一种桑黄的薄层色谱鉴定方法技术

本发明专利技术公开了一种桑黄的薄层色谱鉴定方法，具体步骤如下：首先将桑黄研磨为粉末，用称量天平精确称取该粉末2g，加入50mL乙醇，加热回流，3h后，过滤，然后将滤液蒸干，残渣再加2mL甲醇能让使桑黄残渣充分溶解，供试品溶液用乙酸乙酯萃取两次，每次30mL，蒸干萃取液，加入甲醇使之溶解，这个作为供试样；吸取5μL上述供试样溶液各于同一薄板上点上，同一展开剂，先展开，再取出，再晾干，置紫外光灯365nm下检视，最后拍照，在薄板上可以很稳定的显示出清晰条带，且样品中条带呈现出规律的一致性，在3小时内荧光显色较为稳定，即可判断为桑黄。且在3小时内荧光显色较为稳定，该法简便，高效，可用于快速鉴定桑黄。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，具体涉及。
技术介绍
桑黄(Inonotus Sang Huang)，又名桑耳，桑臣，以寄生于桑树上面而得名。桑黄作为一种珍贵的药用真菌，具有提高机体免疫力，抗肿瘤，抵抗细胞突变，抗菌，抑制肝纤维化，止血活血降血糖、抑菌消炎，治疗癌症、肝炎等作用。大量科学研究发现桑黄有抑制癌细胞生长作用，抗癌率高达96.7%，为目前国际公认的生物抗癌领域中药效最好的药用真菌。桑黄因其极高的保健功效，被誉为“森林黄金”。然而目前市场上桑黄种类繁多，很多商家以次充好，甚至鱼目混珠，急需制定一种鉴别桑黄的方法。桑黄在已经被大家熟知的抗癌菌类中作用是最明显的，人们慢慢了解到桑黄的抗癌原理，深层栽培的技术逐渐成熟，应用前景非常乐观。韩国桑黄的子实体的售价已达到2300美元，相当于非常珍贵的药材的价格了，根据经济学的定价理论，珍贵药材桑黄的药用前景十分明朗，因此桑黄的鉴别对于桑黄的应用有十分重大的意义。在桑黄使用的过程中如果出现了不同种的桑黄错误使用，滥用，这会损害到接下来的研发食品。
技术实现思路
专利技术目的:本专利技术要解决的是市场流通与销售的桑黄品种优劣难于分真伪的技术问题。本专利技术的目的是提供。技术方案:为了解决上述技术问题，本专利技术提供了，具体步骤如下:I)首先将桑黄研磨为粉末，用称量天平精确称取该粉末2g，加入50mL乙醇，加热回流，3h后，过滤，然后将滤液蒸干，残渣再加2mL甲醇使桑黄残渣充分溶解后，乙酸乙酯萃取两次，每次30mL，蒸干萃取液，加入甲醇使之溶解，这个作为供试样；2)吸取5 yL上述溶液各于同一薄板上点上，同一展开剂，先展开，再取出，再晾干，置紫外光灯365nm下检视，最后拍照，在薄板上可以很稳定的显示出清晰条带，且样品中条带呈现出规律的一致性，在3小时内荧光显色较为稳定，即可判断为桑黄。其中，上述乙醇为100%乙醇或者70%乙醇。其中，上述薄板为硅胶G板或聚酰胺薄板。其中，上述展开剂为甲苯、乙酸乙酯和甲酸，其中，甲苯:乙酸乙酯:甲酸为5:4:1。其中，上述展开剂为正己烷、乙酸乙酯和乙酸，其中，正己烷:乙酸乙酯:乙酸为10:1:1ο有益效果:本专利技术具有以下优点:本专利技术提供了一种准确、稳定而又快速的鉴别桑黄的方法，从得到桑黄样品到得到鉴定结果仅需要8个小时。【附图说明】图1是不同桑黄提取液上样量对薄层层析的影响(I号泳道:上样量为I μ L ;2号泳道:上样量为3 μ L ;3号泳道:上样量为5 μ L);图2为考察不同样品方法对薄层层析的影响；1号泳道代表:100%乙醇回流提取桑黄样品；2号泳道代表:70%乙醇回流提取桑黄样品；3号泳道代表:100%乙醇回流提取另一桑黄样品；4号泳道代表:70%乙醇回流提取另一桑黄样品；图3十二种不同来源桑黄样品在娃胶G板中展开图(展开剂:正己烧:乙酸乙酯:乙酸=10:1:1)；图4十二种不同来源桑黄样品在聚酰胺板中展开图；(展开剂:甲苯:乙酸乙酯:甲酸=5:4:1)；图5各个样品在娃胶G板中图(展开剂:甲苯:乙酸乙酯:甲酸=5:4:1) ;1号泳道代表:桑都仿生桑黄样品；2号泳道代表:桦树桑黄样品；3号泳道代表:千岛湖野生桑黄样品；4号泳道代表:杨树桑黄样品；5号泳道代表:云南野生桑黄样品；6号泳道代表:榆林柳桑黄样品；7号泳道代表:臭松树桑黄样品；8号泳道代表:暴马子树桑黄样品；9-11号泳道代表:桑都仿生桑黄样品(四批样品)；图6考查了十批桑黄十批样品在硅胶G板中的展开情况；图7考查了硅胶G板放置3小时后365nm处荧光图。【具体实施方式】下面结合具体实施例进一步说明本专利技术的技术方案，以下结合实例进一步说明本专利技术，但这些实例并不用来限制本专利技术。 本专利技术的实验方法及参数:1.主要材料:桑黄(浙江千岛湖桑都食用菌合作社人工袋料栽培桑黄已获得成功，共收集10批样品进行实验研究);朽木、泥沙或培养基质；冰箱；2.