包含硅化病毒的免疫原性组合物及其使用方法技术

本文公开了包覆于二氧化硅中的病毒保有感染性以及诱导受感染的宿主内的免疫应答的能力。此外，硅化病毒是十分耐干燥的。本文提供了通过向受试者施用有效量的硅化病毒或硅化病毒颗粒来诱导受试者体内的病毒特异性免疫应答的方法。本文还描述了通过向受试者施用硅化病毒或硅化病毒颗粒来增强受试者体内病毒特异性的细胞介导的免疫应答(例如T细胞介导的免疫应答)的方法。此外，本文还提供了包含硅化病毒或硅化病毒颗粒的免疫原性组合物，例如可用作疫苗的组合物。所述免疫原性组合物包含药学可接受的载体和/或佐剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】 相关申请的交叉引用 本申请要求2013年1月31日提交的申请号为61/759, 131的美国临时申请的权 益，其整体通过引用并入本文。
本公开内容涉及通过将病毒和相关颗粒包裹于二氧化硅中来保存病毒和相关颗 粒。本公开内容还涉及包含硅化的病毒或病毒颗粒的免疫原性组合物，及其用于诱导或改 变受试者内的免疫应答的用途。 政府支持的感谢 本专利技术是通过在由美国国家航空航天管理局授予的基金号NNA11AC01G以及由美 国国家科学基金会授予的基金号DGE:0114427下的政府支持来完成的。政府在本专利技术中享 有一些权利。
技术介绍
对于病毒的传播机制，尤其是孤"岛"生态系统（例如，温泉）的生物体病毒的地方 性流行，人们知之甚少并且争论激烈。对于病毒的物种是世界性的（Breitbart和Rohwer， TrendsMicrobiol13:278, 2005)还是显示出地区特殊性存在分歧。虽然一些研究显示 了病毒基因组之间的尖锐的地区差异（Whitaker等，Science301 :976, 2003)，这表明有限 的传播，但是另一些研究发现某些具有几乎相同基因组的病毒的全球分布（Breitbart等， FEMSMicrobiolLett236 :249,2004;Short和Suttle，ApplEnvironMicrobiol71 :480， 2005)。考虑到病毒在维持微生物多样性和营养物质再循环方面的重要性（Suttle，NatRev Microbiol5 :801，2007)，影响病毒传播的任何事物都将具有重大的生态影响。 -份研究已经显示，通过温泉喷气口的病毒烟雾化可导致局部的病毒传播 (Snyder等，ProcNatlAcadSciUSA104:19102, 2007)，这表明，如果病毒颗粒能够到达 上层风，则可进行更远距离的传播（Smith等，Aerobiologia26:35,2010)。风媒病毒传播 的限制因素是病毒耐干燥的能力；大多数病毒对干燥非常敏感（Ding等，GynecolOncol 121 :148,2011;Fogarty等，VirusRes132 :140,2008;Nakano等，FishPathol33 :65， 1998)并且在气溶胶形式中将迅速失去感染性。 以前的研究已经表明，可在模拟温泉的条件下用二氧化硅来包覆病毒（Laidler 和Stedman，Astrobiology10 :569, 2010 ;0range等，Biogeosciences8 :1465, 2011)。然 而，在本公开内容以前，尚未知晓包覆于二氧化硅中的病毒是否保有感染性或诱导受感染 的宿主内的免疫应答的能力。
技术实现思路
本文公开了硅化病毒颗粒保有感染宿主细胞和诱导体内病毒特异性免疫应答的 能力。 本文提供了方法，其通过将有效量的硅化病毒/硅化病毒颗粒施用至受试者来诱 导受试者体内对所选的一种或多种抗原（例如，病毒抗原）的特异性免疫应答（例如，病毒 特异性免疫应答）。在一些实施方案中，所述免疫应答包括激活病毒特异性T细胞、产生病 毒特异性抗体、产生细胞因子或其任意组合。 本文还提供了包含硅化颗粒（例如，硅化病毒颗粒）以及药学可接受的载体和/ 或佐剂的免疫原性组合物。 本文还提供了方法，其通过将硅化病毒或硅化病毒颗粒施用至所述受试者来增强 受试者体内的抗原（例如，病毒抗原）特异性的细胞介导的免疫应答，其中所述抗原特异性 的细胞介导的免疫应答相对于施用未经硅化的病毒或病毒颗粒后的细胞介导的免疫应答 增强。