本发明专利技术公开了一种高卢蜜环菌及在促进天麻有性繁殖生长中的应用及栽培方式。本发明专利技术从贵州不同的天麻主产区采集分离野生蜜环菌，利用蜜环菌、萌发菌、天麻蒴果的专一共生关系，筛选出优良的促进不同类型天麻生长的高产蜜环菌菌株，以期解决天麻人工栽培中蜜环菌不稳定性、易退化、生长势差的缺点，为不同生境、不同栽培方式、不同类型天麻的高产人工栽培技术打下基础。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物
，特别是涉及一种高卢蜜环菌及在促进天麻有性繁殖 生长中的应用及栽培方式。
技术介绍
蜜环菌又名榛蘑、苞谷菌，其子实体味美且菌丝、菌索皆可入药，是一类经济价值 极高的药食用真菌；同时猪苓、天麻的生长都离不开蜜环菌的侵染。目前全球共发现蜜环 菌生物种约40种，其中蜜环菌Armillaria gallica、Armillaria ceptisteas被认为是最 能促进天麻生长的蜜环菌生物种，其中生物种Armillaria gallica促进天麻生长的效果更 佳。 天麻（Gastrodia elata BI)无根无绿叶片，不能进行光合作用，是多年生草本植 物。其生活史大致如下：在有性繁殖即用种子繁殖阶段，必须与萌发菌（紫萁小菇、石斛 小菇等）建立共生关系，然后种子才能获得营养而萌发；萌发后形成的原球茎又必须同化 蜜环菌才能正常生长发育成米麻、白麻；此后，米麻、白麻与蜜环菌一起进入无性繁殖阶段 直至形成箭麻。形成的箭麻抽蔓开花后就会产生种子，这一过程仅靠箭麻自身的营养来完 成，至此天麻完成了从种子到种子的全部生活史。与萌发菌、蜜环菌先后共生完成其生活 史，是天麻生长发育的主要特点。 天麻为贵州地道药材，是我国传统名贵中药，贵州省天麻主产区种植的天麻主要 为乌天麻、红天麻和绿天麻。天麻生长缓慢，自然繁殖系数低，虽然天麻人工栽培技术已经 突破多年，但是与不同类型天麻亲和性好、适应性强、不易退化的蜜环菌，栽培方式等严重 制约着天麻高产栽培的发展。目前未见适应不同类型天麻生长、不同生境的促进天麻高产 的蜜环菌。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是，提供一种高卢蜜环菌及在促进天麻有性繁殖生长 中的应用及栽培方式，它能g服现有蜜环菌与不同类型天麻共生时的产量不稳定性、适应 性低、易退化、生长势差的缺陷。 本专利技术是这样实现的：高卢蜜环菌Armillaria gallica GZA46菌株，其保藏编号 为 CCTCC M 2015005。 所述的高卢蜜环菌Armillaria gallica GZA46菌株CCTCC M 2015005的生物学 形态特征：在标准BDPDA培养基上生长，早期新生菌丝为乳白色，绒毛状菌丝仅着生于接种 组织周围，3天后菌丝由乳白色慢慢变成黄褐色，并开始长出菌索；菌索尖端为白色，生长 至老化后为红褐色；菌索紧贴培养基并向培养基里面生长，分叉形式为单轴分叉，延伸形态 为鹿角状，部分节点分支菌索过多甚至类似气生菌丝长至培养基表面的空间；菌索平均直 径为1. 1mm，平均生长速度为1. 21cm/d。 生理生化特征：菌株液体摇瓶时木聚糖酶、CMC酶、漆酶均是先升后降，且发酵终 点时木聚糖酶、漆酶的酶活性远大于发酵第一天的酶活，CMC酶的酶活远低于发酵第一天的 酶活性。菌株在含杂木肩、棉籽壳不同比例的栽培种培养基中培养时，不含杂木肩或棉籽壳 的培养基中生长速度最快且二者没有显著性差异，杂木肩和棉籽壳都含有且比例相差不大 时，菌株菌索生长速度最慢；但是无杂木肩的培养基中菌株菌索易老化，易在管口形成红褐 色菌索。 木材利用率：菌株在栽培种培养基中生长时，木质素消耗量远大于半纤维素和纤 维素的消耗量，其中纤维素的消耗量最低。 本专利技术的高卢蜜环菌Armillaria gallica GZA46菌株，其rDNA-ITS核苷酸在 GenBank 的Accession N0?是KP335049;其rDNA-IGS核苷酸在GenBank 的Accession N0?是 KP335048 ;其 Tefl-a 部分核苷酸在 GenBank 的 Accession NO?