一种高纯度土霉素的生产工艺制造技术

本发明专利技术涉及生物制药工艺技术领域，具体是一种高纯度土霉素的生产工艺，其生产工艺流程包括发酵、酸化、纯化、过滤、脱色、结晶、干燥七个阶段。本发明专利技术在原有工艺的基础上加以调整、创新，提供了一种高纯度土霉素的生产工艺。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物制药工艺
，具体是一种高纯度土霉素的生产工艺。
技术介绍
土霉素又称为地霉素或氧四环素，英文名称(TerramycinOxytetracycline)属于抗菌素的一种，对多种球菌和杆菌有抗菌作用，对立克次体和阿米巴病原虫也有抑制作用，用来治疗上呼吸道感染、胃肠道感染、斑瘆伤寒等，也用于畜禽药及饲料添加剂。土霉素是通过生物合成得到的广谱抗生素，目前国内土霉素提取工艺为用草酸(或磷酸)做酸化剂调节PH值，利用黄血盐-硫酸锌作净化剂协同去除蛋白质等高分子杂质，然后用122树脂脱色进一步净化土霉素滤液，最后调PH至4.8左右结晶得到土霉素碱产品。此工艺在生产中一直沿用至今，不思创新。但该工艺所得的土霉素收率低，成品纯度亦不足，纯度仅有96%?97%。
技术实现思路
为了解决上述现有土霉素生产工艺的收率低，成品纯度不足的缺点，本专利技术在原有工艺的基础上加以调节、创新，提供了一种高纯度土霉素的生产工艺。本专利技术的技术方案如下:一种高纯度土霉素的生产工艺，包括以下步骤: (O发酵:首先培养三支斜面孢子，斜面孢子的培养基是由麸皮和琼脂组成，用纯净水配制，控制培养基内温度为36.5?36.8°C，相对湿度为50%?60%，培养时间设置为96?108小时；将制得的三支斜面孢子加入无菌水之后制成培养液，将培养液放置于4V?6V的冰箱中备用； 准备三个自带有搅拌装置和温度自动调节装置的发酵罐，分别命名为I号、2号、3号，使用前都采用蒸汽灭菌法灭菌；将上述冰箱中的培养液移入I号发酵罐内，设置罐内温度为30°C，密封I号发酵罐，发酵28?30小时后，将培养液移入2号发酵罐； 设置2号发酵罐罐内温度为31°C，密封2号发酵罐，发酵28?30小时后，用pH计测量培养液的PH值，若pH值大于6.0，将培养液移入3号发酵罐；否则继续培养； 设置3号发酵罐罐内温度为35°C，密封3号发酵罐，发酵80?100小时后，向罐内通入适量氧气，向培养液内通入15%质量分数的氨水，同时用pH计测量pH值，当pH值大于6.4后，停止通入氨水；之后每隔10小时重复通入氧气和氨水的操作；发酵150?160小时后，停止通入氧气和氨水，然后再发酵15个小时，取出培养液； (2)酸化:向培养液中缓慢加入65%质量分数的盐酸作为酸化剂，添加过程中，用pH计监测培养液的PH值，当pH值稳定在1.6?1.9内，停止加入酸化剂； (3)纯化:向培养液中搅拌加入纯化剂K2Fe(CN) 6 一 ZnS04，加入纯化剂的容积约等于培养液容积的一半，二者反应后，溶液中出现大量兰绿色絮状物； (4)过滤:将上述产生沉淀的培养液经粗滤器、精滤器、超滤器三重过滤后，抽滤出净化滤液，用10%质量分数的稀盐酸调节pH值在4.8左右； (5)脱色:将上述净化滤液通入脱色罐，由其中的122-2树脂进行脱色； (6)结晶:取出上述脱色后的培养液，加入55%质量分数的氢氧化钠溶液，调节pH值为4.5?4.8，控制培养液温度在28?30°C;培养液经离心结晶设备连续结晶，控制结晶速度，使结晶时间控制住2?2.5小时，得到土霉素湿成品； (7)干燥:将上述土霉素湿成品经过摇摆机过40目的筛网，制成颗粒后进入三级旋风干燥器中，干燥后得到土霉素成品。所述3号发酵罐中的发酵过程会产生大量泡沫，需加入消沫剂进行消沫。所述I号发酵罐内发酵完成后，培养液趋于浓厚，并转黄色，培养液的pH值在6.0?6.4内；所述2号发酵罐内发酵完成后，培养液的外观为深粽色，浓稠状，有少量气泡产生。所述发酵过程中的使用三个发酵罐若有条件限制，可以改为使用一个发酵罐，但对应设置三段相同发酵条件的发酵过程。所述酸化过程中加入的酸化剂可以更改为65%质量分数的草酸或磷酸。本专利技术的优点:本专利技术在原有工艺的基础上加以调整、创新，提供了一种高纯度土霉素的生产工艺。