪扶正注射液中依地酸二钠和焦亚硫酸钠的定量检测方法，包括以下步骤：制备依地酸二钠和焦亚硫酸钠对照品溶液；制备参芪扶正注射液供试品溶液；采用离子色谱法定量分析上述对照品溶液和供试品溶液；根据对照品和样品离子色谱图中EDTA2-和SO32-、SO42-的离子色谱峰峰面积，依据溶液中S元素守恒原则，分别按照依地酸二钠与EDTA2-、焦亚硫酸钠与SO32-、SO42-的摩尔比和分子量折算样品中依地酸二钠和焦亚硫酸钠的含量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种针对参芪扶正注射液安全性控制的方法及应用，具体是一种通过 建立离子色谱法对参芪扶正注射液中添加的附加剂依地酸二钠和焦亚硫酸钠进行检测及 应用的方法，属于药物分析技术及安全性控制领域。
技术介绍
参芪扶正注射液为国家中药保护品种，保护品种号：ZYB2072004073,是由黄芪和 党参经提取制成的中药大输液，用于气虚症肺癌、胃癌的辅助治疗，可提高机体的免疫功 能，并可治疗心、脑血管疾病，具有扶正固本、益气补虚、活血化瘀的功效。 参芪扶正注射液成分复杂，根据ZL 201210436493.4中公开资料，其指纹图谱中 仅特征峰就有18个之多；根据ZL 201310008395. 5,参芪扶正注射液鉴别出来的成分有 毛蕊异黄酮-7-0-β -D-葡萄糖苷，异微凸剑叶莎醇-7, 2 ^ -二-0-葡萄糖苷、鹰嘴豆芽 素-7-葡萄糖苷、9，10-二甲氧基紫檀烷-3-0-木糖葡萄糖苷、黄芪甲苷、5-羟甲基糠醛等， 诸多已知和未知的成分给参芪扶正注射液的质量控制带来了极大的困难。为了保持注射液 质量的可控性和稳定性，红外光谱、核磁共振、高效液相色谱等高精度分析的方法都相继被 应用于监测参芪扶正注射液中S峰（毛蕊异黄酮苷）和极性较大的水溶性成分、黄芪甲苷 含量、其负相关成分、皂苷类成分等。即使众多先进的分析检测方法用于参芪扶正注射液质 量控制，但是为了防微杜渐，增加临床用药安全性，对于参芪扶正注射液质量控制的研究从 未间断。 杂的成分给参芪扶正注射液的质量控制带来很大难度的同时，也给生产造成了一 定的困扰。制备静脉给药输液时，一般使用不锈钢容器和管道，在加热情况下，注射液与金 属容器、管道、滤器等较长时间接触后，注射液的组分会与金属离子等物质结合，生成有色 的金属复合物，导致溶液颜色变深，为了防止主药与金属离子发生反应，减少溶液变色，本 品中添加了适量的金属络合剂依地酸二钠和抗氧化剂焦亚硫酸钠，添加量大约为0. 2g/L 和 0. 5g/L。 现在有研究表明，依地酸二钠可与钙离子结合成可溶的络合物引起钙的减少，静 脉制剂中使用依地酸二钠会导致血钙下降，若添加过量会造成血钙过低，恶心、头痛、尿急、 血液凝固性降低等不良反应；有文献报道：如果人体大量摄入依地酸二钠，依地酸二钠会 与血液及骨骼中的钙形成水溶性螯合物，被排出体外，引起低血钙或骨钙流失，导致抽搐甚 至死亡。另外，焦亚硫酸钠在溶液中以SO 32和SO42的形式存在，储存久了，还会释放出S0 2。 SO2对皮肤、黏膜有明显的刺激作用，可引起结膜、支气管炎症状；其次亚硫酸盐还会引发过 敏。参芪扶正注射液的适用人群是气虚症肺癌、胃癌患者，身体机能弱，免疫力下降，更容易 产生过敏、头痛等不良反应，因此需要更加严格的控制依地酸二钠和焦亚硫酸钠使用量。虽 然参芪扶正注射液中添加了金属络合剂依地酸二钠和抗氧化剂焦亚硫酸钠，但是针对于附 加剂尚未建立公开的质量控制方法。在生产过程中人员情绪不稳定等不确定因素，可能会 导致投料量的偏差，带来质量和安全隐患。为了保证临床用药的安全，需要对依地酸二钠和 焦亚硫酸钠的建立质量控制方法。
技术实现思路
本专利技术提供一种离子色谱法定量分析控制参芪扶正注射液中附加剂依地酸二钠 和焦亚硫酸钠含量的方法，具体的涉及一种参芪扶正注射液中依地酸二钠和焦亚硫酸钠的 定量检测方法。 本专利技术的另一目的是提供上述定量检测方法的应用。 在一些文献中，药品注射液中微量离子用离子色谱法检测时，将注射液直接注入 离子色谱柱内进行分析。参芪扶正注射液的成分复杂，如
技术介绍
