由穿山龙和刺五加为药材的中药复方制剂中6个化学成分的定量分析方法技术

本发明专利技术公开了一种由穿山龙和刺五加为药材的中药复方制剂中6个化学成分的定量分析方法,包括如下步骤：(1)配制混合对照品溶液；(2)配制第一、第二种供试品溶液；(3)含量测定：分别取混合对照品溶液和第一、第二种供试品溶液在高效液相色谱检测条件为：C18键合硅胶为填充剂的色谱柱，以乙腈-甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱，检测器为二极管阵列检测器和蒸发光散射检测器联用进行高效液相色谱检测，获得混合对照品溶液和第一、第二种供试品溶液的高效液相色谱图，以外标法测定供试品中薯蓣皂苷、伪原薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷、绿原酸、紫丁香苷和异嗪皮啶的含量。本测定方法操作简便快速，准确度高、重复性好，可以提高产品的质控水平。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种,包括如下步骤：(1)配制混合对照品溶液；(2)配制第一、第二种供试品溶液；(3)含量测定：分别取混合对照品溶液和第一、第二种供试品溶液在高效液相色谱检测条件为：C18键合硅胶为填充剂的色谱柱，以乙腈-甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱，检测器为二极管阵列检测器和蒸发光散射检测器联用进行高效液相色谱检测，获得混合对照品溶液和第一、第二种供试品溶液的高效液相色谱图，以外标法测定供试品中薯蓣皂苷、伪原薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷、绿原酸、紫丁香苷和异嗪皮啶的含量。本测定方法操作简便快速，准确度高、重复性好，可以提高产品的质控水平。【专利说明】由穿山龙和刺五加为药材的中药复方制剂中6个化学成分 的定量分析方法
本专利技术设及一种中药复方制剂中6个化学成分的定量分析方法。
技术介绍
由穿山龙和刺五加为药材的中药复方制剂主要药效成分包括馨葫皂巧（馨葫皂 巧元）、延龄草巧、甲基馨葫皂巧、原馨葫皂巧、伪原馨葫皂巧、紫了香巧（刺五加巧B)、刺五 加巧E、异嗦皮晚、搬皮素、绿原酸、紫了香树脂巧等。众所周知，中药复方制剂均W多种有 效成分共同发挥药效作用，现有的质控标准多W单一成分的含量为指标来评价中药质量， 难W体现生产过程中多种有效成分的转移情况，质量难于控制。馨葫皂巧、原馨葫皂巧和伪 原馨葫皂巧属于酱体皂巧，其紫外吸收属于末端吸收，紫外检测条件下色谱峰基线波动很 大，溶剂峰对目标峰造成很大的干扰，由于中药复方制剂的复杂性，采用二极管阵列检测器 值AD)检测方法无法使目标峰与杂质峰达到基线分离。而异嗦皮晚、紫了香巧和绿原酸由于 其结构不具有选择性，采用蒸发光散射检测器巧LSD)无法有效分离，且响应很小。 目前将酱体皂巧类化合物与有机酸和黄酬类同时进行定量测定未见文献报道。本 方法将双波长DAD检测和化SD检测串联使用，将由穿山龙和刺五加为药材的中药复方制剂 预处理制成待测样品，待测样品注入高效液相色谱仪进行检测，获得待测样品的高效液相 色谱图；根据待测样品和各个对照品的高效液相色谱图中相应吸收峰的峰面积，W外标法 计算待测样品中馨葫皂巧、伪原馨葫皂巧、原馨葫皂巧、绿原酸、紫了香巧和异嗦皮晚的含 量。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供由穿山龙和刺五加为药材的中药复方制剂中6个化学成分 的定量分析方法。 