表皮生长因子受体3（HER3)的抗体制造技术

本发明专利技术涉及靶向HER受体的构象表位的抗体或其片段。特别地，本发明专利技术涉及靶向HER受体的构象表位的抗体或其片段和组合物和其使用方法。

【技术实现步骤摘要】
表皮生长因子受体3（HER3)的抗体本申请为2011年8月22日提交的、专利技术名称为“表皮生长因子受体3(HER3)的抗体”的PCT申请PCT/EP2011/064407的分案申请，所述PCT申请进入中国国家阶段的日期为2013年2月20日，申请号为201180040372.1。与相关申请的交叉引用本申请要求在2010年8月20日提交的美国临时申请号61/375,408的优先权，其内容以其整体引入。专利
本专利技术大体上涉及与HER家族受体，例如HER3受体相互作用的抗体或其片段。特别地，其涉及下述抗体或其片段，其识别HER受体(例如HER3)的构象表位，所述构象表位包含来自结构域2和4的残基并且导致配体依赖性和配体非依赖性信号转导的抑制。本专利技术也涉及下述抗体及其片段，其与配体(例如神经调节蛋白)同时结合HER受体(例如HER3受体)，然而阻止配体诱导的信号转导的活化。专利技术背景人表皮生长因子受体3(ErbB3，又称HER3)是受体蛋白酪氨酸激酶并属于受体蛋白酪氨酸激酶的表皮生长因子受体(EGFR)亚家族，所述亚家族还包括EGFR(HER1，ErbB1)，HER2(ErbB2，Neu)和HER4(ErbB4)(Plowman等人，(1990)Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.87：4905-4909；Kraus等人，(1989)Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.86：9193-9197；和Kraus等人，(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.90：2900-2904)。类似典型的表皮生长因子受体，跨膜受体HER3由胞外配体结合结构域(ECD)、ECD中的二聚化结构域、跨膜结构域、胞内蛋白酪氨酸激酶样结构域(TKD)和C-端的磷酸化结构域组成。与其他HER家族成员不同，HER3的激酶结构域显示极低的内在激酶活性。配体神经调节蛋白1(NRG)或神经调节蛋白2结合HER3的胞外结构域，并且通过促进与其他二聚化搭档例如HER2的二聚化来活化受体介导的信号传递途径。异源二聚化导致HER3胞内结构域的活化和转磷酸化，这不仅是信号多样化的手段，而且也是信号放大的手段。此外，HER3异源二聚化也可在缺乏活化配体时发生，这通常被称为配体非依赖性HER3活化。例如，当HER2由于基因扩增(例如在乳腺癌、肺癌、卵巢癌或胃癌中)以高水平表达时，可形成自发的HER2/HER3二聚体。在这种情况下，HER2/HER3被认为是最活跃的ErbB信号传递二聚体，并因此是高度转化的。已经在若干癌症类型中发现增加的HER3，例如乳腺癌、肺癌、胃肠癌和胰腺癌。有趣地是，已有研究显示在HER2/HER3表达和从非侵入期至侵入期的进展之间存在相关性(Alimandi等人，(1995)Oncogene10：1813-1821；DeFazio等人，(2000)Cancer87：487-498；Naidu等人，(1988)Br.J.Cancer78：1385-1390)。因此，需要干扰HER3介导的信号转导的活性剂。专利技术概述本专利技术是基于下述抗原结合蛋白(例如抗体或其片段)的发现，所述抗原结合蛋白结合包含HER3的结构域2和结构域4中的氨基酸残基的HER3受体的构象表位。所述抗体或其片段与结构域2和结构域4的结合稳定了处于失活或封闭构象的HER3受体，从而抑制了HER3活化。令人惊讶地是，抗体或其片段与此构象表位的结合阻断了配体依赖性(例如神经调节蛋白)和配体非依赖性HER3信号传递途径。此外，抗体介导的配体诱导的信号传递的抑制在不阻断配体结合的情况下发生(即配体和抗体都可结合HER3)，这可能是由于HER3不能经历活化所需的构象重排。因此，在一个方面，本专利技术涉及结合HER受体的失活状态态的分离的抗体或其片段，其中所述抗体或其片段阻断配体依赖性和配体非依赖性信号转导。在一个实施方案中，抗体或其片段稳定处于失活态的HER受体。在另一个方面，本专利技术涉及识别HER受体的构象表位的分离的抗体或其片段，其中所述构象表位包含HER受体的结构域2和结构域4中的氨基酸残基，且其中所述抗体或其片段阻断配体依赖性和配体非依赖性信号转导。在一个实施方案中，抗体或其片段结合HER受体的失活态。在一个实施方案中，抗体或其片段结合HER受体的活性态并使其成为失活态。在另一个实施方案中，抗体或其片段稳定处于失活态的HER受体。HER受体选自HER1、HER2、HER3和HER4。抗体选自单克隆抗体、多克隆抗体、嵌合抗体、人源化抗体和合成抗体。另一个方面，本专利技术涉及识别HER受体的构象表位的分离的抗体或其片段，其中所述构象表位包含HER受体的结构域2和结构域4中的氨基酸残基，其中抗体的结合稳定处于失活态的HER受体，且其中HER配体可同时结合HER受体上的配体结合位点。在一个实施方案中，HER配体与配体结合位点的结合未能诱导HER受体构象改变至活性态。在另一个实施方案中，HER配体与配体结合位点的结合未能活化信号转导。在一个实施方案中，HER配体选自神经调节蛋白1(NRG)、神经调节蛋白2、神经调节蛋白3、神经调节蛋白4、乙胞素(betacellulin)、肝素结合表皮生长因子、表皮调节素(epiregulin)、表皮生长因子，双调蛋白和转化生长因子α。在另一个方面，本专利技术涉及识别HER受体的构象表位的分离的抗体或其片段，其中所述构象表位包含HER受体的结构域2和结构域4中的氨基酸残基，其中抗体的结合稳定处于失活态的HER受体，使得HER受体未能与共受体二聚化形成受体-受体复合物。受体-受体复合物形成的失败阻止了配体依赖性和配体非依赖性信号转导的活化。在另一个方面，本专利技术涉及识别HER受体的构象表位的分离的抗体或其片段，其中所述构象表位包含HER受体的结构域2和结构域4中的氨基酸残基，其中抗体与HER受体的结合允许与共受体二聚化形成失活的受体-受体复合物。失活的受体-受体复合物的形成阻止了配体非依赖性信号转导的活化。在另一个方面，本专利技术涉及结合HER3受体的失活构象的分离的抗体或其片段，其中所述抗体阻断配体依赖性和配体非依赖性信号转导。在一个实施方案中，抗体或其片段稳定处于失活态的HER3受体。在另一个方面，本专利技术涉及识别HER3受体的构象表位的分离的抗体或其片段，其中所述构象表位包含HER3受体的结构域2和结构域4中的氨基酸残基，且其中所述抗体或其片段阻断配体依赖性和配体非依赖性信号转导。在一个实施方案中，抗体或其片段结合HER3受体的失活态。在另一个实施方案中，抗体或其片段稳定处于失活态的HER3受体。抗体选自单克隆抗体、多克隆抗体、嵌合抗体、人源化抗体和合成抗体。在另一个方面，本专利技术涉及识别HER3受体的构象表位的分离的抗体或其片段，其中所述构象表位包含HER3受体的结构域2和结构域4中的氨基酸残基，且其中抗体的结合稳定处于失活态的HER3受体，且其中HER3配体可同时结合HER3受体上的配体结合位点。在一个实施方案中，HER3配体与配体结合位点的结合未能诱导HER3受体构象改变至活性态。在另一个实施方案中，HER3配体与配体结合位点的结合未能活化信号转导。在一个实施方案中，HER3配体选自神经调节蛋白1(NRG本文档来自技高网...

