一种解脲支原体/人型支原体联合快速培养及药敏检测试剂盒。该试剂盒可以在8-24小时完成检测，同时可进行多种抗生素耐药检测。联合快速培养试剂盒组要组分由猪肚消化液或肺消化液、牛肉提取液或牛心提取液、牛血清或马血清等动物血清、氯化钠、蛋白胨、酵母粉、尿素、L-精氨酸、酚红指示剂或甲酚红等指示剂、青霉素或者其他抗生素等成分组成，药敏检测试剂盒可以检测：盐酸多西环素、罗红霉素、乙酰螺旋霉素、加替沙星、克拉霉素、阿奇霉素、克林霉素、红霉素、吉他霉素、氧氟沙星、盐酸左氧氟沙星、斯帕沙星、环丙沙星、强力霉素、环酯红霉素等多种抗生素。本发明专利技术不但缩短了支原体检测时间，而且可同时进行耐药检测从而指导临床用药，具有灵敏度高、特异性强、检出率高、操作简便等优势。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药领域，生物诊断试剂，特别涉及一种解脲支原体/人型支原体联合快速培养及药敏检测试剂盒，本专利技术不但缩短了支原体检测时间，而且可同时进行耐药检测指导临床用药，具有灵敏度高、特异性强、检出率高、操作简便等优势，可广泛应用于各大中小医院临床检测。
技术介绍
2007年报告的非淋菌性泌尿生殖道炎(NGU)，发病率就已超过了淋病，位居全国8种性传播疾病的首位。衣原体和支原体是引起NGU的主要病原体，衣原体主要是沙眼衣原体，支原体主要是解脲支原体(UU)和人型支原体(MH)。由于诊断条件所限和命名上的问题。国内尚无系统的人群调查资料，支原体可存在于健康携带者，而在性乱者、同性恋、妓女、淋病患者中检出率较高，我国报道7个地区健康人携带率为解脲支原体(UU)占10.59%，人型支原体(MH)占5.34%ο性乱者UU的检出率为71.7%，MH为19.57%。调查表明，性伴数越多，性活跃指数越大，UU和MH感染率越高。目前，支原体的实验室检测方法有支原体分离培养、PCR法检测质粒核酸、抗体检测、支原体快速培养法、分子生物学方法等。支原体细胞分离培养可获得支原体，可以确诊，是传统的实验室诊断的“金标准”，但鉴于该方法操作繁琐，约需I周时间才能报告结果，故未能普遍应用。PCR法检测质粒核酸快速、特异、敏感，但需昂贵设备，不易普及，且方法过于敏感，容易受污染。传统的冷凝集法检测支原体的IgM、IgG抗体，方法简单、易行，但其敏感性和特异性均较差，易受病程影响。ELISA检测支原体抗体法较为简便、可靠。由于发病初期，机体中尚未产生抗体不能被检出，发病时间较长此法才有意义。而快速培养法正以其简单、快速、经济、无创伤等优点，被越来越多的临床实验室所推广，也被越来越多的患者所接受。
技术实现思路
一种解脲支原体/人型支原体联合快速培养及药敏检测试剂盒，其特征在于，解脲支原体/人型支原体联合快速培养试剂盒每I升培养基含:猪肚消化液或肺消化液5-15克、牛肉提取液或牛心提取液3-10克、牛血清或马血清等动物血清100-200毫升、蛋白胨5-15克、酵母粉3-10克、氯化钠2-5克、尿素1-3克、L-精氨酸2_5克、酚红指示剂或甲酚红等指示剂0.02-0.1克、青霉素80-160万单位、头孢霉素80-160万单位等组成，试剂盒每一升培养基含有的组分含量可以根据实际需要进行调整，也可以加入磷酸盐等起到缓冲作用的盐离子或者不加。也可以加入其它起到营养作用的但权利要求中没有明确提出的成分，比如猪肺消化液或者牛心消化液取代猪肚消化液和牛肉提取液等。药敏检测试剂盒可以检测:盐酸多西环素、罗红霉素、乙酰螺旋霉素、加替沙星、克拉霉素、阿奇霉素、克林霉素、红霉素、吉他霉素、氧氟沙星、盐酸左氧氟沙星、斯帕沙星、环丙沙星、强力霉素、环酯红霉素等多种抗生素。本
技术实现思路
