用于治疗Rac-GTP酶介导的病症的化合物制造技术

本发明专利技术涉及通过定量的高通量测定鉴定为在慢性粒细胞性白血病的治疗中有效的包括某些化合物的组合物，以及制造这些化合物的方法以及这些化合物用于治疗Rac-GTP酶介导的病症的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】用于治疗Rac-GTP酶介导的病症的化合物 相关申请的夺叉引用 本申请根据35U.S.C. § 119(e)要求2012年10月12日提交的美国临时专利申请 第61/713, 300号的优先权，其通过引用全文并入本文。
技术介绍
Rho GTP酶包括小GTP酶Ras超家族的一个分支。它们在非常广泛的细胞过程包括 细胞迀移、细胞极化、膜运输、细胞骨架排布、增殖、凋亡和转录调控的调节上起到重要作用 (Etienne-Manneville, S 等人（2002). Nature 420,629-635· ;Boettner, B 等人·（2002). Gene 286,155-174.)。因此，Rho GTP酶已经牵涉于多种人类疾病的发病机制当中，包括心 血管疾病和癌（Hall, A. Science 1998, 279, 509-514 ;Wennerberg, K.，和 Der, C. J. (2004) J. Cell Sci. 117, 1301-1312. ；Ridley,A. J. (2006)Trends Cell Biol. 16, 522-529) 〇 Rho家族由22个基因组成，其编码人类中包括Rac的至少25个蛋白。Rho家族成 员接合GTP并且在失活的GDP结合状态和活性的GTP接合状态之间转换。在这样的情况下， Rho家族成员中很多在它们的活性状态表现出GTP酶活性。状态之间的这一循环由以下蛋 白调控：鸟嘌呤核苷酸交换因子（GEF) ;GTP酶激活蛋白（GAP);和作为负调节子的GDP解离 抑制剂（⑶I)(Malumbres, M 等人（2003)Nat. Rev. Cancer 3,459-465)。在静止期细胞中， Rho GTP酶主要以失活的GDP结合状态存在，而在生长刺激下，GEF被激活并随后刺激鸟嘌 呤核苷酸交换活性以促进活性的GTP结合Rho的形成。当结合GTP时，活性的活Rho GTP 酶与下游影响因子包括蛋白激酶和具有接头功能的其他蛋白相互作用。Rho GTP酶的内在 GTP水解功能之后被受Rho特异性GTP酶激活蛋白刺激。这使得Rho蛋白返回到它的失活 状态。Rac 特异性 RhoGEF 包括 Tiaml 和 Trio (Gao, Y 等人.（2004).?1"〇(3.恥七1.六。3(1.5(^· USA 101,7618-7623.)〇 Rac亚家族也与细胞转化相关，因此，Rho GTP酶的活性异常与癌有关。它们在 由Ras和其他癌基因引起的转化中起着至关重要的作用。Racl的Raclb剪接变体已显示 为组成性活性并转化；已经在乳腺癌和结肠癌中观察到其过表达（Qiu，R.G.等人.（1995) Nature 374, 457-459 ;Khosravi-Far, R.，等人（1995)Mol. Cell. Biol. 15, 6443-6453 ; Renshaw，M.W.等人（1996) Curr. Biol. 6, 76-83 ;Ferra;ro，D·，等人·（2006) Oncogene 25, 3689-3698)。已在，例如，脑肿瘤中注意到Rac3突变体，并且Racl和Rac3两者已经与 胶质母细胞瘤侵袭相关联（Hwang, S. L 等人（2005) J. Clin. Neurosci. 12, 571-574) 〇 在恶性细胞中，异常的Rho GTP酶活性因 Rho GTP酶表达上的变化或者调控Rho 功能的GEF或GAP的功能受扰而产生。（Karnoub，A. E等人（2004). Breast Cancer Res. Treat. 84, 61-71)。由于Rho参与细胞转化的证据，Rho GTP酶是抗癌治疗的可能目标。抑 制GEF与它们各自的Rho家族成员相互作用的化合物将会是有用的Rho活性抑制剂并表现 出强大的特异性。