在一些实施方案中，所述病毒特异性的细胞介导的免疫应答的增强由病毒特异性T 细胞数的升高、病毒特异性T细胞激活的升高、细胞因子产生的升高或其任意组合来确定。 在所公开的方法和组合物的一些实施方案中，所述病毒感染真核细胞，诸如动物 细胞。在一些具体例子中，所述病毒是哺乳动物病毒。 本专利技术的上述以及其它目的、特征和优点将从下面的详细描述而变得更加明显， 其参照附图进行。【附图说明】 图1A是显示出通过二氧化硅处理而使病毒可逆失活的曲线图。图中示出了硅化 作用对噬菌体T4(菱形）、SSV-K(方块）、PRD1 (三角形）和VACV(星形）的感染性的影 响，所述影响归一化至初始感染性。黑色符号是600ppm(10mM)二氧化娃溶液，灰色符号是 300ppm(5mM)，并且白色符号是对照（Oppm二氧化娃）。垂直的黑色箭头表示转移至低浓度 二氧化娃。所有的空斑测定都对三份生物重复（biologicalreplicates)进行三次试验， VACV除外，其仅有一份生物重复。误差线被数据点符号遮盖（obscured)。 图1B是显示出硅化病毒耐干燥的曲线图。图中示出了硅化作用对干燥后的硅化 病毒（T4和SSV-K)的感染性的影响，所述影响归一化至初始感染性。白色条是硅化作用十 天后的感染性；带交叉影线的条是干燥十天并再水化十天后的感染性；黑色条是干燥三十 天并再水化十天后的感染性。 图2是评价施用硅化VACV和未经硅化的VACV后小鼠内的免疫应答的实验设计示 意图。 图3是显示出施用硅化VACV和未经硅化的VACV后VACVB8R抗原特异性的⑶8+T 细胞和IFN-y+/B8R-特异性的T细胞的频率和数量的一系列曲线图。 图4是显示出施用硅化VACV和未经硅化的VACV后VACVB8R抗原特异性的效应 T细胞和记忆T细胞的百分率的一系列曲线图。 图5是显示出加强（booster)施用硅化VACV和未经硅化的VACV后VACVB8R抗 原特异性的CD8+T细胞和IFN-y+/B8R-特异性的T细胞的频率和数量的一系列曲线图。 图6是显示出加强施用硅化VACV和未经硅化的VACV后VACVB8R抗原特异性的 效应T细胞和记忆T细胞的百分率的一系列曲线图。【具体实施方式】 I?缩略语表ELISA酶联免疫吸附测定HIV 人类免疫缺陷病毒IFN 干扰素IL 白细胞介素 MHC主要组织相容性复合物 MWC0截留分子量PFU 空斑形成单位SSV-K纺锤形硫化叶菌病毒-堪察加1型（Sulfolobusspindle-shapedvirus-Kamchatka1)TGF 转化生长因子TNF 肿瘤坏死因子VACV牛痘病毒II?术语和方法 除非另有注明，否则技术术语根据常规用法来使用。分子生物学中常用术语的定 义可在以下出版物中找到：BenjaminLewin，GenesV，OxfordUniversity出版社出版， 1994(ISBN0-19-854287-9) ;Kendrew等（编），TheEncyclopediaofMolecularBiology， BlackwellScienceLtd.出版，1994(ISBN0-632-02182-9);RobertA.Meyers(编）， MolecularBiologyandBiotechnology：aComprehensiveDeskReference,VCH PublishersInc.出版，1995 (ISBN1-56081-569-8);以及"VirusTaxonomy:Eighth ReportoftheInternationalCom本文档来自技高网...

【技术保护点】
诱导受试者体内的病毒特异性免疫应答的方法，其包括将有效量的硅化病毒或硅化病毒颗粒施用至所述受试者，从而诱导所述受试者体内的病毒特异性免疫应答。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：K·M·斯泰德曼，J·R·莱德勒，K·巴亚特，
申请(专利权)人：波特兰州立大学，俄勒冈州健康与服务部，
类型：发明
国别省市：美国;US