是针对解脲支原体/人型支原体细胞特性设计，在传统工艺、配方基础不变的前提下进行了优化改良，提高了液体培养基的特异性、灵敏度、缩短了检测时间，可以在医院快速地进行解脲支原体/人型支原体疾病的确诊。解决了解脲支原体/人型支原体检测IgM、IgG抗体出现时间晚检测结果不准确问题，核酸检测又需要昂贵设备不适合中小医院推广和使用等问题。此外，药敏检测试剂盒可以准确地检测出病人感染支原体对多种临床常用抗生素种哪种抗生素敏感，从而准确地指导医生用药，避免盲目用药和用药过度，减少患者负担、提高治愈率。【具体实施方式】以下结合实际情况，对本专利技术的【具体实施方式】作详细说明。应用实例一: 解脲支原体/人型支原体联合快速培养基成分(I升):猪肚消化液10克；牛肉提取液6克；新生牛血清200毫升；蛋白胨10克；酵母粉5克；氯化钠2.5克；尿素2克；L-精氨酸3克；酚红指示剂0.02克；青霉素80万单位；头孢霉素80万单位。药敏检测试剂盒中抗生素包被浓度如下: 药物名称低浓度包被(mg/mL) 高浓度包被(mg/mL) 盐酸多西环素0.55罗红霉素I10 乙酰螺旋霉素0.55加替沙星I10克拉霉素0.55阿奇霉素0.55克林霉素0.55红霉素215吉他霉素215氧氟沙星0.55 盐酸左氧氟沙星0.55斯帕沙星0.55环丙沙星0.55强力霉素0.55环酯红霉素0.55 试剂盒性能检测: 灵敏性检测:取培养基3支，参考2010年药典第三部灵敏度检测方法，检测10_8\10_9、10_1(1解脲支原体、人型支原体稀释液ΙΟΟμΙ。在37°C ± 1°C条件下于生化恒温培养箱中培养12-24h，10_8'、10_9样本能使支原体培养基呈桔黄色到淡黄色(呈阳性反应)。特异性试验:取培养基6支，分别接种104CFU/ml肺炎支原体、葡萄球菌、链球菌、厌氧链球菌、奈瑟氏菌ΙΟΟμΙ。在37°C ±1°C条件下于生化恒温培养箱中培养24h，均不会发生阳性反应。稳定性检测:将培养基成品置于37°C ±1°C下加速试验6天。检测灵敏度和特异性均符合上述要求。药敏试验板检测:取供试药敏板6条，接种10_8'标准支原体菌株?οομι，充分搅匀后，用移液器将培养基加到药敏条的每一个小孔，每孔加50μ1，共24小孔。然后每孔再加50μ1液体石蜡，最后将药敏条放入湿盒内，置37°C ±1°C生化恒温培养箱中培养12-24h。12号的B孔呈阳性反应，即应呈桔黄或淡黄色；A孔应呈阴性反应，即保持原来的红色。I?11号(Al?AlUBl?Bll):支原体对对应检测试剂不敏感时A、B两孔均呈黄色；中度敏感时A孔呈黄色，B孔呈红色；敏感时，A、B两孔均呈红色。应用实例二: 解脲支原体/人型支原体联合快速培养基成分(I升): 猪肺消化液10克；牛肉提取液8克；羊血清200毫升；蛋白胨10克；酵母粉6克；氯化钠2.5克；尿素2.5克；L-精氨酸3.5克；酚红指示剂0.02克；青霉素80万单位、头孢霉素80万单位、万古霉素I瓶(针剂)。药敏检测试剂盒中抗生素包被浓度如下: 药物名称低浓度包被(mg/mL) 高浓度包被(mg/mL)盐酸多西环素0.65罗红霉素I10乙酰螺旋霉素0.65当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种解脲支原体/人型支原体联合快速培养及药敏检测试剂盒，其特征在于，解脲支原体/人型支原体联合快速培养试剂盒每一升培养基含：猪肚消化液或肺消化液5‑15克、牛肉提取液或牛心提取液3‑10克、牛血清或马血清等动物血清100‑200毫升、蛋白胨5‑15克、酵母粉3‑10克、氯化钠2‑5克、尿素1‑3克、L‑精氨酸2‑5克、酚红指示剂或甲酚红等指示剂0.02‑0.1克、青霉素80‑160万单位、头孢霉素80‑160万单位以及其他抗生素等组成；药敏检测试剂盒可以检测：盐酸多西环素、罗红霉素、乙酰螺旋霉素、加替沙星、克拉霉素、阿奇霉素、克林霉素、红霉素 、吉他霉素 、氧氟沙星、盐酸左氧氟沙星、斯帕沙星、环丙沙星、强力霉素、环酯红霉素等多种抗生素。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：姜洪波，刘英波，张文超，
申请(专利权)人：姜洪波，刘英波，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23
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