浓缩抗体的方法及其治疗性产品技术

本发明专利技术涉及浓缩抗体的方法及其治疗性产品。本发明专利技术提供了一种浓缩蛋白质的方法，包括在高温，例如约30℃以上依次进行超滤、渗滤及第二次超滤的工序。本发明专利技术还包括制备高度浓缩的抗体组合物和高度浓缩的抗体产品的方法。

【技术实现步骤摘要】
【专利说明】浓缩抗体的方法及其治疗性产品 本申请是申请日为2005年9月8日、中国申请号为200580038351.0、专利技术名称为 "浓缩抗体的方法及其治疗性产品"的专利技术申请的分案申请。 专利技术背景 分离、纯化和浓缩生物材料的方法是已知的，包括例如色谱、超滤和冷冻干燥，一 般性地参考，R. Hatti-Kaul 等，"Downstream Processing in Biotechnology，"于《Basic Biotechnology》，第9 章，187-211 页，第二版，Cambridge University Press (2001)。制 备用于人体施用的浓缩单克隆抗体制剂的方法是已知的，参见例如美国专利6, 252, 055,其 利用超滤，并使所得的滤出液回流。 已有的抗体浓缩方法存在着一些问题，包括例如，通量低，过程时间长，膜面积大， 机械回收产率和损失，密集的操作者介入或操作，传质速率低，能量效率低，以及浓缩设备 的水压限制等。上述问题及其它问题可促使制造总成本增高，并最终增加治疗药消费者的 花费。 需要改良的方法来制备高度浓缩的蛋白质制剂，例如液体抗体制品以及其治疗产 品。 专利技术概述 在一般意义上，本专利技术一般地涉及浓缩蛋白质的方法，例如浓缩抗体制品的方法， 含有该制品的药物制剂，及它们在人类治疗或动物治疗中的用途。 本专利技术在实施方案中提供制备高度浓缩的蛋白质，例如抗体制品的方法；以及通 过该方法制备的治疗产品，例如治疗性抗体产品。由此，本专利技术提供一种浓缩蛋白质的方 法，包括：对第一抗体制品进行第一超滤，以提供第二抗体制品；对第二抗体制品进行渗 滤，以提供经渗滤的中间抗体制品；对经渗滤的中间抗体制品进行第二超滤，以提供第三抗 体制品，其中所述第一超滤，第二超滤和渗滤中的一项或多项是在升高的温度，例如约30°C 到约50 °C进行的。 本专利技术在实施方案中还提供一种浓缩蛋白质的方法，包括：对第一蛋白质混合物 进行第一超滤，以提供第二蛋白质混合物；对第二蛋白质混合物进行渗滤，以提供经渗滤的 蛋白质混合物；及对经渗滤的蛋白质混合物进行第二超滤，以提供第三蛋白质混合物，其中 所述第一超滤，第二超滤和渗滤中的一项或多项是在例如约45°C进行。 本专利技术还在实施方案中提供通过上述方法制备的高度浓缩的抗体组合物。 本专利技术涉及下述各项。 1.制备高度浓缩的抗体组合物的方法，包括： 对第一抗体制品进行第一超滤，以提供第二抗体制品； 对第二抗体制品进行渗滤，以提供经渗滤的中间抗体制品；及 对经渗滤的中间抗体制品进行第二渗滤，以提供第三抗体制品； 其中所述第一超滤，第二超滤和渗滤中的一项或多项在约30°C到约50°C条件下 完成。 2.项1的方法，其中所述第一超滤，第二超滤和渗滤中的一项或多项在约35°C到 约50°C条件下完成。 3.项1的方法，其中所述第一超滤，第二超滤和渗滤中的一项或多项在约45°C条 件下完成。 4.项1的方法，其中所述第一超滤，第二超滤和渗滤中的一项或多项在45°C ±5°C 条件下完成。 5.项1的方法，其中所述第一抗体制品的抗体浓度为约0. 1到约10克每升。 6.项1的方法，其中所述第一抗体制品的抗体浓度为约1到约5克每升。 7.项1的方法，其中所述第二抗体制品的抗体浓度为约10到约50克每升。 8.项1的方法，其中所述第二抗体制品的抗体浓度为约20到约40克每升。 9.项1的方法，其中所述第三抗体制品的抗体浓度为约50到约250克每升。 10.项1的方法，其中所述第三抗体制品的抗体浓度为约100到约230克每升。 11.项1的方法，其中所述第三抗体制品的抗体浓度为约170到约200克每升。 12.