到目前为止，小分子NSC23766( g卩，N6-氨基]-6-甲基-4-嘧啶碱基]-2-甲基-4, 6-喹啉二胺三盐酸盐）已被确定为结合 Rac 1并通过Rac-特异性RhoGEF防止其激活。然而一些GEF活性没有被封闭。 慢性骨髓性白血病（CML)是以费城染色体的产物p210-BCR-ABL的表达为表征的 恶性疾病。也被称为慢性粒细胞白血病（CGL)的是以骨髓中的主要髓样细胞不受调控的增 长和这些细胞在血液中的累积为表征的白血细胞的癌症。小鼠模型中Rho GTP酶Racl和 Rac2的缺乏已经显示出p210-BCR-ABL介导的细胞增殖的显著减少。这一证据强有力地表 明Rac是白血病治疗的潜在标靶。（E K Thoma等人，Leukemia 22, 898-904, May 2008) 〇
技术实现思路
本公开基于对通过Rac-GTP酶蛋白上对接的分析鉴定的某些抗癌化合物的发现。 具体地，通过这一测定鉴定的这些化合物中的一个或多个在抑制癌细胞上表现出超高活性 并且对正常细胞的毒性低。 在一个方面，本公开特征在于包括药学上可接受的载体和式（I)的化合物或其盐 (例如作为活性剂）的药物组合物： 在式（I)中，Rp R2、R3、R4、R5、R6、R 7、馬和R9中的每一个独立地为H、C「C1Q烷基、 C2-Cltl烯基、C 2-c1(l炔基、C 3-c2(l环烷基、C 3-c2(l环烯基、C「C2(l杂环烷基、C「c2(l杂环烯基、芳 基、杂芳基、卤代、〇Ra、SRa、C00Ra、OC (0) Ra、C (0) Ra、C (0) NRaRb、S (0) 2NRaRb或 NR aRb，其中艮和 Rb中的每一个独立地为H、C ^Cltl烷基、C 2-C1Q烯基、C 2-C1Q炔基、C 3-C2Q环烷基、C 3-C2Q环烯基、 C1-C2tl杂环烷基、C ^C2tl杂环烯基、芳基或杂芳基。 参照式（I)，本文描述的化合物的一个亚组是其中Rp R2、R3、R4、R5、R6、R 7、馬和R9分别是H、C1-Cltl烷基（例如CH 3)或NRaRb (例如N (CH3) 2)的那些。例如，在这些化合物中， R7可以是N(CH3) 2而R 2和R3中的每一个可以是CH3。这样的化合物的实例为 在另一个方面，本公开特征在于包括药学上可接受的载体和式（II)的化合物或 其盐（例如作为活性剂）的药物组合物： 在式（II)中，X是N或CH 5m RjPR5中的每一个独立地为HA1-Ciq烷基、 C2-Cltl烯基、C 2-c1(l炔基、C 3-c2(l环烷基、C 3-c2(l环烯基、C「C2(l杂环烷基、C「c2(l杂环烯基、芳 基、杂芳基、卤代、〇Ra、SRa、COORa、OC (O) Ra、C (O) Ra、C (O) NRaRb、S (O) 2NRaRb或 NR aRb;R 6、R7、R8和R9中的每一个独立地为H、C ^Cltl烷基、C 2-C1Q烯基、C 2-C1Q炔基、C 3-C2Q环烷基、C 3-(：2。环 烯基、C「C2Q杂环烷基、C「C2Q杂环烯基、芳基、杂芳基、卤代、0Ra、SR a、C00Ra、0C(0)Ra、C(O) Ra、C (0) NRaRb、S (0) 2NRaRb或NR aRb;或者R 6和本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种药物组合物，包括药学上可接受的载体和式(I)的化合物或其盐：其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9中的每一个独立地为H、C1‑C10烷基、C2‑C10烯基、C2‑C10炔基、C3‑C20环烷基、C3‑C20环烯基、C1‑C20杂环烷基、C1‑C20杂环烯基、芳基、杂芳基、卤代、ORa、SRa、COORa、OC(O)Ra、C(O)Ra、C(O)NRaRb、S(O)2NRaRb或NRaRb，其中Ra和Rb中的每一个独立地为H、C1‑C10烷基、C2‑C10烯基、C2‑C10炔基、C3‑C20环烷基、C3‑C20环烯基、C1‑C20杂环烷基、C1‑C20杂环烯基、芳基或杂芳基。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·A·威廉姆斯，
申请(专利权)人：儿童医疗中心公司，
类型：发明
国别省市：美国;US