胎儿宫内多种污染物暴露水平的分析检测方法技术

本发明专利技术提供一种胎儿宫内多种污染物暴露水平的分析检测方法，包括步骤：1)取离体的胎盘组织，加入正己烷/丙酮溶液萃取，得萃取液；2)萃取液用凝胶渗透层析柱净化，用正己烷/二氯甲烷溶液淋洗，加入脂肪、PAHs、PCBs、OCPs和PBDEs的标样，收集80-210mL淋洗液；3)用正己烷/二氯甲烷溶液淋洗并收集0-25mL组分；4)加入内标物进行气相色谱-质谱分析。本发明专利技术提出的方法，选取胎盘这一特殊生物组织作为有机污染物附着载体，藉此反应胎儿宫内对多种有机污染物的实际暴露水平。该方法对有机污染物的提取率可达到93％，并精确设定了样品净化步骤的实验参数，可以实现同时检测人体胎盘组织中多种持久性有机污染物的目的。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分析领域，具体设及一种气相色谱和质谱联用检测子宫内污染物的方 法。
技术介绍
持久性有机污染物（persistantorganicpollutants,POPs)是一类在环境中难 W降解、能够通过食物链富集并远距离输送的污染物W。POPs对人体有多种毒性作用，包 括对免疫系统的危害、内分泌干扰作用、生殖和发育毒性、致"作用等（btW'M'W。鉴于 其严重的生态与健康效应，2001年全球100多个国家共同签署了《关于持久性有机污染物 的斯德哥尔摩公约》（W下简称《斯德哥尔摩公约》），规定了 12种优先控制的持久性有机 污染物；2009年，包括阻燃剂多漠联苯離（PBDEs)在内的9类污染物被加入《斯德哥尔摩公 约》;此外还有众多的污染物，如多环芳姪，虽然未被列入《斯德哥尔摩公约》，但具有POPs的 多数特征，其中的16种多环芳姪（PAHs)被USEPA列为优先控制污染物。长期W来，POPs 一直是环境科学领域的研究热点，同时也是环境与健康研究领域的重要问题。 由于胎儿在母体的子宫内发育，不与外界直接接触，因此要研究胎儿对于包括 POPs在内的污染物暴露必须选择合适的载体。胎盘是妇女怀孕期间存在的连接母体及胎 儿的特殊组织，母体和胎儿之间的物质交换需通过具有选择通透作用的胎盘。除了胎儿生 长发育所需的营养物质W外，Pereraetal.W的研究发现，多种污染物也可W透过胎盘屏 障导致胎儿的宫内暴露，对子代健康发育产生影响。PAHs是典型的POPs之一，其暴露会对 人体健康造成多种危害，胎儿出生前的PAHs暴露被证实是导致细胞遗传学损伤的危险因 素W，会对胎儿的生长发育（头围、身高、体重等）造成不良影响W，还会导致胎儿早产、低 体重甚至死亡的危险性明显增加W。化enetal/w研究发现，有机氯农药（ocps)在母体 内代谢后，可W透过胎盘屏蔽传递给胎儿，造成胎儿的宫内暴露，影响胎儿的正常发育。流 行病学调查发现，胚胎期间对OCPs的暴露会导致出生缺陷的发生，如男性生殖系统崎形W 等。Salazar-Garciaetal. 勺研究还发现，高暴露于孤T的孕妇会导致胎儿发生出生 缺陷的危险性明显增加。因此，胎盘中的污染物含量能够充分反映胎儿的暴露水平，是研究 胎儿宫内暴露的理想载体 到目前为止，国际上开展的人体胎盘中POPs的研究十分有限，该一方面是由于采 集人体胎盘样品相对于采集环境样品难度更大；另一方面，人体胎盘组织中的POPs含量很 低，而且分析胎盘组织需要繁杂的样品前处理流程，对于实验条件及实验技能要求很高。尽 管世界上已经有一些国家开展了人体胎盘中POPs的研究，但所采用的分析方法均是延用 分析环境样品的方法或稍加改进，不仅消耗大量的时间，而且在实验过程中存在一定的不 足（如回收率偏低、净化不完全等），直接影响目标物质的提取效果及仪器分析的准确性。 目前，国际上尚没有关于人体胎盘组织POPs痕量分析的标准方法。本研究通过大量的条件 实验建立了一套完整的人体胎盘中POPs的痕量分析方法。[000引参考文献 Jones KC, de Voogt P. Persistent OTganic pollutants巧OPs):state of化e science. Environment pollution,1999,100(1-3):209-221. Gray LE, Ostby J, Furr J, et al. Effects of environmental antiandrogens on reproductive development in experimental animals. Hum民eprod 化date, 2001，7:248-264.Bostrom CE，Gerde P, Hanber g A，et al. Cancer risk