本发明专利技术属于医药技术领域，涉及从忍冬科植物金银花(Lonicera japonica) 干燥的花蕾中提取分离的一系列新的环烯醚萜苷类化合物Loniceranan A、Loniceranan B、Loniceranan C，它们具有相同的裂环环烯醚萜苷母核。本发明专利技术还涉及该类新化合物及其制备药物的降糖生理活性及其医药用途。该类化合物可以和药学上可接受的载体结合制成临床上可接受的剂型，用于各类糖尿病的治疗。本发明专利技术制备方法简单，重现性好，纯度高。获得的化合物具有良好的降糖活性作用。
【技术实现步骤摘要】
： 本专利技术属于医药
，涉及金银花中环烯醚萜苷类化合物及其制备方法，本 专利技术还涉及该类新化合物在制备降糖药物中的应用。
技术介绍
： 糖尿病源于人体内胰岛素分泌不足，由此引发以糖代谢混乱为主的全身性疾病， 并伴随机体一系列的并发症，很难治愈，对患者的生活造成严重影响。糖尿病是世界范围的 最常见的流行性疾病之一，其死亡率在发达国家仅次于心血管疾病，恶性肿瘤，成为第三位 致死病因的疾病。α-糖苷酶抑制剂（例如阿卡波糖）临床上常被用作抗糖尿病药物，它们 能改善血管通透性和降低血糖水平。然而，长期使用一些α-糖苷酶抑制剂会对患者造成 过重的经济负担，最重要的是其副作用不良反应较大，对人的其他机体功能造成严重损害， 例如腹泻等肠道紊乱性疾病。因此有必要寻找新的、安全、有效的抗糖尿病的药物。许多中 药通过活血化瘀、消热解毒、补益的作用来改善人的各项机能，达到防治糖尿病的目的。而 且中药治疗糖尿病的作用机制、途径，具有多向性，多层面和多靶点的药理特点，有着西药 等化学合成药物不可比拟的优势。因此，从中药中寻找疗效确切的降糖天然药物，明确其药 效物质基础，进而开发出高效低毒的抗糖尿病新药，已成为目前国内外研究的热点。 金银花为忍冬科植物忍冬（Lonicera japonica)的干燥花蕾或带初开的花，为我 国常用中药，具有3000多年的历史。具有清热解毒、凉散风热之功效，主治痈肿疔疮、喉痹、 丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等症。目前从金银花中报道分离得到多种类型化合物， 其中环烯醚萜苷类化合物具有很好降糖效果。因此从金银花中寻找降糖活性好的环烯醚萜 苷类化合物具有一定的价值。
技术实现思路
： 本专利技术的目的旨在从金银花干燥的花蕾中寻找新的降糖前体药物，提供该环烯醚 萜苷类化合物的提取、制备方法，并且研究它们的降糖活性和医药用途。本专利技术的另一个目 的在于提供该类化合物的结构鉴定方法。 本专利技术所述3个新的具有降糖活性环稀醚砲苷类化合物Loniceranan A、 Loniceranan B、Loniceranan C，其结构如下所不： 本专利技术所述新的环烯醚萜苷类化合物的提取、制备方法如下： 取干燥的金银花用水煎煮，合并提取液浓缩得浸膏，浸膏采用大孔吸附柱色谱，以 乙醇-水系统0:100~100:1逐渐洗脱，共收集10~15个馏分，经硅胶薄层层析检识，合并 为Al~A4, A2 (大孔树脂乙醇-水15:85~30:70下洗脱）通过聚酰胺柱色谱，以纯水进 行洗脱，洗脱液经减压蒸馏后得B，B经快速减压柱色谱以二氯甲烷/三氯甲烷-甲醇-水 系统50:1:0. 01~1:1:0. 01梯度洗脱，共得20~40个馏分，通过硅胶薄层板层析检识，合 并为Cl~C5, Cl经ODS柱色谱以甲醇-水系统10:90~100:0梯度洗脱得到20~30个 馏分，经分析液相检识，合并为Dl~D7,利用HPLC法以乙腈-水为流动相在D2-D5中制备 得到化合物1-3。其中，水煎煮提取2~5次，每次6~10小时。所述的乙腈-水的比例为 10:90-30:70。 具体地，本专利技术中所述三个化合物的制备方法如下： 取干燥的金银花花蕾10-15kg用水煎煮提取2~5次，每次6~10小时，药材与 水的比例为：1:3~1:5,合并提取液浓缩得浸膏，浸膏采用大孔吸附柱色谱，以乙醇-水系 统0:100~100:1逐渐洗脱，共收集10~15个馏分，经硅胶薄层层析检识，合并为Al~ A4, A2 (300~500g)通过聚酰胺柱色谱，以纯水进行洗脱，洗脱液经减压蒸馏得B，B经快速 减压柱色谱以二氯甲烷/三氯甲烷-甲醇-水系统50:1:0. 