【具体实施方式】 为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。一种高纯度土霉素的生产工艺，包括以下步骤: (O发酵:首先培养三支斜面孢子，斜面孢子的培养基是由麸皮和琼脂组成，用纯净水配制，控制培养基内温度为336.8°C，相对湿度为60%，培养时间设置为100小时；将制得的三支斜面孢子加入无菌水之后制成培养液，将培养液放置于6°C的冰箱中备用；若培养基内温度超过37°C 2小时则生产能力明显下降，不可用于生产； 准备三个自带有搅拌装置和温度自动调节装置的发酵罐，分别命名为I号、2号、3号，使用前都采用蒸汽灭菌法灭菌；将上述冰箱中的培养液移入I号发酵罐内，设置罐内温度为30°C，密封I号发酵罐，发酵30小时后，将培养液移入2号发酵罐；I号罐的罐内生长弱，未使用搅拌装置； 设置2号发酵罐罐内温度为31°C，密封2号发酵罐，发酵30小时后，用pH计测量培养液的PH值，若pH值大于6.0，将培养液移入3号发酵罐；否则继续培养； 设置3号发酵罐罐内温度为35°C，密封3号发酵罐，发酵100小时后，向罐内通入适量氧气，向培养液内通入15%质量分数的氨水，同时用pH计测量pH值，当pH值大于6.4后，停止通入氨水；之后每隔10小时重复通入氧气和氨水的操作；发酵160小时后，停止通入氧气和氨水，然后再发酵15个小时，取出培养液； (2)酸化:向培养液中缓慢加入65%质量分数的盐酸作为酸化剂，添加过程中，用pH计监测培养液的PH值，当pH值稳定在1.6?1.9内，停止加入酸化剂；土霉素能和钙、镁等金属离子，某些季胺益、碱等形成复合物沉淀(即不溶性络合物)，在发酵过程中，当前第1页1 2 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高纯度土霉素的生产工艺，其特征在于，包括以下步骤：（1）发酵：首先培养三支斜面孢子, 斜面孢子的培养基是由麸皮和琼脂组成，用纯净水配制，控制培养基内温度为36.5～36.8℃，相对湿度为50%～60%，培养时间设置为96～108小时；将制得的三支斜面孢子加入无菌水之后制成培养液，将培养液放置于4～6℃的冰箱中备用；准备三个自带有搅拌装置和温度自动调节装置的发酵罐，分别命名为1号、2号、3号，使用前都采用蒸汽灭菌法灭菌；将上述冰箱中的培养液移入1号发酵罐内，设置罐内温度为30℃，密封1号发酵罐，发酵28～30小时后，将培养液移入2号发酵罐；设置2号发酵罐罐内温度为31℃，密封2号发酵罐，发酵28～30小时后，用pH计测量培养液的pH值，若pH值大于6.0，将培养液移入3号发酵罐；否则继续培养；设置3号发酵罐罐内温度为35℃，密封3号发酵罐，发酵80～100小时后，向罐内通入适量氧气，向培养液内通入15%质量分数的氨水，同时用pH计测量pH值，当pH值大于6.4后，停止通入氨水；之后每隔10小时重复通入氧气和氨水的操作；发酵150～160小时后，停止通入氧气和氨水，然后再发酵15个小时，取出培养液；（2）酸化：向培养液中缓慢加入65%质量分数的盐酸作为酸化剂，添加过程中，用pH计监测培养液的pH值，当pH值稳定在1.6～1.9内，停止加入酸化剂；（3）纯化：向培养液中搅拌加入纯化剂K2Fe（CN）6－ZnSO4，加入纯化剂的容积约等于培养液容积的一半，二者反应后，溶液中出现大量兰绿色絮状物；（4）过滤：将上述产生沉淀的培养液经粗滤器、精滤器、超滤器三重过滤后，抽滤出净化滤液，用10%质量分数的稀盐酸调节pH值在4.8左右；（5）脱色：将上述净化滤液通入脱色罐，由其中的122‑2树脂进行脱色；（6）结晶：取出上述脱色后的培养液，加入55%质量分数的氢氧化钠溶液，调节pH值为4.5～4.8，控制培养液温度在28～30℃；培养液经离心结晶设备连续结晶，控制结晶速度，使结晶时间控制住2～2.5小时，得到土霉素湿成品；（7）干燥：将上述土霉素湿成品经过摇摆机过40目的筛网，制成颗粒后进入三级旋风干燥器中，干燥后得到土霉素成品。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：任磊，
申请(专利权)人：合肥卓元科技服务有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽;34