项1的方法，其中所述经渗滤的中间抗体制品和第三抗体制品包含超滤截留 液。 13.项1的方法，其中所述中间抗体制品的抗体浓度为约25到约35克每升，且所 述第三抗体制品的抗体浓度为约170到约200克每升。 14.项1的方法，其中所述抗体制品包含抗-IgE抗体。 15.项1的方法，其中所述方法经过约1到10小时完成。 16.项1的方法，其中所述方法经过约2到5小时完成。 17.项1的方法，其中所述方法经过约3小时完成。 18.项1的方法，其中所述第一和第二超滤使用标称孔径为约5到约50千道尔顿 的超滤I旲完成。 19.项1的方法，其中所述第一和第二超滤使用标称孔径为约10到约30千道尔顿 的超滤I旲完成。 20.项1的方法，其中所述第一抗体制品含有表观分子量为约100到约200千道尔 顿的抗体。 21.项1的方法，其中所述第一抗体制品含有表观分子量为约150千道尔顿的抗 体。 22.项1的方法，其中所述第一超滤浓缩第一抗体制品以提供抗体浓度为约30克 每升的第二抗体制品，所述第二超滤浓缩中间抗体制品以提供抗体浓度为约170克到约 200克每升的第三抗体制品。 23.项1的方法，其中所述第一超滤和第二超滤使用相同的超滤膜完成。 24.项1的方法，其中所述第一超滤和第二超滤使用再生纤维素复合材料超滤膜 完成。 25.项1的方法，其中所述渗滤在恒定体积，恒定浓度，或恒定体积且恒定浓度条 件下实现缓冲液交换。 26.项1的方法，其中所述渗滤实现约5到约15倍体积的缓冲液交换。 27.项1的方法，其中所述渗滤实现约8倍体积的缓冲液交换。 28.项1的方法，其中所述渗滤将第一缓冲液交换为第二缓冲液。 29.项28的方法，其中所述第一缓冲液包含氯化钠水溶液和TRIS缓冲液的混合 物，第二缓冲液包含含水组氨酸氯化物和精氨酸氯化物的混合物。 30.项1的方法，其中所述第一超滤、第二超滤和渗滤利用横跨超滤膜的切向流过 滤来完成。 31.项1的方法，其中所述第一超滤、第二超滤和渗滤利用横跨相同超滤膜的切向 流过滤来完成。 32.项1的方法，其中所述第三抗体制品的产率高于约70重量％，是基于第一抗体 制品中抗体的重量。 33.项32的方法，其中所述第三抗体制品的产率为约80到约100重量％，是基于 第一抗体制品中抗体的重量。 34.项1的方法，其中第一超滤具有约0. 5L/min/ft2到约5L/min/ft2的回流速率。 35.项1的方法，其中所述超滤和渗滤在约10到约50p. s. i.的跨膜压力条件下完 成。 36.项1的方法，其中提供可检测的生物负荷小于约100CFU/mL的抗体浓缩物。 37.浓缩蛋白质的方法，包括： 对第一蛋白质混合物进行第一超滤，以提供第二蛋白质混合物； 对第二蛋白质混合物进行渗滤，以提供经渗滤的蛋白质混合物；及 对经渗滤的蛋白质混合物进行第二渗滤，以提供第三蛋白质混合物；其中所述第 一超滤，第二超滤和渗滤中的一项或多项在约30°C到约50°C条件下完成。【附图说明】 图1显示本专利技术的实施方案中用于实现制备方法的装置。 图2到图17显示本专利技术的实施方案中过程的不同阶段或模式中观察或测量到的 不同过程值。 图18和19显示本专利技术的实施方案中升高的温度对产品质量的影响。 图20和21显示本专利技术的实施方案中升高的温度对生物负荷控制的影响。 图22显示本专利技术的实施方案中升高的温度对过程流量和过程时间的影响。 图23到25显示本专利技术的实施方案中经放大的过程的不同阶段或模式中观察本文档来自技高网...

【技术保护点】
制备高度浓缩的抗体组合物的方法，包括：对第一抗体制品进行第一超滤，以提供第二抗体制品；对第二抗体制品进行渗滤，以提供经渗滤的中间抗体制品；及对经渗滤的中间抗体制品进行第二渗滤，以提供第三抗体制品；其中所述第一超滤，第二超滤和渗滤中的一项或多项在约30℃到约50℃条件下完成。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：查尔斯·M·温特，
申请(专利权)人：健泰科生物技术公司，诺瓦蒂斯公司，
类型：发明
国别省市：美国;US