一种构树叶总黄酮的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种构树叶总黄酮的应用，属于药物用途领域，该药物对于脑缺血或心肌缺血有明显的抑制作用，可以长期服用，无副作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物用途领域，具体涉及植物提取物的应用。
技术介绍
构树为桑科植物，构树在中国的温带、热带均有分布，不论平原或丘陵都能生长， 该树种具有速生、适应性强、分布广、易繁殖、热量。构树的叶具有清热，凉血，利湿，杀虫，用 于鼻紐，肠炎，痢疾。 从20世纪80年代开始，人们即开始对构树的化学和药理进行研究，见高允生，邱 玉芳，高聆，等.构叶醇提取物与黄酮苷对离体心房的抑制作用.中国药理学通报， 1988,4 (2): 122-123。从构树的整株植物中分离得到了多个黄酮类化合物，对构树叶的乙 醇提取物（BPAE)与总黄酮苷（BPF)对家兔和豚鼠离体心房的作用进行了研究，发现BPAE 和BPF均有抑制家兔和豚鼠心房收縮的作用，且BPF的效价强度远大于BPAE，证明了 BPF 是构树抑制心房收縮的主要有效成分，同时也说明了构树叶具有类似钙拮抗剂的作用，构 树叶总黄酮还有抑制人肝癌细胞的作用，但是还没有关于抑制脑缺血和心肌缺血方面的报 道。
技术实现思路
本专利技术需要解决的技术问题是提供。 为解决上述技术问题，本专利技术所采用的技术方案是： 所述构树叶总黄酮在制备治疗心肌缺血或脑缺血药物中的应用。 所述构树叶总黄酮在制备抑制脑缺血后脑梗塞的药物中的应用。 构树叶总黄酮的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂湖丸剂。 构树叶总黄酮用量为30mg-300mg/天。 构树叶总黄酮的制备方法由以下步骤制成： A、 称取构树叶，加12倍量60%乙醇浸泡30分钟，回流提取3次，每次2小时，过滤，滤 液减压浓缩，加5倍量水，混匀，冷藏，过滤，滤液备用； B、 大孔吸附树脂纯化：步骤A所得滤液用盐酸调ph=3-4,用大孔吸附树脂进行纯化，上 样流速为2倍柱体积每小时，饱和1小时，水洗脱6倍柱体积，40%乙醇洗脱6倍柱体积，40% 乙醇洗脱液回收，减压浓缩，得到浓缩液，备用； C、 聚酰胺纯化：大孔吸附树脂纯化后的浓缩液用聚酰胺进行纯化，上样流速为1倍柱 体积每小时，饱和1小时，20%乙醇洗脱10倍柱体积，60%乙醇洗脱15倍柱体积，60%乙醇洗 脱液回收，减压干燥成干膏粉碎过60目筛，即得。 构树叶总黄酮的含量测定方法由以下步骤制成： A、供试品溶液的制备：取构树叶总黄酮粉末，加60%乙醇，密封，回流提取60分钟，提取 液过滤，用60%乙醇定容，精密吸取lml，加蒸馏水5ml，然后加入5%亚硝酸钠溶液lml，放 置6分钟；再加入10%硝酸铝lml，放置6分钟；加入4. 3%氢氧化钠10ml，用蒸馏水定容，摇 匀，放置15分钟，取蒸馏水，按上述步骤制成阴性对照液； B、 标准曲线制备：取构树叶总黄酮对照品，精密称定，加60%乙醇溶解并稀释，摇匀，得 到对照品一级储备液，分别精密吸取一系列不同量的对照品一级储备液，再分别加不同量 的水制成浓度均不同的对照品二级溶液，然后分别加入5%亚硝酸钠溶液lml，放置6分钟； 再加入10%硝酸铝lml，放置6分钟；加入4. 3%氢氧化钠 lml，用蒸馏水定容，摇匀，放置15 分钟，得到对照品溶液；取6ml蒸馏水，按上述步骤制成阴性对照液，在513nm处测定，以浓 度为横坐标，吸收度为纵坐标，做标准曲线； C、 结果：取供试品溶液测定吸收度，带入回归方程，计算总黄酮的含量。 为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料，例如：填充 剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括：淀粉、预 胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括：淀粉、预胶化淀粉、微 晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠 等；润滑剂包括：硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括：聚乙烯吡 咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷 酮、羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括：糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味 剂包括：甜味剂及各种香精；防腐剂包括：尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、 苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等；基质包括：PEG6000, PEG4000,虫蜡等。 本专利技术的剂型不限于上述几种，还可以按照常规方法制成其他剂型。 为了验证该药物的作用，做了如下实验： 构树叶总黄酮的提取 称取构树叶lkg，加12倍量60%乙醇浸泡30分钟，回流提取3次，每次2小时，过滤， 滤液减压浓缩至生药浓度lg/ml，加5倍量水，混匀，4-10度冷藏24小时，过滤，滤液备用。 大孔吸附树脂纯化：滤液用lmol/1的盐酸调ph=3-4,用HZ816型号的大孔吸附树 脂进行富集纯化，Ig树脂吸附6ml药液，上样药液浓度为0. 16g/ml (生药浓度)，上样流速 为2倍柱体积每小时，饱和1小时，水洗脱6倍柱体积，40%乙醇洗脱6倍柱体积，40%乙醇 洗脱液回收，减压浓缩至浓度〇. 2g/ml (生药浓度)，备用。 聚酰胺纯化：大孔吸附树脂纯化后的药液用聚酰胺进行富集纯化，Ig聚酰胺 (40-60目）吸附15ml药液，，上样药液浓度为0. 2g/ml (生药浓度)，上样流速为1倍柱体积 每小时,饱和1小时,20%乙醇洗脱10倍柱体积，60%乙醇洗脱15倍柱体积，60%乙醇洗脱液 回收，减压干燥成干膏粉碎过60目筛,干膏的总黄酮含量在50%以上，回收率达90%以上。 总黄酮测定： 总黄酮含量测定方法 供试品溶液的制备 取构树叶总黄酮粉末0. lg，精密称定三份，，加60%乙醇150ml，密封，回流提取60分 钟，提取液过滤，用60%乙醇定容至200ml。精密吸取Iml，加蒸馏水5ml，然后加入5%亚硝 酸钠溶液lml，放置6分钟；再加入10%硝酸错lml，放置6分钟；加入4. 3%氢氧化钠 IOml, 用蒸馏水定容至刻度，摇匀，放置15分钟。用阴性对照液做对照测定吸收度，带入回归方 程，计算总黄酮的含量，结果见表2。 测定波长的选择 取对照品、供试品溶液适量，于400~700nm扫描，得知对照品溶液与样品溶液最大吸 收波长一致，均为513nm，故确定513nm为测定波长。 标准曲线制备 取构树叶总黄酮对照品10. 13mg，精密称定，置25ml容量瓶中，加60%乙醇溶解并稀释 至刻度，摇匀，得到储备液。分别精密吸取储备液I. 〇、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0、6. 0ml，完全转移 至25ml容量瓶中，再分别加水5. 0、4. 0、3. 0、2. 0、1. 0、0ml ;然后分别加入5%亚硝酸钠溶液 lml，放置6分钟；再加入10%硝酸铝lml，放置6分钟；加入4. 3%氢氧化钠 lml，用蒸馏水 定容至刻度，摇匀，放置15分钟。用阴性对照液(取6ml蒸馏水，按上述步骤依次加入亚硝 酸钠等溶液，定容至25ml，摇匀)作对照，在513nm处测定。以浓度（X )为横坐标，吸收度 (Y )为纵坐标，做标准曲线。结果见表1。 表-1线性关系考察表实验结果可见：总黄酮浓度在0. 016~0. 097mg/ml之间，线性关系良好。 表-2含量测定结果实验例1构树叶总黄酮对垂体后叶素致大鼠心肌缺血保护作用 实验目的 本实验以发生心肌缺血的动物数为指标，观察本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种构树叶总黄酮的应用，其特征在于：所述构树叶总黄酮在制备治疗心肌缺血或脑缺血药物中的应用。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：姜新刚，赵韶华，贾继明，宋剑，刘静媛，高贤，苏平菊，柴振平，姬雪礼，李文烈，
申请(专利权)人：河北以岭医药研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：河北;13