核酸扩增反应装置以及核酸扩增方法制造方法及图纸

技术编号:12141015 阅读:72 留言:0更新日期:2015-10-01 20:13
本发明专利技术的核酸扩增反应装置具备:旋转体,具有能够安装筒的安装部,筒具备管和核酸扩增反应用容器,在管的内部依次具备:由油构成的第一液柱、由清洗液构成的第二液柱、由油构成的第三液柱、由溶出液构成的第四液柱、以及由油构成的第五液柱,核酸扩增反应用容器与管的配置有第五液柱的一侧连通且将核酸扩增反应试剂保持于油中;加热部,用于对第四液柱进行加热并具有筒状槽,当在安装部安装有筒时,管卡合于筒状槽并从筒状槽的开口部呈狭缝状露出;磁力施加机构,对核酸结合性磁性载体施加磁力,使核酸结合性磁性载体沿管的长度方向移动,旋转体旋转而使筒的姿势变化,由此包含从管导入的溶出液的液滴在核酸扩增反应容器的内部移动。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。
技术介绍
近年来,由于基因的利用技术的发展,基因诊断、基因治疗等利用基因的医疗受到 瞩目。另外,即使在农业、畜牧业领域中,也开发出很多将基因用于鉴别品种、改良品种的方 法。作为用于利用基因的技术,PCR(Polymerase Chain Reaction聚合酶链反应)等技术 正在广泛普及。如今,PCR在生物体的信息解析中成为必不可缺的技术。PCR是对包含成为 扩增对象的核酸(靶核酸)以及试剂的溶液实施热循环,从而使靶核酸扩增的方法。作为 PCR的热循环,通常是以两个梯度或者三个梯度的温度来实施热循环的方法。 另一方面,医疗机构中对以流行性感冒为代表的传染病的诊断,现状是使用免疫 层析试剂盒等简易检查套件成为主流。但是,在这样的简易检查中,存在精度不够的情况, 因而希望将能够期待更高的检查精度的PCR应用于传染病的诊断。另外,医疗机构的普通 门诊患者等由于诊察的时间受限的关系,所以检查所花费的时间被限制在短时间内。因此, 现状是例如对流行性感冒的检查牺牲检查的精度,而通过简易的免疫层析试剂盒等的检查 而实现短时间化。 根据这样的情况,在医疗机构中,为了实现基于能够期待更高的精度的PCR进行 的检查,需要缩短反应所需的时间。作为用于在短时间内进行PCR反应的装置,例如在专利 文献1中公开了一种生物体试样反应装置,其通过使生物体试样反应用芯片绕水平方向的 旋转轴旋转,从而使反应液移动来实施热循环,其中所述生物体试样反应用芯片填充有反 应液、和不与反应液混合且比重比反应液小的液体(专利文献1)。另外,作为PCR的一个方 法,公开有以下方法,即:使用了磁性粒子的方法(专利文献2)、通过使用磁性粒子作为液 滴的移动机构,使基板上在温度变化区域的液滴移动,由此进行PCR的热循环的方法(专利 文献3)等。 专利文献1 :日本特开2009-136250号公报 专利文献2 :日本特开2009-207459号公报 专利文献3 :日本特开2008-012490号公报 在使用磁性粒子的核酸提取方法中,在使核酸从磁性粒子表面向溶液(溶出液) 脱离时,若对溶出液进行加热,则溶出效率提高。作为其方法,考虑有利用加热块对溶出部 进行加热的方法,但在使用细管进行的提取中,会导致细管被加热块覆盖。但是,若导致细 管被加热块覆盖,则存在导致细管与磁铁的距离分离,从而无法对磁性粒子施加足够的磁 力,因此利用磁力对溶出液中的磁性粒子进行感应变得困难的情况。
技术实现思路
本专利技术是鉴于上述情况所做出的,目的在于提供一种核酸提取用设备,能够对被 加热块包围的管内的溶出液中的磁性粒子施加较强的磁力。 本专利技术所涉及的核酸扩增反应装置的特征在于,旋转体,其具有能够安装筒的安 装部,所述筒具备管和核酸扩增反应用容器,其中在所述管的内部依次具备:由油构成的第 一液柱;由清洗液构成的第二液柱,其与油相互分离并对结合有核酸的核酸结合性磁性载 体进行清洗;由油构成的第三液柱;由溶出液构成的第四液柱,其与油相互分离并使所述 核酸从结合有所述核酸的核酸结合性磁性载体溶出;以及由油构成的第五液柱,所述核酸 扩增反应用容器与所述管的配置有所述第五液柱的一侧连通且将核酸扩增反应试剂保持 于油中;加热部,其用于对所述第四液柱进行加热,该加热部具有筒状槽,当在所述安装部 安装有所述筒时,所述管卡合于所述筒状槽并且从所述筒状槽的开口部呈狭缝状露出;以 及磁力施加机构,其对所述核酸结合性磁性载体施加磁力,使所述核酸结合性磁性载体沿 所述管的长度方向移动,所述旋转体旋转而使所述筒的姿势发生变化,由此包含有从所述 管导入的所述溶出液的液滴在所述核酸扩增反应容器的内部移动。也可以具有第二加热 部,其对所述核酸扩增反应用容器的与所述管连通的一侧的一端亦即第一部分进行加热。 