【技术保护点】
分离的抗体或其片段，其具有选自以下的序列(a)SEQ ID NO:128的重链可变区CDR1；SEQ ID NO:129的CDR2；SEQ ID NO:130的CDR3；以及SEQ ID NO:131的轻链可变区CDR1；SEQ ID NO:132的CDR2；和SEQ ID NO:133的CDR3；(b)SEQ ID NO:146的重链可变区CDR1；SEQ ID NO:147的CDR2；SEQ ID NO:148的CDR3；以及SEQ ID NO:149的轻链可变区CDR1；SEQ ID NO:150的CDR2；和SEQ ID NO:151的CDR3；(c)SEQ ID NO:164的重链可变区CDR1；SEQ ID NO:165的CDR2；SEQ ID NO:166的CDR3；以及SEQ ID NO:167的轻链可变区CDR1；SEQ ID NO:168的CDR2；和SEQ ID NO:169的CDR3；(d)SEQ ID NO:182的重链可变区CDR1；SEQ ID NO:183的CDR2；SEQ ID NO:184的CDR3；以及SEQ ID NO:185的轻链可变区CDR1；SEQ ID NO:186的CDR2；和SEQ ID NO:187的CDR3；(e)SEQ ID NO:200的重链可变区CDR1；SEQ ID NO:201的CDR2；SEQ ID NO:202的CDR3；以及SEQ ID NO:203的轻链可变区CDR1；SEQ ID NO:204的CDR2；和SEQ ID NO:205的CDR3；(f)SEQ ID NO:218的重链可变区CDR1；SEQ ID NO:219的CDR2；SEQ ID NO:220的CDR3；以及SEQ ID NO:221的轻链可变区CDR1；SEQ ID NO:222的CDR2；和SEQ ID NO:223的CDR3；(g)SEQ ID NO:236的重链可变区CDR1；SEQ ID NO:237的CDR2；SEQ ID NO:238的CDR3；以及SEQ ID NO:239的轻链可变区CDR1；SEQ ID NO:240的CDR2；和SEQ ID NO:241的CDR3；和(h)SEQ ID NO:254的重链可变区CDR1；SEQ ID NO:255的CDR2；SEQ ID NO:256的CDR3；以及SEQ ID NO:257的轻链可变区CDR1；SEQ ID NO:258的CDR2；和SEQ ID NO:259的CDR3。...

