一种尿激酶冻干剂的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种尿激酶冻干剂的制备方法，制剂配方包括尿激酶、人血白蛋白、氯化钠、甘露醇和注射用水，制备步骤包括：制备辅料溶液：注射用水搅拌状态下加入氯化钠、甘露醇至溶解；加入活性炭吸附，脱炭后降温至10℃以下；搅拌加入人血白蛋白溶解，加入尿激酶，溶有尿激酶的溶液用滤膜过滤，进行灌装入瓶和半加塞后，冻干，冻干完毕后压紧瓶塞，缓慢放掉真空，出柜，压盖，目检，包装，全检。本发明专利技术的制备方法通过低温配料提高效价，制备过程使用特制的低温配料装置；人血白蛋白的加入会引起溶液起泡，降低成品的收率，通过磁力搅拌能够减少起泡提高收率；另外对效价测定过程中的装置及方法进行了优化。

【技术实现步骤摘要】
一种尿激酶冻干剂的制备方法
本专利技术涉及医药
，特别是涉及一种尿激酶冻干剂的制备方法。
技术介绍
尿激酶临床主要用于血栓栓塞性疾病的溶栓治疗。包括急性广泛性肺栓塞、胸痛6～12小时内的冠状动脉栓塞和心肌梗死、症状短于3～6小时的急性期脑血管栓塞、视网膜动脉栓塞和其他外周动脉栓塞症状严重的骼股静脉血栓形成者。也用于人工心瓣手术后预防血栓形成，保持血管插管和胸腔及心包腔引流管的通畅等。溶栓的疗效均需后继的肝素抗凝加以维持。尿激酶是由新鲜的人尿中分离精制而得的一种蛋白质酶，一般为白色或类白色的冻干块状物或粉末。主要制成酶类溶血栓药。它能激活体内纤溶酶原转为纤溶酶，从而水解纤维蛋白使新形成的血栓溶解。尿激酶冻干制剂的生产，目前存在的问题在于成品效价下降和收率较低。尿激酶原料稳定性差，其对温度敏感，常温(10℃～30℃)或高温(30℃以上)下配料，成品效价显著降低，即使在低温下，其效价也会缓慢下降。人血白蛋白作为保护剂，能有效降低成品效价下降的速度，但生产过程中会因搅拌引起药液起泡，造成药液损失，从而导致收率下降。尿激酶原料为冻干获得的粉末，该粉末在低温溶液中溶解速度较慢，且加入后会形成块状沉在配料罐底部。目前工业上常用的搅拌形式有机械搅拌和磁力搅拌，如通过机械搅拌需耗费较长时间原料才得以溶解，长时间的搅拌会增加原料效价的损失，且增加药液的起泡量影响收率。
技术实现思路
为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种尿激酶冻干剂的制备方法。本专利技术提供的尿激酶冻干剂的制备方法，制剂配方包括尿激酶、人血白蛋白、氯化钠、甘露醇和注射用水，制备步骤如下：(1)制备辅料溶液：配料容器中加入注射用水，搅拌状态下加入氯化钠、甘露醇，搅拌至溶解；再加入体积比0.1％～0.3％的经注射用水润湿的767型针剂用活性炭，80℃以上搅拌，保温静置吸附10～30min，脱炭；所得料液通过压缩空气进入低温配料系统中，设定低温配料系统温度使溶液降温至10℃以下；所述低温配料系统包括一冷藏箱，冷藏箱内放置一设有进料口和出料口的配料罐，配料罐底部配有磁力搅拌装置，料液由配料罐的出料口经空气压缩泵送入除菌过滤系统，除菌过滤系统连接低温锥形周转罐，周转罐中的溶液通过蠕动泵进行灌装；(2)制备主药溶液：待料液温度在10℃以下，开启低温配料系统的磁力搅拌装置，搅拌状态下加入人血白蛋白，继续搅拌至溶解完全；所得产品取出部分用于饱和滤膜，剩余部分加入尿激酶搅拌至溶解完全后补足溶剂，溶有尿激酶的溶液用上述饱和滤膜过滤；(3)过滤后的溶液依次进行灌装入瓶和半加塞后，冻干；冻干条件：-40℃以下预冻3～4小时；然后在-10℃～0℃升华干燥16.5～17.5小时；再升温至20℃，解析干燥5～6小时；(4)冻干完毕后压紧瓶塞，缓慢放掉真空，出柜，压盖，目检，包装，全检。其中，除菌过滤系统为平板过滤器。