assessment，indicators，and guidelines for polycyclic aromatic hydrocarbons in the ambient air. Environ Health Perspect，2002, 110 (Suppl 3) :451-488. StraifK，Baa打民，GrosseY，etal.Carcinogenicityof polycyclicaromatichydrocarbons.LancetOncology，2005, 6(12):931-932. Pathak R, Suke SG, Ahmed T, et al. Organochlorine pesticide residue levels and oxidative stress in preterm delivery cases. Hum. Exp. Toxicol.，2010, 29:351-358. Perera FP,Tang D,民auh V，et al.民elationships among polycyclic aromatic hydrocarbon-DNA adducts, proximity to the World Trade Center, and effects on fetal growth. Environment Health Perspective,2005, 113 (8):1062-1067. Bocskay KA,Tang D,Orjuela MA, et al. Chromosomal aberrations in cord blood are assoaiated with prenatal exposure to carcinogenic polycyclic aromatic hydrocarbons. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev，2005, 14 (2):506-511.Tang D, Li TY,Liu JJ,et al. PAH-DNA adducts in cord blood and fetal and child development in a Chinese cohort. Environ. Health Perspe ct.，2006, 114巧）：1297-1300. 巧]Vassilev ZP, Robson MG, Klotz JB. Associations of polycyclic organic matter in outdoor air with decreased birth weight:a pilot crosssectional analysis. J. Toxicol. Environ. Health Part A, 2001，64:595-605. Shen HQ, Main KM, V irtanen HE, et a 1. From mother to chi Id:I打vestig过tion of pre打过t过!过打d post打过t过!exposure to persistent bioaccumulating toxicants using breas本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种胎儿宫内多种污染物暴露水平的分析检测方法，其特征在于，包括步骤：1)取离体的胎盘组织，以10g：10‑20mL的质量体积比加入正己烷/丙酮等体积的混合溶液，萃取后离心，分离并收集上清液，得萃取液；2)萃取液用凝胶渗透层析柱净化，用正己烷/二氯甲烷等体积混合溶液作淋洗液，加入脂肪、PAHs、PCBs、OCPs和PBDEs的标样，收集80‑210mL淋洗液；3)步骤2)得到的淋洗液转移至硅胶柱进行二次净化，用正己烷/二氯甲烷等体积混合溶液作淋洗液并收集0‑25mL组分；4)将淋洗液浓缩后，加入内标物，进行气相色谱‑质谱(GC‑MS)分析：使用固定相5％二苯基/95％二甲基聚硅氧烷的气相毛细管色谱柱分离PAHs、PCBs、PBDEs和部分有机氯农药；使用固定相为苯基亚芳基聚合物5％/苯基95％二甲基聚硅氧烷的气相毛细管色谱柱分离DDT、DDE和DDD；使用电子轰击(EI)电离源测定其中PAHs和DDTs，使用电子捕获负化学(ECNI)电离源测定其中的OCPs、PCBs、PBDEs。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：马瑾，潘丽波，王思雨，
申请(专利权)人：中国环境科学研究院，
类型：发明
国别省市：北京;11