本发明专利技术涉及一种从肉苁蓉中分级分离多糖的方法。所述方法包括如下步骤：(1)取肉苁蓉肉质茎，粉碎，用乙醇溶液进行预处理，向得到的滤渣中加入纯化水，固液分离，得到清液I和滤渣II；(2)用微滤膜过滤清液I，得到透过液；(3)依次采用截留分子量为十万级的超滤膜、截留分子量为万级的超滤膜、截留分子量为千级的超滤膜以及截留分子量为百级的纳滤膜过滤透过液，得到不同分子量的可溶性多糖产品。本发明专利技术能快速分级分离不同分子量的多糖，产品分子量集中，活性一致，无毒无害；制备过程中乙醇使用量少，生产能耗低，工序少，周期短。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生化分离
，具体涉及。
技术介绍
肉灰蓉是一种列当科(Orobanchaceae)肉灰蓉属(CistancheHoffmg.et Link)的多年寄生性植物，专性寄生于梭梭类植物的根部，全球有二十余种。中国境内共有4种I变种，主要分布于内蒙古、宁夏、甘肃、青海以及新疆等地。肉苁蓉始载于《神农本草经》，历代药书对其均有详尽记载，长久以来被列为上品药材，又名大芸、甜大芸、苁蓉、甜苁蓉和地精等，具有温补肾阳、益精补气和润肠通便等功效，在临床上广泛用于治疗肾阳不足、阳瘘不孕、精血亏虚、筋骨无力、腰膝酸软和肠燥便秘。我国内蒙古西部为主产区的荒漠肉苁蓉及管花肉苁蓉为中药肉苁蓉正品。肉苁蓉的化学成分非常复杂，含量最多的为糖类。糖类包括不同聚合度的多糖和低聚糖，以及不同的单糖和双糖。肉苁蓉多糖及低聚糖类具有提高免疫力、润肠通便和治疗II型糖尿病等功效。CN 104262414 A公开了一种从肉苁蓉中同时制备苯乙醇苷、甘露醇、低聚糖浆及多糖的方法，包括如下步骤:采用乙醇水溶液提取肉苁蓉中的单糖、低聚糖及苯乙醇苷，然后大孔吸附树脂柱分离苯乙醇苷类和糖类，洗脱得到的苯乙醇苷溶液经浓缩干燥成产品，糖类经减压浓缩，常温析晶，分离低聚糖类和甘露醇，甘露醇重结晶得高纯度甘露醇，离心清液为低聚糖浆。残渣采用纯水提取多糖，醇沉收集多糖。CN 101870742 B专利技术了一种肉苁蓉多糖的分离提纯方法，将肉苁蓉洗净烘干后粉碎，分别用石油醚和乙醇浸泡并超声处理，以脱除脂肪等成分，过滤后残渣用蒸馏水浸泡并置于冰箱中冷冻，取出后微波处理使之迅速融化，滤液即为肉苁蓉多糖提取液；让此提取液常压通过大孔吸附树脂柱，减压浓缩，醇沉，冷冻干燥，再依次用丙酮、无水乙醚和无水乙醇洗涤，即可得到纯净的肉苁蓉多糖。可以看出，在现有技术中，由于肉苁蓉中大分子量的多糖与小分子量的多糖裹携在一起沉淀，导致分级分离不彻底，产品分子量不集中，理化性质不一致，生物活性不稳定；另外，肉苁蓉多糖的醇沉过程要耗费数量惊人的乙醇，而乙醇的贮存和回收耗时耗能，也给肉苁蓉多糖的产业化带来不便。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供，其能简单快速地制备不同分子聚合度的多糖。为达到以上目的，本专利技术采用如下技术方案:本专利技术提供，包括如下步骤:(I)取肉苁蓉肉质茎，粉碎，用乙醇溶液进行预处理，向得到的滤渣中加入纯化水，固液分离，得到清液I和滤渣II ;所述清液I中含有可溶性肉苁蓉多糖；(2)用微滤膜过滤清液I，得到透过液；(3)依次采用截留分子量为十万级的超滤膜、截留分子量为万级的超滤膜、截留分子量为千级的超滤膜以及截留分子量为百级的纳滤膜过滤透过液，得到不同分子量的可溶性多糖产品。优选地，步骤(3)为:(a)用截留分子量为十万级的超滤膜过滤透过液，得到截留液IV和透过液V ;(b)用截留分子量为万级的超滤膜过滤透过液V，得到截留液VI和透过液VII ;(c)用截留分子量为千级的超滤膜过滤透过液VII，得到截留液VIII和透过液IX；(d)用截留分子量为百级的纳滤膜过滤透过液IX，得到截留液X和透过液XI ;(e)将截留液IV、截留液V1、截留液VIII和截留液X分别干燥，得到不同分子量的可溶性多糖产品。在本专利技术中，使用不同截留分子量的超滤膜和/或纳滤膜过滤，就会得到含有相应截留分子量的多糖成分(例如，用截留分子量为十万级的超滤膜过滤，截留液中的可溶性多糖产品分子量即为十万级)。经测定，截留液IV干燥得到的可溶性多糖的平均分子量为150kDa以上，截留液VI干燥得到的可溶性多糖的平均分子量为1kDa左右，截留液VIII干燥得到的可溶性多糖的平均分子量为2kDa左右，截留液X干燥得到的可溶性多糖的平均分子量为200Da左右。