主要试剂:无水乙醇，甲醇，石蜡，乙酸乙酯，硅胶G薄层板、聚酰胺薄板，甲苯-乙酸乙酯-甲酸，蒸馏水，硫酸，苯酚，90%乙醇溶液，葡萄糖等；3.主要仪器:红外光谱检测仪；高温烘箱；计算机图像分析系统；紫外分光光度计；倒置式显微镜；电子天平。实施例1薄层色谱法鉴定桑黄用称量天平精确称取该粉末2g，加入50mL无水乙醇，加热回流，3h后，过滤，然后将滤液蒸干，残渣再加2mL甲醇使桑黄残渣充分溶解，乙酸乙酯萃取两次，每次30mL。蒸干萃取液，加入甲醇使之溶解，这个作为供试样。按照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VIB)试验，吸取1、3、5 μ L上述溶液各于同一薄板上点上，同一展开剂，先展开，再取出，再晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，最后拍照。考察了不同上样量对薄层层析的影响，结果表明:尽管I μ L、3 μ L的上样量能跑出清晰的条带，但对于一些含量较少的条带并不能很好的显示，因此实验选用上样量为5 μ L。参见图1。实施例2考查100%乙醇和70%乙醇溶液回流提取对薄层层析的影响的影响以及显色的稳定性，其他步骤同实施例1。结果如图2所示。由图可知，100%乙醇的提取物的薄层效果较佳。而应用70%乙醇回流提取两样品产物会造成样品中某些产物的缺失，故实验选用100%乙醇回流提取的方法处理样品。实施例3考查不同材质薄板对薄层层析的影响是其他方面相同，分别在硅胶G板和聚酰胺薄板中展开，其他步骤同实施例1。参见图4、5。由图可以看出，图5中的硅胶G板中的样品能够显示出很明显的条带，而图4中聚酰胺薄板样品各成成不能够很好的分离，故实验选取硅胶G板作为实验用板。实施例4考查不同展开剂对薄层层析的影响以及显色的稳定性是其他方面相同，一个是以甲苯:乙酸乙酯:甲酸=5:4:1为展开剂，一个是以正己烷:乙酸乙酯:乙酸=10:1:1为展开剂，其他步骤同实施例1。参见图3和图5。由图3看出展开剂:正己烷:乙酸乙酯:乙酸=10:1:1并不能很好的将样品中的成分分开，故选用的展开剂为甲苯:乙酸乙酯:甲酸=5:4:1。实施例5考查了十批桑黄十批样品在硅胶G板中的展开情况，结果如图6所示。由图可知，选用100%乙醇回流提取的方法，展开剂选用甲苯:乙酸乙酯:甲酸=5:4:1，在硅胶G板上可以很稳定的显示出清晰条带，且样品中条带呈现出规律的一致性。实施例6考查了娃胶G板放置3小时后365nm处焚光图，结果如图7所不，由图可知，选用100%乙醇回流提取的方法，展开剂选用甲苯:乙酸乙酯:甲酸=5:4:1，在硅胶G板上可以很稳定的显示出清晰条带，且样品中条带呈现出规律的一致性，在3小时内荧光显色较为稳定，该方法较为适应于桑黄鉴定。以上所述仅是本专利技术的优选实施方式，应当指出:对于本
的技术人员来说，在不脱离本专利技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本专利技术的保护范围。【主权项】1.，其特征在于，具体步骤如下: 1)首先将桑黄研磨为粉末，用称量天平精确称取该粉末2g，加入50mL乙醇，加热回流，3h后，过滤，然后将滤液蒸干，残渣再加2mL甲醇使桑黄残渣充分溶解后，乙酸乙酯萃取两次，每次30mL，蒸干萃取液，加入甲醇使之溶解，这个作为供试样； 2)吸取5yL上述供试样溶液各于同一薄板上点上，同一展开剂，先展开，再取出，再晾干，置本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种桑黄的薄层色谱鉴定方法，其特征在于，具体步骤如下：1）首先将桑黄研磨为粉末，用称量天平精确称取该粉末2g，加入50mL乙醇，加热回流，3h后，过滤，然后将滤液蒸干，残渣再加2mL甲醇使桑黄残渣充分溶解后，乙酸乙酯萃取两次，每次30mL，蒸干萃取液，加入甲醇使之溶解，这个作为供试样；2）吸取5μL上述供试样溶液各于同一薄板上点上，同一展开剂，先展开，再取出，再晾干，置紫外光灯365nm下检视，最后拍照，在薄板上可以很稳定的显示出清晰条带，且样品中条带呈现出规律的一致性，在3小时内荧光显色较为稳定，即可判断为桑黄。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：闻燕，张攀杰，季娟，徐安捷，李晓彤，
申请(专利权)人：江苏科技大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32