马鲛鱼精液的超低温冷冻保存方法技术

技术编号:12292610 阅读:339 留言:0更新日期:2015-11-08 00:21
本发明专利技术公开了马鲛鱼精液的超低温冷冻保存方法,精液和冻存液先在异丙醇和干冰作用下降温,其中干冰为冷冻介质,异丙醇为降温的梯度介质,可以在不损伤精子情况下,使冷冻管内冻存液逐渐冻结,再在液氮中保存,这样在液氮中速冻前,精子已冻结,速冻就不会损伤精子,因此本发明专利技术是一种方法简单,速冻时精子不会冻坏的马鲛鱼精液的超低温冷冻保存方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及鱼类精液的保存,具体涉及。
技术介绍
马鲛鱼属鲈形目,鲅科,是一种重要的海洋经济鱼类。虽然马鲛鱼人工繁殖和养殖难度较大,但目前已获得初步成果。马鲛鱼批量人工繁殖中,对马鲛鱼精液的保存也是关健点。鱼类精液的保存方法多种多样,如4°C常温保存,低温保存,超低温冷冻保存,不同的方法保存液也有所不同,超低温冷冻保存的保存液称为冷冻保存液,简称冻存液,如公开号为CN104604845就公开了哲罗鲑精液的冷冻保存液及保存方法,其冻存液的组成为氯化钠、氯化钾、氯化钙、碳酸氢钠、磷酸二氢钾、葡萄糖和水,其保存方法为冻存液中加入适量丙三醇,4°C下平衡,然后加入精液,4°C下平衡,再用二次加入适量丙三醇平衡,然后在液氮中速冻冻存。该冻存方法较复杂,要多次用丙三醇平衡,但冻存液仍为液态,在液氮中速冻时有可能冻坏精子。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种方法简单,速冻时精子不会冻坏的。本专利技术解决上述技术问题所采用的技术方案为:,其步骤如下: a、按体积比1:3?5的比例,将精液和冻存液放入冷冻管,封盖,然后冷冻管浸入布满干冰和异丙醇的盒子降温,降温至冷冻管内冻存液冻结,该盒子内先堆满干冰,再在干冰间隙中注满异丙醇; b、取出冷冻管放入液氮中保存。与现有技术相比,本专利技术的优点在于,精液和冻存液先在异丙醇和干冰作用下降温,其中干冰为冷冻介质,异丙醇为降温的梯度介质,可以在不损伤精子情况下,使冷冻管内冻存液逐渐冻结,再在液氮中保存,这样在液氮中速冻前,精子已冻结,速冻就不会损伤精子,因此本专利技术是一种方法简单,速冻时精子不会冻坏的。【具体实施方式】以下结合实施例对本专利技术作进一步详细描述。实施例1 吸取新鲜精液1ml,放入冷冻管,再加入4ml冻存液混合,封盖,然后冷冻管浸入布满干冰和异丙醇的盒子降温,盒子内先堆满干冰,再在干冰间隙中注满异丙醇,降温几小时后,冷冻管内冻存液冻结,取出冷冻管放入液氮中保存。实施例2与实施例1基本相同,所不同的只是精液为5ml,冻存液为15ml。实施例3与实施例1基本相同,所不同的只是精液为3ml,冻存液为15ml。【主权项】1.,其特征在于步骤如下: a、按体积比1:3?5的比例,将精液和冻存液放入冷冻管,封盖,然后冷冻管浸入布满干冰和异丙醇的盒子降温,降温至冷冻管内冻存液冻结,该盒子是盒子内先堆满干冰,再在干冰间隙中注满异丙醇; b、取出冷冻管放入液氮中保存。【专利摘要】本专利技术公开了,精液和冻存液先在异丙醇和干冰作用下降温,其中干冰为冷冻介质,异丙醇为降温的梯度介质,可以在不损伤精子情况下,使冷冻管内冻存液逐渐冻结,再在液氮中保存,这样在液氮中速冻前,精子已冻结,速冻就不会损伤精子,因此本专利技术是一种方法简单,速冻时精子不会冻坏的。【IPC分类】A01N1/02【公开号】CN105010305【申请号】CN201510380279【专利技术人】郑春静, 刘军 【申请人】宁波市海洋与渔业研究院【公开日】2015年11月4日【申请日】2015年7月2日本文档来自技高网...

【技术保护点】
马鲛鱼精液的超低温冷冻保存方法,其特征在于步骤如下:a、按体积比1:3~5的比例,将精液和冻存液放入冷冻管,封盖,然后冷冻管浸入布满干冰和异丙醇的盒子降温,降温至冷冻管内冻存液冻结,该盒子是盒子内先堆满干冰,再在干冰间隙中注满异丙醇;b、取出冷冻管放入液氮中保存。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:郑春静刘军
申请(专利权)人:宁波市海洋与渔业研究院
类型:发明
国别省市:浙江;33

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