01~1:1:0. 01梯度洗脱，共得 20~40个馏分，通过硅胶薄层板层析检识，合并为Cl~C5, Cl经ODS柱色谱以甲醇-水 系统10:90~100:0梯度洗脱得到20~30个馏分，经分析液相检识，合并为Dl~D7,利用 HPLC法以乙腈-水为流动相（10:90-30:70)在D2-D5中制备得到化合物1-3。本专利技术所述 新的环烯醚萜苷类化合物具有较好的降糖活性。 活性试验方法如下： 1.实验材料 1. 1受试品：化合物 L 2实验酶及来源α -糖苷酶 2.实验方法 2. 1药物处理 称取I. 5mg样品至ImL EP管底部，加150 μ L PBS溶剂稀释至10mg/mL的溶液，储 存于-20°C。用时用相应的培养液将其稀释成10、5、2. 5、1. 25、0. 625mg/ml用。选取阿卡波 糖作为阳性对照药，称取lmg，加入10 μ L DMS0,再加入90 μ L PBS。配成约lmg/100 μ L的 溶剂。用时稀释成l〇、5、2. 5、1.25mg/ml用。选取α-糖苷酶作为反应酶，称取Img酶，加 ImL PBS溶解，配成lmg/mL的溶液，取10 μ 1稀释至I. 580mL。选取pNPG作为反应底物，称 取I. 51mg底物置IOmL EP管中，加 PBS至刻度，溶解，即为0. 5mM/L的底物溶液，避光保存。 2. 2 MTT法的测定方法 预先往96孔板孔里加入样品溶液50 μ L (磷酸缓冲液分别稀释成若干含量梯度）， 加入酶溶液（0. 1U) 100 μ L，37度孵育IOmin后，加入底物pNPG(0. 5mM) 50 μ L，孵育30min， 酶标仪上405nm处测定吸光度。 抑制率（％ ) = X100% 2.3.统计方法 全部资料采用SPSS (13. 0)统计软件包进行检验分析。各组数据用均值土标准误 (Mean土 S. E.)表示，采用One-Way ANOVA评价整体性差异，并进行Dunnett或Dunnett ' s T3检验进行组间比较。 3.实验结果 表1化合物对α -糖苷酶的ICsn (mM/L) 由上述实验结果可看本专利技术所涉3种化合物对α -糖苷酶具有一定抑制作用。其 中化合物2和3的作用明显，和阳性对照药阿卡波糖效果相当。化合物1对α -糖苷酶的 作用较弱。 本专利技术所涉环烯醚萜苷类新化合物，对α -糖苷酶有一定的抑制作用，可用于开 发抗糖尿病类药物，尤其针对临床化疗阶段药物。 本专利技术制备方法简单，重现性好，提取纯度高。获得的化合物具有较好的降糖活性 作用。【附图说明】 图 1 为 1 的 1H-NMR 图 2 为 1 的 13C-NMR 图 3 为 1 的 HSQC 图 4 为 1 的 HMBC 图 5 为 1 的 NOESY 图 6 为 2 的 1H-NMR 图 7 为 2 的 13C-NMR 图 8 为 2 的 HSQC 图 9 为 2 的 HMBC 图 10 为 2 的 NOESY 图 11 为 3 的1H-NMR 图 12 为 3 的 13C-NMR 图 13 为 3 的 HMBC 图 14 为 3 的 NOESY【具体实施方式】： 制备实施例1 取干燥的金银花花蕾IOkg用水煎煮提取3次，每次6小时，药材与水的比例为： 1:3,合并提取液浓缩得浸膏，浸膏采用大孔吸附柱色谱，以乙醇-水系统0:100、15:85、 30:70、50:50、IOO: O逐渐洗脱，共收集12个馏分，经硅胶薄层层析检识，合并为A1~A4， A2(350g)通过聚酰胺本文档来自技高网...
【技术保护点】
如下所示的环烯醚萜苷类化合物：。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：宋少江，彭缨，刘志翔，李玲芝，刘庆博，黄肖霄，
申请(专利权)人：沈阳药科大学，
类型：发明
国别省市：辽宁;21
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。