羊膜制品和纯化的组合物及其使用方法技术

已经发现含有特异性生物成分组合的组合物在哺乳动物细胞中具有许多有用的作用，包括调节哺乳动物细胞的TGF-β信号传导，细胞凋亡和增殖以及减轻小鼠炎症。这些成分可以商购获得，或可以由生物组织，诸如胎盘组织制备。本文所述的胎盘羊膜(AM)制品包括AM片，AM提取物，AM胶冻，AM基质，和这些组合物与另外成分的混合物。这些组合物可以用于治疗各种疾病，诸如伤口愈合，炎症和与血管发生-相关疾病。

【技术实现步骤摘要】
羊膜制品和纯化的组合物及其使用方法本申请是2006年9月27日提交的专利技术名称为“羊膜制品和纯化的组合物及其使用方法”的第200680044389.3号中国专利申请的分案申请。交叉参考本申请要求2005年9月27日提交的美国临时申请号60/720,760的利益，将该文献完整地引入本文作为参考。有关联邦政府资助研究的声明本专利技术得到了美国政府在NationalInstitutesofHealth颁发的资助金号RO1EY06819下的支持。美国政府可以在本专利技术中拥有一定的权利。专利
本专利技术一般涉及生物学和药学领域。更具体地说，本专利技术涉及使用可以在羊膜制品中存在的化合物的组合调节细胞生理和病理过程的组合物和方法。专利技术背景胎盘为妊娠过程中包裹胎儿的暂时器官。胎盘能够转运气体和营养物，并且还提供其它代谢和内分泌功能。胎盘由几种类型组织组成。脐带将胎盘与胎儿连接并且将氧输送给胎儿。脐带具有两条动脉和一条静脉。Wharton胶冻，即专用凝胶状结缔组织材料包围脐带以防止其在胎儿活动和发育过程中受到损害。胎盘的外"壳"称作“绒毛膜”。胎盘的绝大部分由绒毛膜绒毛组成，它们为绒毛膜绒毛树的延伸。通过这些结构，发生胎儿营养交换。羊膜(AM)为充满羊水的无血管膜囊。该膜为包裹羊膜腔中的胎儿的最内层膜。这种组织由上皮层和其下相邻的无血管基质层组成。专利技术概述本说明书描述了纯化的组合物和羊膜制品(即由羊膜材料制备的组合物，该羊膜材料包括羊膜，羊膜基质和羊膜胶冻)。在某些实施方案中，纯化组合物中的至少一种成分获自羊膜制品。本文还描述了纯化的组合物，其中纯化组合物中的至少一种成分获自人胎盘和绒毛膜。本文还描述了制备上述纯化组合物和制品中的任一种的方法。本文还描述了储藏和保存上述纯化纯化组合物和制品中的任一种的方法。本文还描述了使用上述纯化组合物和制品中的任一种的方法，包括保存方法，细胞培养方法，组织培养方法，治疗方法，预防方法和美容方法。在一个方面中为纯化的组合物，其包含：·交联高分子量乙酰透明质酸(HA)；·肿瘤坏死因子-刺激基因6(TSG-6)；·五聚环蛋白(PTX-3)；和·血小板反应蛋白(TSP-1)。在另一个实施方案中，纯化组合物中的至少部分成分由选自人羊膜，人羊膜胶冻，人羊膜基质或其组合(combination)的人羊膜材料制备。在另一个实施方案中，该纯化的组合物还包含Smad7。在纯化的组合物的另一个或可选择的实施方案中，HA的交联包含与间-α-胰蛋白酶抑制剂的重链的共价键。在纯化的组合物的另一个或可选择的实施方案中，蛋白质与HA之比小于约100。在纯化的组合物的另一个或可选择的实施方案中，纯化的组合物的制备方法包括：·获得冷冻或预先冷冻的人胎盘；·融化胎盘并且从融化的胎盘中分离人羊膜材料；和·在合适的缓冲液中匀化人羊膜材料。在另一个或可选择的实施方案中，所述的制备方法还包括：·冷冻人羊膜材料；和·研磨冷冻的羊膜材料。在另一个或可选择的实施方案中，所述的制备方法还包括：·冻干匀化物；或·离心匀化物并且从离心的匀化物中分离上清液。在另一个或可选择的实施方案中，所述的制备方法还包括：·将上清液冻干成粉末。在另一个或可选择的实施方案中，纯化的组合物还包含用于非固体剂型或延长释放的固体剂型的药学上可接受的载体。本文所述的另一个方面为抑制受治疗者瘢痕形成的方法，包括对有抑制瘢痕形成需要的受治疗者提供有效量的抑制瘢痕形成组合物的步骤；其中该抑制瘢痕形成组合物包含由选自从羊膜提取的人羊膜，人羊膜胶冻，人羊膜基质或其组合的人羊膜材料制备的至少一种成分。在这类方法的另一个或可选择的实施方案中，至少一种成分由人羊膜材料提取。在这类方法的另一个或可选择的实施方案中人羊膜材料为人羊膜基质。在这类方法的另一个或可选择的实施方案中，提取方法包含：·获得冷冻或预先冷冻的人胎盘；·融化胎盘并且从融化的胎盘中分离人羊膜材料；·在合适的缓冲液中匀化人羊膜材料；·任选将匀化物冻干成粉末；和·将匀化物或粉末与用于非固体剂型或延长释放的固体剂型的药学上可接受的载体混合。在另一个或可选择的实施方案中，制备方法中使用如下步骤取代了冻干匀化物的步骤：·离心匀化物，从离心的匀化物中分离上清液，并且任选将上清液冻干成粉末。在另一个方面中为逆转受治疗者瘢痕形成的方法，包括对形成瘢痕的受治疗者提供有效量的逆转瘢痕组合物的步骤；其中该逆转瘢痕组合物包含由选自从羊膜提取的人羊膜，人羊膜胶冻，人羊膜基质或其组合的人羊膜材料制备的至少一种成分。在这些方法的另一个实施方案中，至少一种成分由人羊膜材料提取。在这些方法的另一个的实施方案中，人羊膜材料为人羊膜基质。在这些方法的另一个的实施方案中，提取方法包括：·获得冷冻或预先冷冻的人胎盘；·融化胎盘并且从融化的胎盘中分离人羊膜材料；·在合适的缓冲液中匀化人羊膜材料；·任选将匀化物冻干成粉末；和·将匀化物或粉末与用于非固体剂型或延长释放的固体剂型的药学上可接受的载体混合。在另一个的实施方案中，所述的制备方法使用如下步骤取代了冻干匀化物的步骤：·离心匀化物，从离心的匀化物中分离上清液，并且任选将上清液冻干成粉末。在另一方面为抑制受治疗者血管发生的方法，包括对有抑制血管发生需要的受治疗者提供有效量的抑制血管发生组合物的步骤；其中该抑制血管发生组合物包含由选自从羊膜提取的人羊膜，人羊膜胶冻，人羊膜基质或其组合的人羊膜材料制备的至少一种成分。在这些方法的另一个实施方案中，至少一种成分由人羊膜材料提取。在这些方法的另一个实施方案中，人羊膜材料为人羊膜基质。在这些方法的另一个的实施方案中，所述的组合物包含：·交联高分子量乙酰透明质酸(HA)；·肿瘤坏死因子-刺激基因6(TSG-6)；·五聚环蛋白(PTX-3)；和·血小板反应蛋白(TSP-1).在这些方法的另一个的实施方案中，提取方法包括：·获得冷冻或预先冷冻的人胎盘；·融化胎盘并且从融化的胎盘中分离人羊膜材料；·在合适的缓冲液中匀化人羊膜材料；·任选将匀化物冻干成粉末；和·将匀化物或粉末与用于非固体剂型或延长释放的固体剂型的药学上可接受的载体混合。在这些方法的另一个的实施方案中，制备方法中使用如下步骤取代了冻干匀化物的步骤：·离心匀化物，从离心的匀化物中分离上清液，并且任选将上清液冻干成粉末。在这些方法的另一个的实施方案中，需要的受治疗者为患有癌症的人。在这些方法的另一个的实施方案中，需要的受治疗者为患有与年龄相关的黄斑变性的人。在这些方法的另一个的实施方案中，提供了非固体剂型或延长释放的固体剂型形式的抑制血管发生组合物。在这些方法的另一个的实施方案中，该抑制血管发生组合物具有如下特性：·诱导涉及血管形成的内皮细胞凋亡；·防止涉及血管形成的内皮细胞迁移；和·防止涉及血管形成的内皮细胞管形成。减轻或预防受治疗者炎症的方法，包括对需要炎症抑制或预防的受治疗者提供有效量的炎症抑制组合物的步骤；其中该炎症抑制组合物包含由选自从羊膜提取的人羊膜，人羊膜胶冻，人羊膜基质或其组合的人羊膜材料制备的至少一种成分。在这些方法的另一个的实施方案中，至少一种成分由人羊膜材料提取。在这些方法的另一个的实施方案中，人羊膜材料为人羊膜。在这些方法的另一个的实施方案中，所述的组合物包含：·交联高分子量乙酰透明质酸(HA)本文档来自技高网...

