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一种骆驼刺组织培养的快速诱导培养基及其制备方法技术

技术编号:12181138 阅读:71 留言:0更新日期:2015-10-08 19:14
本发明专利技术属于植物培养技术领域,具体涉及一种骆驼刺组织培养的快速诱导培养基及其制备方法。所述的诱导培养基为1/2MS培养基中加入如下组份:特制固化剂、红糖、6-苄氨基腺嘌呤、4-氯-IAA、四环素、活性炭、植物提取物、木瓜汁配制而成。本发明专利技术进一步在诱导培养基中添加四环素,能对外植体的内生菌产生明显的抑制作用,而且大叶榕气生根的提取物配合4-氯-IAA可有效均衡骆驼刺腋芽、根和茎的生长,而且对腋芽萌发和芽体发育有明显的促进作用。应用本发明专利技术的诱导培养基进行培养骆驼刺,成活率为98-99%,染菌率为1.7-2.1%,培养基褐化程度较MS培养基低14-17%,萌动时间缩短25-35%。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物培养
,具体涉及一种骆驼刺组织培养的快速诱导培养基 及其制备方法。
技术介绍
骆蛇刺(学名:AlhagisparsifoliaShap.)属豆科、落叶草本,主要枝上多刺,叶 长圆形,花粉红色,6月开花,8月最盛,每朵花可开放20余天,结荚果,总状花序,根系一般 长达20米。从沙漠和戈壁深处吸取地下水份和营养,是一种自然生长的耐旱植物,因为这 种植物茎上长着刺状的很坚硬的小绿叶,故叫骆驼刺,是草本植物,是戈壁滩和沙漠中骆驼 唯一能吃的赖以生存的草,故又名骆驼草,主要分布在内陆干旱地区。 骆驼刺根系十分发达,根系一般长达20米,是地表上茎叶半径的2倍甚至3倍, 这在植物界是极其罕见的。因为其特殊的生理特性,在诱导培养基中如果加入常用生长素 吲哚乙酸在低浓度无法快速促进茎叶分化,在培养基的时间过长容易感染细菌导致培养失 败,如果加入常用生长素吲哚乙酸的浓度过高,又抑制了根系的生长发育,导致组织培养的 骆驼刺根系发育不全。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种骆驼刺组织培养的快速诱导培养基及其 制备方法。 本专利技术所要解决的技术问题通过以下技术方案予以实现: 一种骆驼刺组织培养的快速诱导培养基,所述的诱导培养基为1/2MS培养基中加入 如下组份:特制固化剂、红糖、6-苄氨基腺嘌呤、4-氯-IAA、四环素、活性炭、植物提取物、 木瓜汁配制而成,在诱导培养基中的浓度分别为:特制固化剂15-18g/L、红糖20-25g/L、 四环素25-45mg/L、6-苄氨基腺嘌呤2. 2-2. 6mg/L、4-氯-IAA0? 3-0. 4mg/L、植物提取物 50-80mg/L、木瓜汁 60-80g/L、活性炭 3-4g/L。 进一步的,所述的特制固化剂:包括海藻酸钠和紫薯提取物,其制备方法为,将新鲜的 紫薯进行压榨,收集浆汁,然后将浆汁真空干燥获得凝固的块状物,再将块状物粉碎至粒径 150-300目的粉状,即为紫薯提取物;所述的特制固化剂为海藻酸钠与紫薯提取物质量比 2:3〇 进一步的,所述的植物提取物提取于大叶榕的气生根,所述的植物提取物的提取 方法为收集大叶榕气生根,放入搅拌机,并按照质量体积比1:lkg/L添入乙酸-乙醇水溶液 并进行组织破碎,然后将破碎液过300目滤布后收集滤液,再将滤液真空干燥后收集获得 的粉末即为所述的植物提取物,其中所述的乙酸-乙醇水溶液为质量浓度为45%的乙醇和 质量浓度为12%的乙酸按照1:2的体积比混合。 -种骆驼刺组织培养的快速诱导培养基的制备方法,向1/2MS培养基中加入特制 固化剂、红糖、6-苄氨基腺嘌呤、4-氯-IAA、四环素、活性炭;在诱导培养基中的浓度分别 为特制固化剂15-18g/L、红糖20-25g/L、四环素25-45mg/L、6-苄氨基腺嘌呤2. 2-2. 6mg/L、4-氯-IAA0. 3-0. 4mg/L、活性炭3-4g/L、植物提取物50-80mg/L,并将其置于高压蒸汽灭 菌锅中灭菌,灭菌条件为113摄氏度,压力103. 42kPa,时长25-35min,最后再将木瓜汁加入 其中。 进一步的,所述木瓜汁在添加前需要经过68°C、时长30min的加热灭菌,加热后将 其温度急速冷却到1_3°C,保持时长为5-10min,然后即可按照浓度为60-80g/L添入诱导培 养基中。 更进一步的,所述的制备过程均在无菌环境中操作。 本专利技术具有如下有益效果: 本专利技术针对骆驼刺特殊的生长和生理特性,特选海藻酸钠和紫薯提取物制备的固化 剂。 