一种环链棒束孢及其产品及制备方法及使用方法技术

本发明专利技术提供了一种环链棒束孢及其产品及制备方法及使用方法。本发明专利技术采用环链棒束孢Isaria cateniannulata 08XS-1菌株的芽孢子悬浮液为有效成分制备获得生物农药，不必口服接触即可杀虫，能有效防治田间蔬菜二斑叶螨，是其它生物农药所不能及的，由于采用芽孢子悬液作为生物活性成分，其更容易获得，且毒力高，并且环链棒束孢对尼氏真绥螨没有副作用，说明其对天敌的毒力作用小，可用于生物农药进一步开发、生产，具有较大的应用推广前景。本发明专利技术方法简单，易于实施，成本低廉，使用效果好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，尤其是一种环链棒束孢及其产品及制备方法及使用方 法。
技术介绍
二斑叶螨（ariicae Koch 1863)又称二点叶螨，属于叶螨科叶螨属， 据报道该螨危害的农作物超过了 1100多种，包括农作物、园艺作物、温室蔬菜和观赏植物 等，已经成为一种世界范围的经济害螨。成螨和幼螨、若螨以刺吸式口器取食农作物的汁 液，导致叶片失绿变黄出现坏死斑点，花瓣枯萎形似喷雾烧伤，整个植物活力降低，加速了 植物的死亡。由于其生命周期短和世代交替以及长时间运用化学杀虫剂导致其抗性增加 等现象，使得科学家们将目光转向了生物防治。针对于刺吸式口器的害虫目前研宄最多的 生物防治方法是病原真菌防治，因为其不必口服接触杀虫的作用是其他生物农药所不能及 的。 环链棒束抱， 原名是环链拟青霉(Liang, 1981)]，是一种重要的昆虫 病原真菌，在森林生态中数量和分布仅次于球孢白僵菌。环链棒束孢已经从多种昆虫的体 内分离，并且认为其是多种昆虫的病原真菌。目前环链棒束孢只分布在亚洲地区，且研宄最 多的是中国和日本，由于研宄的人员较少，防治研宄主要集中在小菜蛾、茶树害虫、细纹新 须螨、线虫及蚜虫等。
技术实现思路
本专利技术的目的是：提供，它对防 治田间蔬菜上的二斑叶螨具有良好效果。 本专利技术是这样实现的：环链棒束孢Jsaria caieflia/wWaia 08XS-1菌株，其保藏 编号为 CCTCC NO :M 2013701。 菌株的生物学形态特征：在察氏琼脂上菌落白色；原瓶梗（Prophialides)主要着 生于气生菌丝上；瓶梗多数基部球形膨大，上有明显变细的颈部，3~8 X 1. 5~3微米；分生 孢子较小，2~3. 5 X 1~1. 5微米，卵圆形或拟椭圆形，相互倾斜排列，常弯曲成直径为30微米 的环形链，也可聚集成不规则的团块；延长培养时间可见白色孢梗束。 用于防治田间蔬菜害虫的生物农药，以环链棒束孢/saria caieflia/wWaia 08XS-1菌株的芽孢子悬浮液为有效成分。 生物农药的制备方法，取环链棒束孢Jsaria caieflia/wWaia 08XS-1菌株，在液 体培养基，150-250转、25-30°C的摇床中培养8-12天，然后过滤菌悬液，获得芽孢子悬浮 液，即得。 所述的液体培养基是为PDA液体培养基，具体制备方法是：将200g马铃薯去皮后 切块，在1000 ml水中煮沸30分钟；然后用层纱布过滤；向滤液中加入20g葡萄糖，搅拌葡萄 糖完全溶解后，加水定容至1000 ml ;将每100mL溶液分装到容器中后，加入8-10粒玻璃珠， 在121°C下灭菌30min，即获得PDA液体培养基。 生物农药的使用方法，采用喷雾法，喷液的孢子浓度为1. 5-2. 5X IO8个/ml，喷施 的间隔时间为20d，采用叶背喷施。 本专利技术的环链棒束孢Jsaria 菌株已保藏在中国典型 培养物保藏中心（CCTCC，地址：湖北省武汉市武昌珞珈山武汉大学生科院保藏中心；邮 编：430072)，其保藏编号是CCTCC NO :M 2013701，保藏日期为2013年12月24日，分类命 名为环链棒束孢，拉丁文学名为/saria 由于采用了以上技术方案，本专利技术采用环链棒束孢/saria caieflia/wWaia 08XS-1菌株的芽孢子悬浮液为有效成分制备获得生物农药，不必口服接触即可杀虫，能有 效防治田间蔬菜二斑叶螨，是其它生物农药所不能及的，由于采用芽孢子悬液作为生物活 性成分，其更容易获得，且毒力高，并且环链棒束孢对尼氏真绥螨没有副作用，说明其对天 敌的毒力作用小，可用于生物农药进一步开发、生产，具有较大的应用推广前景。