本专利技术的上述方法将配料过程分为制备辅料溶液和制备主药溶液两个步骤，其中高温下制备辅料溶液，低温下在特制的低温配料系统中制备主药溶液。制备主药溶液通过在特制的低温配料系统中进行，缩短药液搅拌时间，减少了药液的起泡量以及降低了原料效价的损失，从而达到提高收率和提高成品效价的目的。通过将搅拌方式由机械搅拌变为磁力搅拌，可以更好的促使尿激酶原料粉末的溶解，减少搅拌时间，从而降低原料效价的损失并减少药液的起泡量，达到提高成品效价和提高收率的目的。优选地，所述制剂配方中，尿激酶1～150万单位/mL；人血白蛋白4～8mg/mL；氯化钠5～10mg/mL；甘露醇0.05～0.15g/mL。优选地，步骤(4)所述的全检包括气泡上升法测定尿激酶效价，测定所需溶液的配制时间先后排序如下：(1)pH7.8的巴比妥-氯化钠缓冲液，配制后静置10小时以上；(2)pH9.0的三羟甲基氨基甲烷缓冲液；(3)牛纤维蛋白原溶液；(4)牛纤维蛋白溶酶原溶液；(5)牛凝血酶溶液；其中，pH7.8的巴比妥-氯化钠缓冲液使用过程中不能用力振摇混匀，而是缓慢反复倒置2～3次即可。在效价测定过程中，涉及到五种溶液的配制，分别为(1)巴比妥-氯化钠缓冲液(pH7.8)、(2)三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)、(3)牛纤维蛋白原溶液、(4)牛纤维蛋白溶酶原溶液、(5)牛凝血酶溶液。其中，巴比妥溶液粘稠度较大，容易起泡影响结果判定，配置后需要静置10小时以上，使用过程中不能用力振摇混匀，而是缓慢反复倒置2～3次即可；牛凝血酶溶液随着时间延长，其凝血效果明显下降，会导致成品效价出现较大偏差，必须用前现配。因此，上述溶液必须按照顺序进行配置，顺序为(1)(2)(3)(4)(5)，将溶解速度慢、稳定性相对较好的溶液先行配置，牛凝血酶溶液必须最后配制，以保证其在有限时间内的凝血效果，从而保证测定结果的准确，不会因为个别溶液的配制导致产品效价出现偏差。因尿激酶的不稳定性以及反应的特殊性，尿激酶冻干制剂效价测定过程中，我们对测试装置及检测方法进行了优化，能够保证尿激酶的活性以及测定结果的准确性。优选地，气泡上升法进行终点判断时，在效价测试系统中装入一倾斜放置的白炽灯，加入所有溶液后，反应系统中的溶液在30～40秒内凝结成块，通过白炽灯的灯光照射待检溶液时产生的反射光将气泡照亮放大来观察到小气泡出现的时间，当凝块内小气泡上升到反应系统体积一半时作为反应终点，立即计时。目前尿激酶冻干制剂效价的测定，没有通用的检测设备，采用气泡上升法进行终点判断。反应原理为，加入所有溶液后，反应系统在30～40秒内凝结，当凝块内小气泡上升到反应系统体积一半时作为反应终点，立即计时。但由于气泡很小，出现气泡的时间点很难掌控，导致实验结果出现很大偏差。为了解决上述问题，实验过程中做了如下改进：在该特定的测试系统中，装入一倾斜放置的白炽灯，通过白炽灯的灯光反射，反射光可以将气泡照亮放大，能清晰的观察到小气泡出现的时间，便于立即计时，使得实验结果的精确度大大提高。本专利技术具有以下有益效果：本专利技术提供的制备方法，创新点主要体现在以下四点：(1)通过低温配料能够提高效价；将药液配制过程分为制备辅料溶液和制备主药溶液两个步骤，高温下制备辅料溶液，低温下在特制的低温配料系统中制备主药溶液，减少搅拌时间，有效的降低蛋白质变性，提高成品的收率和效价。(2)特制的低温配料装置；(3)人血白蛋白的加入会引起溶液起泡，降低成品的收率，通过磁力搅拌能够减少起泡提高收率；(4)效价测定过程中装置及方法的优化。附图说明图1为本专利技术低温配料系统的一种结构示意图。