具有保肝作用的枳椇子提取物及其提取分离方法和用途技术

本发明专利技术公开了一种具有保肝作用的枳椇子提取物及其提取分离方法和用途，该提取物含有10-99％(质量百分数)的总黄酮碳苷；所述的总黄酮碳苷包括牡荆素2″-O-β-D-葡萄糖苷、斯皮诺素、根皮素-3′,5′-二-C-β-D-葡萄糖苷、6”'-乙酰基斯皮诺素、6”'-对羟基肉桂酰基斯皮诺素和6”'-芥子酰基斯皮诺素6种黄酮碳苷。本发明专利技术从枳椇子中提取出总黄酮碳苷用于预防和治疗急慢性肝炎、酒精性肝病，有效部位成分明确，毒性小，药理作用强，具有良好的药用前景。本发明专利技术的提取物可与药学上可接受的赋型剂一起，采用本领域的常规方法制备成各种剂型，如片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂等。给药剂量为200-800mg/人/天。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于天然药物领域，具体涉及具有保肝作用的枳椇子提取物及其提取分离方法和用途。
技术介绍
肝病是一种常见的严重威胁人类健康的疾病，根据病因可分为病毒性肝炎、酒精性肝炎、非酒精性脂肪肝、自身免疫性肝炎、药物中毒性肝炎、遗传代谢性肝病和其他感染因子引起的肝炎。酒精性肝病(Alcoholic liver disease,ALD)是由于长期过量饮酒，通过乙醇及其代谢产物乙醛使肝细胞发生脂肪变性、坏死和再生导致的一种肝脏疾病，包括酒精性脂肪肝(Alcoholic fatty liver)、酒精性肝炎(Alcoholic hepatitis)、肝纤维化(Alcoholic fibrosis)、肝硬化(Alcoholic cirrhosis)等多种。根据流行病学统计，我国一般人群饮酒率为59.5％，酒精性肝病发病率约占饮酒者的20％，估计该病患者已过1000万，且有逐年上升趋势，而重度饮酒者中35％发展成为酒精性肝炎。在酗酒严重的西方国家，酒精性肝硬化占肝硬化患者的50-75％，酒精性肝病是西方国家导致肝硬化的最主要病因，也是十大常见死因之一。肝炎中以病毒性肝炎对人类危害最大，其中又以乙肝和丙肝尤为突出。乙型肝炎是世界性疾病，我国是乙肝大国，约有1.2亿为乙肝病毒携带者。近年来，国际医药界对防治肝炎药物研究工作比较活跃，主要针对抑制肝炎病毒复制、改善肝功能障碍、抗肝细胞脂质过氧化、免疫调节等方面进行研究。目前，临床上常用的肝炎药物包括保肝的水飞蓟素、联苯双酯，抗病毒类的干扰素、阿昔洛韦，免疫抑制剂环磷酰胺等；治疗酒精性肝病的药物包括抗炎药物糖皮质激素，保肝药物丙基硫氧嘧啶、S-腺苷甲硫氨酸以及抗氧化剂等。目前，化学药物对于病毒性肝炎，尤其是慢性肝炎的防治尚无明确的疗效， 并且存在着毒副作用等弊端。我国有着丰富的天然药物资源，在防治肝炎的临床应用等许多方面有着丰富的经验，并成功开发出水飞蓟素、甘草酸二铵、茯芩多糖、联苯双酯等天然药物，并用于临床治疗，但由于肝炎发病机制较为复杂，多数药物疗效有限，对肝炎不能有效根治，故研究和开发出新一代的肝炎治疗药物是非常必要的。鼠李科枳椇属植物全世界有3种，2个变种，分别为枳椇(Hovenia acerba Lindl.)、北枳椇(Hovenia dulcis Thunb.)和毛果枳椇(Hovenia trichocarpa Chun et Tsiang)以及它们的变种，主要分布在中国、朝鲜、日本和印度。我国华南和西南各省均有分布。枳椇子是枳椇、北枳椇和毛果枳椇以及它们的变种的成熟种子或具有花序轴的果实，具有解酒止呕、止渴除烦、通利二便的功效。枳椇子解酒保肝作用显著，现有醪立清口服液，解酒保肝口服液、防醉胶囊等中成药制剂应用于临床。文献报道黄酮类化合物是枳椇子中的有效成分，韩国学者报道枳椇子提取物及枳椇子中的hovenodulinol(二氢黄酮醇类化合物)具有解酒毒的作用(Park YS,kim HS,Lee HY,et al.Method for preparation of Hovenodulinol,an active ingredient of fruit Hovenia dulcis and alcoholysis or hang-over inhibitor containing thereof[P].KR：KR 2002086963,2002-11-21.)。日本学者报道枳椇子中的hovenitinⅠ(二氢黄酮醇类化合物)、二氢杨梅素(二氢黄酮醇类化合物)具有保肝的活性(Hase K,Ohsugi M,Xiong Q,et al.Hepatoprotective effect of Hovenia dulcis THUNB.on experimental liver injuries induced by carbon tetrachioride or D-galactosamine/lipopolys-accharide[J].Biol.Pharm.Bull.,1997,20(4):381-385)。到目前为止，国内外均未明确提出枳椇子治疗肝炎的药效物质基础。
技术实现思路
为了寻找传统中药枳椇子的治疗肝炎的药效活性成分，本专利技术在对枳椇和毛果枳椇进行系统的化学成分研究基础上，结合与治疗肝炎相关的药效活性筛选，提供了具有保肝作用的枳椇子提取物，该提取物的主要成分是黄酮碳苷类 化合物。本专利技术的另一目的在于提供上述的枳椇子提取物的提取分离方法。本专利技术的再一目的在于提供上述的枳椇子提取物的用途。本专利技术的目的通过下述技术方案实现：一种具有保肝作用的枳椇子提取物，其中总黄酮碳苷所占质量百分数为10-99％，优选40-90％；在本领域，一般用总黄酮碳苷指代多种黄酮碳苷的混合物；所述的总黄酮碳苷包括牡荆素2″-O-β-D-葡萄糖苷(vitexin2″O-β-D-glucopyranoside,ZJ-1)、斯皮诺素(spinosin,ZJ-2)、根皮素-3′,5′-二-C-β-D-葡萄糖苷(phloretin 3′,5′-di-C-β-D-glucopyranoside,ZJ-3)、6”'-乙酰基斯皮诺素(6”'-acetyl-spinosin，ZJ-4)、6”'-对羟基肉桂酰基斯皮诺素(6”'-p-hydroxy-cinnamoyl-spinosin，ZJ-5)和6”'-芥子酰基斯皮诺素(6”'-sinapoyl-spinosin，ZJ-6)等6种黄酮碳苷，其中6”'-乙酰基斯皮诺素(6”'-acetyl-spinosin，ZJ-4)为新化合物；在本专利技术的枳椇子提取物中，上述6种黄酮碳苷占总黄酮碳苷质量的20-80％；更具体地，本专利技术的枳椇子提取物中含有20-32％的ZJ-1、8-19％的ZJ-2、8-19％的ZJ-3、20-32％的ZJ-4、8-19％的ZJ-5、11-23％的ZJ-6；所述百分比为质量百分比。化合物ZJ-1～ZJ-6的化学结构如下所示：上述的枳椇子提取物的提取分离方法，包括以下步骤：以水、乙醇或任意浓度的乙醇水溶液作为提取溶剂，加入中药枳椇子，回流提取2-3次，得到提取液；将提取液浓缩后过滤或者离心，滤液或上清液上样于大孔吸附树脂或聚酰胺树脂层析柱，先用2-3倍柱体积的水洗脱；然后用30～60％(V/V)乙醇洗脱，洗脱至流出液无色；收集30～60％乙醇洗脱液，减压蒸干，即得到含有黄酮碳苷的枳椇子提取物；所述的过滤是用棉花过滤；所述的离心是2000rpm离心15分钟；所述的大孔吸附树脂为聚苯乙烯骨架的极性或非极性大孔吸附树脂，可选自D101型、AB-8型、HPD100型、HPD200型；所述的聚酰胺树脂层析柱的孔径为30目以上。正如
技术介绍
所记载，中药枳椇子是鼠李科枳椇属枳椇(Hovenia acerba Lindl.)、北枳椇(Hovenia dulcis Thunb.)和毛果枳椇(Hovenia trich本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有保肝作用的枳椇子提取物，其特征在于：该提取物含有10‑99％(质量百分数)的总黄酮碳苷。