本专利技术方 法简单，易于实施，成本低廉，使用效果好。【具体实施方式】 本专利技术的实施例1 :环链棒束孢J1Saria caieflia/wWaia 08XS-1菌株的获得： 将鳞翅目蛹洗净，参照单菌丝团分离法，接种在PDA培养基上，纯化，得环链棒束孢Zsaria 08XS-1 菌株，保存于 4°C备用。 本专利技术的实施例2 :生物农药的制备方法，取环链棒束孢Jsaria caieflia/wWaia 08XS-1菌株，在液体培养基，200转、27°C的摇床中培养10天，然后用双层擦镜纸过滤菌悬 液，获得芽孢子悬浮液，即得。 本专利技术的实施例3 :生物农药的使用，2014年7月18日-30日期间，在贵州省贵阳 市花溪贵州大学实验基地(海拔1131m，北炜26° 2V，东京106° 4(V )，土壤类型为黄色 泥土，肥力较好，排灌方便，各试验小区水肥管理一致；供试黄瓜育苗后除浇水施肥外为使 用过任何农药。试验设3次重复，每种蔬菜15小区，每小区面积约15m2 (约15m长的独垄）， 小区之间设1垄空白（不做任何处理）作为保护区，共计45个小区；叶背喷药，喷液的实际 芽孢子浓度为2 X IO8个/ml，每小区喷液约1000ml，以清水作对照，处理的喷液量相同。 因每小区实为一垄，故采用对蔬菜编号的方法，调查时随机选取1编号的蔬菜作 为起始抽样株，然后每隔2株抽取1株，每小区共查10株，每株抽查8片叶子(选取植株上、 中层的叶片东南西北各2片叶)，轻轻翻看背面记录虫口基数。施药处理后每隔24h对二斑 叶螨数量进行调查（带回实验室在显微镜下进行确认观察），连续调查10天，田间试验间的 当地气候数据从当地气象站获得。 本专利技术的实施例4:生物农药的使用，2014年7月18日-30日期间，在贵州省贵阳 市花溪贵州大学实验基地(海拔1131m，北炜26° 2V，东京106° 4(V )，土壤类型为黄色 泥土，肥力较好，排灌方便，各试验小区水肥管理一致。供试茄子育苗后除浇水施肥外为使 用过任何农药。试验设3次重复，每种蔬菜15小区，每小区面积约15m2 (约15m长的独垄）， 小区之间设1垄空白（不做任何处理）作为保护区，共计45个小区。叶背喷药，喷液的实际 芽孢子浓度为2 X IO8个/ml，每小区喷液约1000ml，以清水作对照，处理的喷液量相同。 因每小区实为一垄，故采用对蔬菜编号的方法，调查时随机选取1编号的蔬菜作 为起始抽样株，然后每隔2株抽取1株，每小区共查10株，每株抽查8片叶子(选取植株上、 中层的叶片东南西北各2片叶)，轻轻翻看背面记录虫口基数。施药处理后每隔24h对二斑 叶螨数量进行调查（带回实验室在显微镜下进行确认观察），连续调查10天，田间试验间的 当地气候数据从当地气象站获得。 本专利技术的实施例5 :生物农药的使用，2014年7月18日-30日期间，在贵州省贵阳 市花溪贵州大学实验基地(海拔1131m，北炜26° 2V，东京106° 4(V )，土壤类型为黄色 泥土，肥力较好，排灌方便，各试验小区水肥管理一致。供试豆角育苗后除浇水施肥外为使 用过任何农药。试验设3次重复，每种蔬菜15小区，每小区面积约15m2 (约15m长的独垄）， 小区之间设1垄空白（不做任何处理）作为保护区，共计45个小区。叶背喷药，喷液的实际 芽孢子浓度为2 X IO8个/ml，每小区喷液约1000 ml，以清水作对照，处理的喷液量相同。 因每小区实为一垄，故采用对蔬菜编号的方法，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种环链棒束孢Isaria cateniannulata 08XS‑1菌株，其保藏编号为CCTCC NO：M 2013701。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：金道超，张晓娜，邹晓，郭建军，陈亭旭，
申请(专利权)人：贵州大学，
类型：发明
国别省市：贵州;52