具体实施方式下面结合实施例，对本专利技术的具体实施方式作进一步详细描述，以使本领域的技术人员可以更好地理解本专利技术并能予以实施。以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。实施例1：1000个制剂单位尿激酶冻干制剂的成分及用量：制备过程：1、药液配制1.1制备辅料溶液：于配料桶中加入750mL的新鲜注射用水，搅拌状态下依次加入5.0g氯化钠、50g甘露醇，搅拌至溶解。1.2活性炭吸附及脱炭：加入1.0g767型针剂用活性炭(用注射用水润湿)，80℃以上保温、搅拌10分钟，静置吸附10分钟，脱炭。脱炭后的料液通过压缩空气进入特制的低温配料系统中(系统结构示意见图1)，设定低温配料系统温度2℃，使料液降温至10℃以下。所述低本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种尿激酶冻干剂的制备方法，其特征在于，制剂配方包括尿激酶、人血白蛋白、氯化钠、甘露醇和注射用水，制备步骤如下：(1)制备辅料溶液：配料容器中加入注射用水，搅拌状态下加入氯化钠、甘露醇，搅拌至溶解；再加入体积比0.1％～0.3％的经注射用水润湿的767型针剂用活性炭，80℃以上搅拌，保温静置吸附10～30min，脱炭；所得料液通过压缩空气进入低温配料系统中，设定低温配料系统温度使溶液降温至10℃以下；所述低温配料系统包括一冷藏箱，冷藏箱内放置一设有进料口和出料口的配料罐，配料罐底部配有磁力搅拌装置，料液由配料罐的出料口经空气压缩泵送入除菌过滤系统，除菌过滤系统连接低温锥形周转罐，周转罐中的溶液通过蠕动泵进行灌装；(2)制备主药溶液：待料液温度在10℃以下，开启低温配料系统的磁力搅拌装置，搅拌状态下加入人血白蛋白，持续搅拌至溶解完全；所得产品取出部分用于饱和滤膜，剩余部分加入尿激酶搅拌至溶解完全后补足溶剂，溶有尿激酶的溶液用上述饱和滤膜过滤；(3)过滤后的溶液依次进行灌装入瓶和半加塞后，冻干；冻干条件：‑40℃以下预冻3～4小时；然后在‑10℃～0℃升华干燥16.5～17.5小时；再升温至20℃，解析干燥5～6小时；(4)冻干完毕后压紧瓶塞，缓慢放掉真空，出柜，压盖，目检，包装，全检。...

【技术特征摘要】
1.一种尿激酶冻干剂的制备方法，其特征在于，制剂配方包括尿激酶、人血白蛋白、氯化钠、甘露醇和注射用水，所述制剂配方中，尿激酶1～150万单位/mL；人血白蛋白4～8mg/mL；氯化钠5～10mg/mL；甘露醇0.05～0.15g/mL；制备步骤如下：(1)制备辅料溶液：配料容器中加入注射用水，搅拌状态下加入氯化钠、甘露醇，搅拌至溶解；再加入体积比0.1％～0.3％的经注射用水润湿的767型针剂用活性炭，80℃以上搅拌，保温静置吸附10～30min，脱炭；所得料液通过压缩空气进入低温配料系统中，设定低温配料系统温度使溶液降温至10℃以下；所述低温配料系统包括一冷藏箱，冷藏箱内放置一设有进料口和出料口的配料罐，配料罐底部配有磁力搅拌装置，料液由配料罐的出料口经空气压缩泵送入除菌过滤系统，除菌过滤系统连接低温锥形周转罐，周转罐中的溶液通过蠕动泵进行灌装；(2)制备主药溶液：待料液温度在10℃以下，开启低温配料系统的磁力搅拌装置，搅拌状态下加入人血白蛋白，持续搅拌至溶解完全；所得产品取出部分用于饱和滤膜，剩余部分加入尿激酶搅拌至溶解完全后补足溶剂，溶有尿激酶的溶液用上述饱和滤膜过滤；(...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘艳红，唐维，刘红华，方智，
申请(专利权)人：武汉人福药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42