【技术保护点】
纯化的组合物，包含：·交联高分子量乙酰透明质酸(HA)；·肿瘤坏死因子‑刺激基因6(TSG‑6)；·五聚环蛋白(PTX‑3)；和·血小板反应蛋白(TSP‑1)。

【技术特征摘要】
2005.09.27 US 60/720,7601.纯化的组合物，包含：·交联高分子量乙酰透明质酸；·肿瘤坏死因子-刺激基因6；·五聚环蛋白-3；和·血小板反应蛋白-1；其中由人羊膜材料的水溶性提取物制备至少部分所述纯化的组合物的成分。2.权利要求1所述的纯化的组合物，其中由人羊膜制备至少部分所述纯化的组合物的成分。3.权利要求1所述的纯化的组合物，其中由选自人羊膜胶冻、人羊膜基质或其组合的人羊膜材料制备至少部分所述纯化的组合物的成分。4.权利要求1所述的纯化的组合物，还包含Smad7。5.权利要求1所述的纯化的组合物，其中高分子量乙酰透明质酸的交联包含与间-α-胰蛋白酶抑制剂重链的共价键。6.权利要求1所述的纯化的组合物，其中蛋白质与高分子量乙酰透明质酸之比小于100。7.权利要求1所述的纯化的组合物，还包含用于非固体剂型或延长释放的固体剂型的药...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢弗岑格，何华，李炜，
申请(专利权)人：组织技术公司，
类型：发明
国别省市：美国;US