动物双歧杆菌动物亚种菌株制造技术

本发明专利技术涉及一种新的动物双歧杆菌动物亚种菌株，其尤其能够改善肠神经系统的功能，以及包括所述新的菌株的组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种新的动物双歧杆菌动物亚种（Bifidobacterium animalis ssp. animal is)菌株。此菌株尤其能够通过增加肠神经系统（ENS)的血管活性肠肽（VIP)水平 来改善肠神经系统的功能，以例如促进肠道运动性或屏障完整性的功能。因此，此菌株可用 于预防和/或减轻胃肠不适或胃肠疾病。
技术介绍
肠神经系统（ENS)是整合的神经系统，其沿肠道形成2个主要的具有功能特异性 作用的神经丛（Furness, J. Auton. Nerv. Syst.，81 (1-3) : 87-96, 2000)。位于纵肌和环状肌 之间的肠肌丛包含主要参与控制胃肠（GI)运动性的神经元。位于环状肌和粘膜之间的黏 膜下神经丛包含主要参与控制肠上皮屏障（IEB)功能的神经元。肠神经元通过释放作用于 肠神经元支配的靶细胞的神经介质来控制GI功能。 对于消化系统，神经介质VIP诱导平滑肌松弛（低级食管括约肌、胃和胆囊）、刺激 水分泌至胰液和胆汁中，并使得抑制胃酸分泌和自肠腔中的吸收。其在肠道中的作用是极 大地刺激了水和电解质的分泌，以及扩张肠平滑肌、扩张周边血管、刺激胰碳酸氢盐的分泌 并抑制由胃泌素刺激的胃酸分泌。这些影响共同作用以增强运动性。因此，增加VIP有益 地改善了胃肠道肌肉的松弛。 肠上皮屏障由极化的特异化细胞的连续单层构成，特异化细胞通过控制屏障渗透 性以及上皮细胞极性的紧密的连接相关蛋白如紧密连接蛋白-l(ZO-l)而聚在一起。体 外和体内的研究表明，益生菌可以通过调节Z0-1来影响上皮抵抗力并降低渗透性（Eun 等人，APMIS, 119(1) : 49-56, 2011 ;Miyauchi 等人，J. Dairy Sci.，92(6) : 2400-8, 2009)。 由ENS合成的神经介质也参与了肠道渗透性调节（H丨:illgren等人，Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol.，275:G95_103,1998 ;Hayden 等人，Am.J. Physiol. Regul.Integr.Comp.Physiol.，278:R1589-94,2000;Neunlist 等人，Am.J.Physiol. Gastrointest. Liver Physiol.，285 (5) :G1028_36, 2003)。例如，在由新生儿母体分离所 诱导的结肠中的增强的乙酰胆碱的神经元合成导致了大鼠中上皮细胞旁渗透性的增加 (Gareau 等人，Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol.，293: G198-203, 2007)。相比 之下，由粘膜下神经元所释放的血管活性肠肽（VIP)通过调节紧密连接蛋白Z0-1在肠上皮 细胞中的表达增加了 IEB 的抵抗力（NeunliSt 等人，J. Intern. Med.，263(6) : 577-83, 2008) 进一步增强VIP在调节屏障功能中的作用的最近研究表明VIP增加了在小鼠的由鼠类柠 檬酸杆菌（Citrobacter rodentium)诱导的结肠炎中的屏障抵抗力（Conlin等人，Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol.，297(4):G735_50, 2009)〇 数项研究测量了 一些益生菌对ENS神经介质（包括VIP)的作用。Kamm等人 (Neurogastrointest. Motil.，16:53-60, 2004)公开了 布拉氏酵母菌（Saccharomyces boulardii)对减少钙结合蛋白-28k (CALB)的作用，而对猪空肠的其它神经元标 记物（ChAT、VIP、SP、NF_l6〇 等）没有作用。