本专利技术进一步在诱导培养基中添加四环素,在培养过程中,可进一步对外植体的 内生菌产生明显的抑制作用,可减少组培过程中的污染,而且还起到了促进腋芽萌发,缩短 萌动时间的效果。 本专利技术进一步在诱导培养基中添加植物提取物,提取于大叶榕气生根的提取物配 合4-氯-IAA可有效均衡骆驼刺腋芽、根和茎的生长,而且对腋芽萌发和芽体发育有明显的 促进作用。 应用本专利技术的诱导培养基进行培养骆驼刺,成活率为98-99%,染菌率为 1. 7-2. 1%,培养基褐化程度较MS培养基低14-17%,萌动时间缩短约20%。【具体实施方式】 下面结合具体实施例对本专利技术进行详细的说明。 实施例: 本专利技术选用的1/2MS培养基成分及其用量(用量是指在1升1/2MS培养基中的用量) 如下表1 :然后在1/2MS培养基中加入如下组份:特制固化剂、红糖、6-苄氨基腺嘌呤、 4-氯-IAA、四环素、活性炭;在诱导培养基中的浓度分别为特制固化剂15-18g/L、红糖 20-25g/L、四环素 25-45mg/L、6-苄氨基腺嘌呤 2. 2-2. 6mg/L、4-氯-IAA0? 3-0. 4mg/L、活 性炭3-4g/L、植物提取物50-80mg/L,并将其置于高压蒸汽灭菌锅中灭菌,灭菌条件为113 摄氏度,压力103.42kPa,时长25-35min,最后再将木瓜汁加入其中;各组份添加浓度优选 为特制固化剂16g/L、红糖22g/L、四环素35mg/L、6-苄氨基腺嘌呤2. 4mg/L、4-氯-IAA 0. 35mg/L、植物提取物65mg/L、木瓜汁70g/L、活性炭4g/L。所述的制备过程均在无菌环境 中操作。 所述的特制固化剂:包括海藻酸钠和紫薯提取物,其制备方法为,将新鲜的紫薯进 行压榨,收集浆汁,然后将浆汁真空干燥获得凝固的块状物,再将块状物粉碎至粒径200目 的粉状,即为紫薯提取物;所述的特制固化剂为海藻酸钠与紫薯提取物质量比2:3。 所述的植物提取物的提取方法为收集大叶榕气生根,放入搅拌机,并按照质量体 积比1:lkg/L添入乙酸-乙醇水溶液并进行组织破碎,然后将破碎液过300目滤布后收集 滤液,再将滤液真空干燥后收集获得的粉末即为所述的植物提取物,其中所述的乙酸-乙 醇水溶液为质量浓度为45%的乙醇和质量浓度为12%的乙酸按照1:2的体积比混合。 所述木瓜汁在添加前需要经过68°C、时长30min的加热灭菌,加热后将其温度急 速冷却到1-3°C,保持时长为8min,然后即可按照浓度为70g/L添入诱导培养基中。 经过应用测得本专利技术的诱导培养基进行培养的骆驼刺,成活率为98-99%,染菌率 为1. 7-2. 1%,培养基褐化程度较MS培养基低14-17%,萌动时间缩短25-35%。 以上所述实施例仅表达了本专利技术的实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能 因此而理解为对本专利技术专利范围的限制,但凡采用等同替换或等效变换的形式所获得的技 术方案,均应落在本专利技术的保护范围之内。【主权项】1. 一种骆驼刺组织培养的快速诱导培养基,其特征在于所述的诱导培养基为1/2MS 培养基中加入如下组份:特制固化剂、红糖、6-苄氨基腺嘌呤、4-氯-IAA、四环素、活性炭、 植物提取物、木瓜汁配制而成,在诱导培养基中的浓度分别为:特制固化剂15-18g/L、红糖 20-25g/L、四环素 25-45mg/L、6-苄氨基腺嘌呤 2. 2-2. 6mg/L、4-氯-IAA 0? 3-0. 4mg/L、植 物提取物50-80mg/L、木瓜汁60-80g/L、活性炭3-4g/L。2. 根据权利要求1所述的一种骆驼刺组织培养的快速诱导培养基,其特征在于本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种骆驼刺组织培养的快速诱导培养基,其特征在于所述的诱导培养基为1/2MS 培养基中加入如下组份:特制固化剂、红糖、6‑ 苄氨基腺嘌呤、4‑氯‑IAA、四环素、活性炭、植物提取物、木瓜汁配制而成,在诱导培养基中的浓度分别为:特制固化剂15‑18g/L、红糖20‑25g/L、四环素25‑45mg/L、6‑ 苄氨基腺嘌呤2.2‑2.6mg/L、4‑氯‑IAA 0.3‑0.4mg/L、植物提取物50‑80mg/L、木瓜汁60‑80g/L、活性炭3‑4g/L。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:徐伟明
申请(专利权)人:徐伟明
类型:发明
国别省市:安徽;34

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