也可以具有第三加热部,其对所述核酸扩增反应用容器的与所述第一部分不同的另一端亦 即第二部分进行加热。 本专利技术所涉及的核酸扩增方法的特征在于,是使用上述核酸扩增反应装置来进行 核酸扩增反应的方法,该核酸扩增方法包括以下工序:对导入到所述管内的所述核酸结合 性磁性载体施加磁力,以使其移动到所述管的所述第四液柱的位置的工序;利用所述加热 部对所述溶出液液柱进行加热的工序;以及将所述溶出液从所述管推出并使其流入所述核 酸扩增反应用容器的工序,在对所述溶出液液柱进行加热的工序中,将所述磁铁按压于所 述开口部。 对于本专利技术的其他特征,根据本说明书以及附图的记载能够明确。【附图说明】 图IA以及图IB是筒1的说明图。 图2A~图2C是筒1的动作说明图。 图3A~图3D是罐3的说明图。 图4是固定爪25以及导板26与安装部62的说明图。 图5A以及图5B是PCR容器30的周边的说明图。 图6A是PCR装置50的内部结构的立体图。图6B是PCR装置50的主要结构的侧 视图。 图7是PCR装置50的框图。 图8A是旋转体61的说明图。图8B是在旋转体61的安装部62安装了筒1的状 态的说明图。 图9A~图9D是安装筒1时的PCR装置50的状态的说明图。 图10是使磁铁71向下方移动时的磁性粒子7的动作的概念图。 图IlA~图IlC是核酸溶出处理的说明图。 图12是使磁铁71摆动时的磁性粒子7的动作的概念图。 图13A~图13C是液滴形成处理的说明图。 图14A以及图14B是热循环处理的说明图。 图15A以及图15B是第二实施方式的筒1的说明图。 图16A是第二实施方式的筒1的初始状态的说明图。图16B是从图16A的状态按 压柱塞10而使密封件12A与下注射筒22接触时的侧视图。图16C是按压柱塞10后的第 二实施方式的筒1的说明图。 图17A以及图17B是第二实施方式的PCR容器30的周边的说明图。【具体实施方式】 以下,对本专利技术的实施方式进行详细地说明。另外,本专利技术的目的、特征、优点及其 构思通过本说明书的记载,能够使本领域技术人员明确,根据本说明书的记载,只要是本领 域技术人员则能够容易地再现本专利技术。以下所记载的专利技术的实施方式表示本专利技术的优选的 实施方式,为了例示或者说明而示出,本专利技术不限定于此。能够本说明书所公开的本专利技术的 意图以及范围内,基于本说明书的记载,进行各种改变以及修饰对于本领域技术人员而言 是显而易见的。 第一实施方式 首先,对安装于PCR装置50 (核酸扩增反应装置)的筒进行说明,然后对本实施方 式的PCR装置50的结构、动作进行说明。 筒 1 图IA以及图IB是筒1的说明图。图2A~图2C是筒1的动作说明图。图2A是 筒1的初始状态的说明图。图2B是从图2A的状态按压柱塞10而使密封件12A与下注射 筒22接触时的侧视图。图2C是按压柱塞10后的筒1的说明图。 筒1是进行使核酸从结合有核酸的磁性粒子7溶出的核酸溶出处理的容器,并且 是对成为PCR溶液的溶出液47进行用于聚合酶反应的热循环处理的容器。 核酸提取处理在罐3中进行,在通过管20的期间被精制。管20的材质不做特别 地限定,例如能够列举玻璃、塑料等树脂、金属等。特别是若选择透明的玻璃、树脂作为管 20的材质,则能够从管20的外部观察内部,因此更加优选。另外,若管20的材质选择透过 磁力的物质或非磁性体,则在使磁性粒子通本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种核酸扩增反应装置,其特征在于,具备:旋转体,其具有能够安装筒的安装部,所述筒具备管和核酸扩增反应用容器,其中在所述管的内部依次具备:由油构成的第一液柱;由清洗液构成的第二液柱,其与油相互分离并对结合有核酸的核酸结合性磁性载体进行清洗;由油构成的第三液柱;由溶出液构成的第四液柱,其与油相互分离并使所述核酸从结合有所述核酸的核酸结合性磁性载体溶出;以及由油构成的第五液柱,所述核酸扩增反应用容器与所述管的配置有所述第五液柱的一侧连通并将核酸扩增反应试剂保持于油中;加热部,其用于对所述第四液柱进行加热,该加热部具有筒状槽,当在所述安装部安装有所述筒时,所述管卡合于所述筒状槽并且从所述筒状槽的开口部呈狭缝状露出;以及磁力施加机构,其对所述核酸结合性磁性载体施加磁力,使所述核酸结合性磁性载体沿所述管的长度方向移动,所述旋转体旋转而使所述筒的姿势发生变化,由此包含有从所述管导入的所述溶出液的液滴在所述核酸扩增反应容器的内部移动。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员:村山寿郎
申请(专利权)人:精工爱普生株式会社
类型:发明
国别省市:日本;JP

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