用乙醇溶液进行预处理，可以除去肉苁蓉中含有的苯乙醇苷、小分子多糖以及其他醇溶性物质；而经过固液分离后获得含有丰富可溶性多糖的水提液，这些肉苁蓉中含有的可溶性多糖用纯化水浸出。本专利技术采用不同截留分子量的膜过滤，依次将可溶性多糖进行分级分离，从而制备得到不同分子量的可溶性多糖产品。优选地，所述肉苁蓉为荒漠肉苁蓉、管花肉苁蓉、白花肉苁蓉或沙苁蓉的肉质茎中的一种或至少两种的组合，例如可以是荒漠肉苁蓉，管花肉苁蓉，白花肉苁蓉和沙苁蓉肉质茎的组合，或荒漠肉苁蓉、管花肉苁蓉和沙苁蓉肉质茎的组合。优选地，所述肉苁蓉粉碎至粒度为20-60目，例如可以是20目、22目、24目、26目、28目、30目、32目、34目、36目、38目、40目、42目、44目、46目、48目、50目、52目、54目、56目、58目或60目，优选为40目。优选地，所述乙醇溶液中，乙醇的体积百分比为40-100 %，例如可以是40 %、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95% 或 100%，优选为 70-90%。优选地，所述乙醇溶液以L为单位，肉灰蓉以kg为单位，二者的液固比为(10-30):1，例如可以是 10:1、12:1、14:1、15:1、16:1、18:1、20:1、22:1、24:1、26:1、28:1 或 30:1，优选为15:1ο优选地，所述乙醇溶液预处理的温度为20-80 °C，例如可以是20 °C、25 V、30 °C、35 °C、40 °C、45 °C、50 °C、55 °C、60 °C、65 °C、70 °C、75 °C 或 80 °C，优选为 50-70 V，更优选为60。。。优选地，所述乙醇溶液预处理的时间为30-90min，例如可以是30min、35min、40min、45min、50min、55min、60min、65min、70min、75min、80min、85min 或 90min，优选为60mino优选地，步骤⑴为加热纯化水，然后固液分离，得到清液I和滤渣II。在本专利技术中，可以将含有滤渣的纯化水分为若干份进行分离，以保证过滤的效果，然后将清液合并，最终得到清液I。优选地，所述固液分离为三步法，纯化水与肉苁蓉的液固比分步递减，所述纯化水以L为单位，肉苁蓉以kg为单位，第一步的纯化水与肉苁蓉的液固比为(15-20):1(例如可以是 15:1、15.5:1、16:1、16.5:1、17:1、17.5:1、18:1、18.5:1、19:1、19.5:1 或 20:1)，第二步的纯化水与肉苁蓉的液固比为(8-10):1(例如可以是8:1、8.2:1、8.4:1、8.6:1、8.8:1、9:1、9.2:1、9.4:1、9.6:1、9.8:1或10:1)，第三步的纯化水与肉苁蓉的液固比为5:1。优选地，所述纯化水的温度为20-100 °C，例如可以是20°C、25°C、30°C、35°C、40 °C、45 °C、50 °C、55 °C、60 °C、65 °C、70 °C、75 °C、80 °C、85 °C、90 °C、95 V 或 100 V，优选为60-90 °C，更优选为 80 °C。优选地，所述三步法中后一步的纯化水温度高于或等于前一步的纯化水温度。优选地，所述三步法的每一步中，纯化水与肉苁蓉的混合时间为30-180min，例如可以是 30min、40min、50min、60min、70min、80min、本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种从肉苁蓉中分级分离多糖的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)取肉苁蓉肉质茎，粉碎，用乙醇溶液进行预处理，向得到的滤渣中加入纯化水，固液分离，得到清液I和滤渣II；(2)用微滤膜过滤清液I，得到透过液；(3)依次采用截留分子量为十万级的超滤膜、截留分子量为万级的超滤膜、截留分子量为千级的超滤膜以及截留分子量为百级的纳滤膜过滤透过液，得到不同分子量的可溶性多糖产品。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：赵兵，郭元亨，王晓东，袁晓凡，王丽卫，赵庆生，张玉，张金玉，
申请(专利权)人：中国科学院过程工程研究所，阿拉善中科适用新技术研究院，内蒙古阿拉善苁蓉集团有限责任公司，
类型：发明
国别省市：北京;11
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