所述，其中含有氨基酸、 糖类（主要是单糖和寡糖）、有机酸、氯化钠等诸多成分，各种不同的化学物质多达18种以 上，而依地酸二钠和焦亚硫酸钠2种附加剂的含量低，经过试验，发现将注射液直接注入离 子色谱柱内，结果色谱图上显示的氯离子峰面积过高，占全部成分峰面积的95%以上；同 时色谱柱柱效下降很快，保留时间波动大，导致得到的谱图无法解读，根本无法检测到依地 酸二钠和焦亚硫酸钠。 为了解决以上问题，专利技术人经过多方面的摸索，发现将样品进行稀释后，可以大幅 度降低氯离子的峰面积，但是稀释后的参芪扶正注射液在检测中色谱柱柱效仍然存在下降 快，保留时间波动大的问题。 在已经公开的文献资料中，ZL 201310756866. 0用核磁共振方法对参芪扶正注射 液进行质量控制时，参芪扶正注射液经过了冻干处理；ZL201310008395. 5,参芪扶正注射液 经0. 45 μ m微孔滤膜滤进行处理；ZL 201210436493. 4采用0. 22um微孔滤膜滤过进行处 理；ZL 200710136382. 0中，经过大孔树脂过滤，萃取等处理步骤。专利技术人将公开文献中的 处理手段应用到本专利技术中，都无法解决柱效下降快的技术问题。 经过艰苦的试验，我们惊喜的发现使用C18柱处理稀释过的参芪扶正注射液，其 氯离子峰面积干扰被消除，且色谱柱柱效没有明显下降，保留时间的波动可控，可以精确定 量检测到依地酸二钠和焦亚硫酸钠。 本专利技术，包括以 下步骤： (1)用离子色谱法检测参芪扶正注射液中依地酸二钠和焦亚硫酸钠的EDTA2、 SO32、SO42的离子浓度； (2)依地酸二钠和焦亚硫酸钠的计算： 依地酸二钠的计算：根据步骤（1)中所述EDTA2的浓度，按照依地酸二钠和 EDTA2I : 1的摩尔比，折算出溶液中依地酸二钠的浓度； 焦亚硫酸钠的计算：①通过峰面积归一化法，利用绘制Na2S2O 5对照品标准曲线时 不同浓度的工作对照溶液中SO32和SO 42的峰面积，算出Na 2S205溶液中SO 32和SO 42的比 例；②根据Na2S2OM照品溶液中，SO 32和SO 42的比例以及S元素守恒，按照Na 2S205分别与 SO32和SO42的摩尔比，通过三者的分子量折算，分别绘制SO 32和SO42的标准曲线；③根据 样品溶液中SO 32和SO 42的峰面积，分别代入SO 32和SO 42的标准曲线，算出SO 32和SO 42浓 度，再根据分子量折算出SO32和SO 42的摩尔浓度；④依据溶液中S元素守恒，根据SO 32和 SO42的摩尔浓度，算出Na2S2O5的摩尔浓度，进而根据分子量算出样品中Na 2S2O5的浓度。 步骤（1)中所述参芪扶正注射液先通过C18小柱纯化，然后洗脱液稀释50-400倍 后，再通过离子色谱柱。 步骤（1)中所述参芪扶正注射液先通过C18小柱纯化，然后洗脱液稀释100-200 倍后，再通过离子色谱柱。 步骤（1)中所述参芪扶正注射液先通过C18小柱纯化，然后洗脱液稀释200倍后， 再通过离子色谱柱。 所述步骤（1)中还包括对照品溶液的制备，分别取依地酸二钠、焦亚硫酸钠对照 品适量，精密称定，加水制成每ImL分别含依地酸二钠、焦亚硫酸钠 1 μ g的溶液。 所述步骤⑴中离子色谱法的色谱条件为：色谱柱为IonPac ASll-HC(4X250mm)，淋洗液浓度为0~30min 15mmol/L的氢氧化钾溶液，电导检测器，流 速为lmL/min，进样量为25 μ L。 本专利技术提供的依地酸二钠和焦亚硫酸钠的控制方法能够应用于参芪扶正注射液 中附加剂的测定，能有效地对参芪扶正本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种参芪扶正注射液中依地酸二钠和焦亚硫酸钠的定量检测方法，包括以下步骤：(1)用离子色谱法检测参芪扶正注射液中依地酸二钠和焦亚硫酸钠的EDTA2‑、SO32‑、SO42‑的离子浓度；(2)依地酸二钠和焦亚硫酸钠的计算：依地酸二钠的计算：根据步骤(1)中所述EDTA2‑的浓度，按照依地酸二钠和EDTA2‑1∶1的摩尔比，折算出溶液中依地酸二钠的浓度；焦亚硫酸钠的计算：①通过峰面积归一化法，利用绘制Na2S2O5对照品标准曲线时不同浓度的工作对照溶液中SO32‑和SO42‑的峰面积，算出Na2S2O5溶液中SO32‑和SO42‑的比例；②根据Na2S2O5对照品溶液中，SO32‑和SO42‑的比例以及S元素守恒，按照Na2S2O5分别与SO32‑和SO42‑的摩尔比，通过三者的分子量折算，分别绘制SO32‑和SO42‑的标准曲线；③根据样品溶液中SO32‑和SO42‑的峰面积，分别代入SO32‑和SO42‑的标准曲线，算出SO32‑和SO42‑浓度，再根据分子量折算出SO32‑和SO42‑的摩尔浓度；④依据溶液中S元素守恒，根据SO32‑和SO42‑的摩尔浓度，算出Na2S2O5的摩尔浓度，进而根据分子量算出样品中Na2S2O5的浓度；步骤(1)中所述参芪扶正注射液先通过C18小柱纯化，然后洗脱液稀释50‑400倍后，再通过离子色谱柱。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：黄文华，刘潇潇，宋艳刚，刘学华，杨立伟，胡淑毅，
申请(专利权)人：丽珠集团利民制药厂，广东省食品药品检验所，
类型：发明
国别省市：广东;44