Metugriachuk 等人（Rejuvenation Res.，9:342-345, 2006)公开了在年老的Wistar大鼠的小肠和大肠的运动性上的共生制备 显著地增加了小肠和结肠的肌电活性，并导致VIP的mRNA表达增加，但对VIP浓度没有显 著的作用。 已知细菌菌株可提供与健康相关的益处。这样的菌株通常被称为益生菌，并用于 食品。需要新的可以引入到食品中且具有改良的与健康相关的益处和/或其它益处如感官 性质和/或可加工性的菌株。 在国际申请W0 2011/148219中，发现包括乳酸菌的组合物在ENS中增加了 VIP水 平，从而提高了 ENS功能。这些乳酸菌尤其是植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum)CNCM 1-4318、短双歧杆菌（Bifidobacterium breve) CNCM 1-2219、动物双歧杆菌乳酸菌亚种 (Bifidobacterium animalis ssp.lactis)CNCM 1-2494 和短双歧杆菌（Bifidobacterium breve)CNCM 1-4321。
技术实现思路
在本文中，本专利技术人鉴定了一种新的细菌菌株，特别地，其尤其可以调节肠神 经系统以促进肠道运动性和屏障完整性功能，并且特别地，其所增加的VIP水平多于TO 2011/148219中所公开的菌株。此菌株被归类为动物双歧杆菌动物亚种菌株，并根据布达 佩斯条约在2012年3月6日保藏于作为国际保藏机构的CNCM(Collection Nationale de Cultures de Microorganismes，法国国家微生物保藏中心），编号1-4602。 因此，本专利技术涉及动物双歧杆菌动物亚种CNCM 1-4602菌株。 此菌株的特征如下： -菌落形态（固体MRS+半胱氨酸，于37°C 72h，厌氧条件）：小的、圆形的且白的、 规则的且半透明的菌落； -微观形态（液体MRS+半胱氨酸，于37°C 16h，厌氧条件）：厚的、大的、两极的、萌 芦形杆菌；-下列底物的发酵（API 50CH条上，API MRS培养基中，于37°C48h) :L-阿拉伯糖、 D-木糖、D-半乳糖、D-葡萄糖、D-麦芽糖、D-蜜二糖、D-蔗糖和D-棉子糖；-生化鉴定（API 20A条上，API 20A培养基中于36°C 24h):无芽孢，革兰氏染色 阳性，棒状，在存在D-葡萄糖、D-蔗糖、D-麦芽糖、水杨苷、D-木糖、L-阿拉伯糖和D-棉子 糖、明胶和七叶苷水解作用的情况下酸化；-所检测到的酶活性（API ZYM条上，于37°C 4h):酯酶（C4)、亮氨酸芳基酰胺酶、 胱氨酸芳基酰胺酶、a-半乳糖苷酶、半乳糖苷酶和a-葡糖苷酶。 本专利技术还包括衍生自本专利技术的菌株的仍对VIP有活性的突变菌株或遗传转化菌 株。这些突变体或遗传转化菌株可以是其中一种或多种亲本菌株的内源基因被突变的菌 株，例如以修改其一些代谢性质（例如其发酵糖类的能力、其对酸度的抗性、其运送至胃肠 道的生存力、其后酸化或其代谢物生产）。它们还可以是用一个或多个目标基因遗传转化亲 本菌株所获得的菌株，例如以赋予所述菌株另外的生理特征，或以使其表达希望通过所述 菌株施用的具有治疗或疫苗兴趣的蛋白。 本专利技术的菌株以及如上所定义的突变体可用作益生菌。其可用于预防和/或减轻 胃肠不适或胃肠本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种动物双歧杆菌动物亚种菌株，其于2012年3月6日保藏于CNCM(Collection Nationale de Cultures de Microorganismes，法国国家微生物保藏中心)，保藏号为I‑4602。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：索菲·勒格兰拉斯波，詹弗兰科·格龙波内，桑德兰·卡普罗尼耶，塔玛拉·什莫克维纳，玛丽克里斯蒂娜·德吉弗里，比里亚纳·莱西奇，米歇尔·伊诺恩利斯特，
申请(专利权)人：热尔韦·达诺尼公司，
类型：发明
国别省市：法国;FR