【技术特征摘要】
1.一种具有保肝作用的枳椇子提取物，其特征在于：该提取物含有10-99％
(质量百分数)的总黄酮碳苷。
2.根据权利要求1所述的枳椇子提取物，其特征在于：所述的总黄酮碳苷
包括牡荆素2″-O-β-D-葡萄糖苷、斯皮诺素、根皮素-3′,5′-二-C-β-D-葡萄糖苷、
6”'-乙酰基斯皮诺素、6”'-对羟基肉桂酰基斯皮诺素和6”'-芥子酰基斯皮诺素6种
黄酮碳苷。
3.根据权利要求2所述的枳椇子提取物，其特征在于：所述6种黄酮碳苷
占总黄酮碳苷质量的20-80％。
4.根据权利要求2所述的枳椇子提取物，其特征在于：所述的枳椇子提取
物中含有20-32％的ZJ-1、8-19％的ZJ-2、8-19％的ZJ-3、20-32％的ZJ-4、8-19％
的ZJ-5、11-23％的ZJ-6；所述百分比为质量百分比。
5.权利要求1-4任一项所述的枳椇子提取物的提取分离方法，其特征在于
包括以下步骤：
以水、乙醇或任意浓度的乙醇水溶液作为提取溶剂，加入中药枳椇子，回
流提取2-3次，得到提取液；将提取液浓缩后...

【专利技术属性】
技术研发人员：张晓琦，叶文才，高美华，李药兰，徐方方，李华，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：广东;44