是 KP335050。 具有上述特征的菌株，参照（Antonin V. et al. 2009)等资料，综合生理生化特征， rDNA-ITS、rDNA-IGS、Tefl-a序列结果，鉴定为高卢蜜环菌（Armillaria gallica)，命名为 GZA46。 其核苷酸序列如SEQ ID NO : 1-3。 高卢蜜环菌Armillaria gallica GZA46菌株CCTCC M 2015005在促进天麻有性 繁殖生长中的应用。 所述的天麻为乌天麻、红天麻或绿天麻。 米用高卢蜜环菌Armillaria gallica GZA46菌株CCTCC M 2015005进彳丁天麻有 性繁殖的高产栽培方式， 1)在3月份前清理场地上的杂树及杂草后，挖坑培植固定菌床，待地温达10°C 时，先在坑底放一层湿润的无芳香的阔叶树树叶、生土或木肩与河沙混合物3-5cm，木肩与 河沙等质量比混合；然后树叶上放2-5cm的生土或木肩与河沙混合物，然后在生土或木肩 与河沙混合物上放置无芳香的阔叶树大菌材，大菌材长为18-24cm,直径7-10cm，在大菌 材之间的间隙中交错放置小菌材，小菌材的长为8-12cm,直径为2-4cm ;然后将高卢蜜环 菌Armillaria gallica GZA46菌株的三级固体种辦成核桃大小放置于大小菌材的接口 处，再将湿润的生土或木肩与河沙混合物回填至将菌材覆盖，再依同样方法摆放一层菌材 和菌种，然后用湿润的生土或木肩与河沙混合物填实固定菌床；最后盖上一层编织袋，覆 8-12cm厚的湿润砂土，做成龟背形并盖上枯枝落叶或杂草； 2)培植固定菌床3个月后，进行天麻硕果的有性拌载，以每坑固定菌床为一个单 位取萌发菌并掰碎为约1元硬币大小，将天麻蒴果种子均匀洒在菌块上并拌匀，然后装入 袋中，并保持透气，在18_24°C下恒温放至菌块转白后播种；播种时，揭开固定菌床的编织 袋，取出上层的菌材，露出下层的菌材；按间隔5cm贴近蜜环菌摆放转白拌种萌发菌块一 个，均匀摆完后放一层树叶，回填2~3cm厚的生土或木肩与河沙混合物；按照同样的方式 栽第二层，再将原编织袋回位即可，约半年后即可收获。 本专利技术高卢蜜环菌Armillaria gallica GZA46菌株。采集贵州德江县的野生高 卢蜜环菌菌索，按照表面消毒的组织分离方法，切取0. 5cm的菌索在PDA培养基上培养，纯 化，保存于4°C备用，培养三级菌种后与不同天麻进行有性繁殖，评价白麻、米麻的产量筛选 获得。该GZA46菌株已保藏在中国典型培养物保藏中心（CCTCC，地址：湖北省武汉市武昌 珞珈山武汉大学生科院保藏中心；邮编：430072)，其保藏编号是CCTCC M 2015005,保藏日 期为2015年1月5日，分类命名为高卢蜜环菌，拉丁文学名为Armillaria gallica。 本专利技术也提供该高卢蜜环菌Armillaria gallica GZA46菌株由PDA试管母种快 速扩繁至优良栽培种的各阶段参数。液体摇瓶发酵时GZA46菌株4天就能结束发酵，液体 GZA46菌种无菌条件下接至优良栽培种培养基后15天就能长满菌瓶。 前述液体培养基配方是每升中葡萄糖46g，无水乙醇24g，酵母膏5g，蛋白胨13g， 硫酸镁2g，磷酸二氢钾lgJBiO.OlgJB^OSg，水1000mL，pH自然，121°C高温灭菌30min。 优良栽培种培养基配方是每瓶中2-3cm长直径约lcm无芳香的阔叶树枝条300g，玉米粉 5g，白糖5g，磷酸二氢钾0. 5g，硫酸本文档来自技高网...
【技术保护点】
高卢蜜环菌Armillaria gallica GZA46菌株，其保藏编号为CCTCC M 2015005。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：朱国胜，桂阳，黄万兵，杨通静，龚光禄，卢颖颖，
申请(专利权)人：贵州省农作物品种资源研究所，
类型：发明
国别省市：贵州;52
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