【技术特征摘要】
2010.08.20 US 61/375,4081.分离的抗体或其片段，其具有选自以下的序列(a)SEQIDNO:128的重链可变区CDR1；SEQIDNO:129的CDR2；SEQIDNO:130的CDR3；以及SEQIDNO:131的轻链可变区CDR1；SEQIDNO:132的CDR2；和SEQIDNO:133的CDR3；(b)SEQIDNO:146的重链可变区CDR1；SEQIDNO:147的CDR2；SEQIDNO:148的CDR3；以及SEQIDNO:149的轻链可变区CDR1；SEQIDNO:150的CDR2；和SEQIDNO:151的CDR3；(c)SEQIDNO:164的重链可变区CDR1；SEQIDNO:165的CDR2；SEQIDNO:166的CDR3；以及SEQIDNO:167的轻链可变区CDR1；SEQIDNO:168的CDR2；和SEQIDNO:169的CDR3；(d)SEQIDNO:182的重链可变区CDR1；SEQIDNO:183的CDR2；SEQIDNO:184的CDR3；以及SEQIDNO:185的轻链可变区CDR1；SEQIDNO:186的CDR2；和SEQIDNO:187的CDR3；(e)SEQIDNO:200的重链可变区CDR1；SEQIDNO:201的CDR2；SEQIDNO:202的CDR3；以及SEQIDNO:203的轻链可变区CDR1；SEQIDNO:204的CDR2；和SEQIDNO:205的CDR3；(f)SEQIDNO:218的重链可变区CDR1；SEQIDNO:219的CDR2；SEQIDNO:220的CDR3；以及SEQIDNO:221的轻链可变区CDR1；SEQIDNO:222的CDR2；和SEQIDNO:223的CDR3；(g)SEQIDNO:236的重链可变区CDR1；SEQIDNO:237的CDR2；SEQIDNO:238的CDR3；以及SEQIDNO:239的轻链可变区CDR1；SEQIDNO:240的CDR2；和SEQIDNO:241的CDR3；和(h)SEQIDNO:254的重链可变区CDR1；SEQIDNO:255的CDR2；SEQIDNO:256的CDR3；以及SEQIDNO:257的轻链可变区CDR1；SEQIDNO:258的CDR2；和SEQIDNO:259的CDR3。2.分离的抗体或其片段，其具有选自以下的序列：(a)SEQIDNO:134的重链可变区CDR1；SEQIDNO:135的CDR2；SEQIDNO:136的CDR3；以及SEQIDNO:137的轻链可变区CDR1；SEQIDNO:138的CDR2；和SEQIDNO:139的CDR3；(b)SEQIDNO:152的重链可变区CDR1；SEQIDNO:153的CDR2；SEQIDNO:154的CDR3；以及SEQIDNO:155的轻链可变区CDR1；SEQIDNO:156的CDR2；和SEQIDNO:157的CDR3；(c)SEQIDNO:170的重链可变区CDR1；SEQIDNO:171的CDR2；SEQIDNO:172的CDR3；以及SEQIDNO:173的轻链可变区CDR1；SEQIDNO:174的CDR2；和SEQIDNO:175的CDR3；(d)SEQIDNO:188的重链可变区CDR1；SEQIDNO:189的CDR2；SEQIDNO:190的CDR3；以及SEQIDNO:191的轻链...

【专利技术属性】
技术研发人员：W·埃利斯，S·埃滕伯格，A·P·加纳，N·豪布斯特，C·C·S·昆茨，E·A·赖辛格斯普拉格，
申请(专利权)人：诺华股份有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士;CH