本专利技术的技术方案概述如下： ，包括 如下步骤： (1)配制混合对照品溶液；取馨葫皂巧、伪原馨葫皂巧、原馨葫皂巧、绿原酸、紫了 香巧和异嗦皮晚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每ImL含145 y g馨葫皂巧、231 y g伪原 馨葫皂巧、245 y g原馨葫皂巧、81 y g绿原酸、57 y g紫了香巧和95 y g异嗦皮晚的混合对照 品溶液； [000引 （2)配制第一种供试品溶液；取由穿山龙和刺五加为药材的中药复方制剂，研细， 过四号筛，取约1. Og，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积浓度为70%?90%的甲醇 水溶液10血，称定重量，在功率120W、频率40曲Z的条件下超声处理50-60min，放冷至室温， 再称定重量，用体积浓度为70%?90%的的甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续 滤液，即得； (3)含量测定；分别取步骤（1)获得的混合对照品溶液和步骤（2)获得的第一种 供试品溶液在高效液相色谱检测条件为；Ci8键合娃胶为填充剂的色谱柱，W己膳和体积浓 度为0. 1%?0. 5%的甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，检测器为二极管阵列检测器与 蒸发光散射检测器联用进行高效液相色谱检测，获得混合对照品溶液和第一种供试品溶液 的高效液相色谱图，W外标法计算供试品中伪原馨葫皂巧、原馨葫皂巧、绿原酸、紫了香巧 和异嗦皮晚的含量；另取步骤（2)获得的第一种供试品溶液，用体积浓度为70%?90%的 甲醇水溶液稀释10倍，在高效液相色谱检测条件为；Ci8键合娃胶为填充剂的色谱柱，W己 膳和体积浓度为0. 1%?0. 5%的甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，检测器为蒸发光散 射检测器进行高效液相色谱检测，获得第二种供试品溶液的高效液相色谱图，W外标法计 算供试品中馨葫皂巧的含量；所述己膳用A表示，所述体积浓度为0. 1%?0. 5%的甲酸水 溶液用B表示。 所述制剂优选为胶囊剂、片剂或颗粒剂。 所述甲醇水溶液的体积浓度优选为85 %。 所述甲酸溶液的体积浓度优选为0. 1%。 .步骤（3)中梯度洗脱的条件优选为0-10min，12%-15%A ;10-20min，15%-25% A;20-30min，25 % -30 % A;30-50min，30 % -40 % A;50-55min，40 % -55 % A ;55-60min， 55% A ;60-64min，55% -60% A。 步骤（3)中色谱柱的填充剂的粒径优选为5 ym。 步骤（3)中流动相的流速优选为1. OmL/min。 步骤（3)中色谱柱的柱温优选为26 °C。 步骤（3)中二极管阵列检测器的检测波长优选为；紫了香巧254nm，异嗦皮晚和绿 原酸350nm。 [001引步骤做中蒸发光散射检测器检测条件优选为：载气流速1.化/min、蒸气温度为 100°C、雾化温度为40°C。 本专利技术的方法同时测定由穿山龙和刺五加为药材的中药复方制剂中馨葫皂巧、伪 原馨葫皂巧、原馨葫皂巧含量、绿原酸、紫了香巧和异嗦皮晚六种成分含量，可W提高中药 复方制剂的质量控制水平。该方法含量测定方法学验证完全符合要求，本专利技术的方法操作 简便快速，准确度高、重复性好，可W提高产品的质控水平，能节约检测时间和检测成本。 【专利附图】【附图说明】 图1是馨葫皂巧对照品浓度对数与峰面积响应值对数线性关系图； 图2是原馨葫皂巧对照品浓度对数与峰面积响应值对数线性关系图； 图3是伪原馨葫皂巧对照品浓度对数与峰面积响应值对数线性关系图； 图4是紫了香巧对照品浓度与峰面积响应值线性关系图； 图5是绿原酸对照品浓度与峰面积响应值线性关系图； 图6是异嗦皮晚对照品浓度与峰面积响应值线性关系图； 图7是混合对照品溶液的HPLC色谱图，峰a为紫了香巧，峰b为绿原酸，峰C为异 嗦皮晚，峰d为原馨葫皂巧，峰e为伪原馨葫皂巧，峰f为馨葫皂巧； 图8是方法学验证中专属性考察缺穿山龙阴性对照溶液色谱图，峰a为紫了香巧， 峰b为绿原酸，峰c为异嗦皮晚； [002引图9是方法学验证中专属性考察缺刺五加阴性对照溶液色谱图，峰d为原馨葫皂 巧，峰e为伪原馨葫皂巧，峰f为馨葫皂巧； 图10是供试品溶液的HPLC色谱图，峰a为紫了香巧，峰b为绿原酸，峰C为异嗦 皮晚，峰d为原馨葫皂巧，峰e为伪原馨葫皂巧，峰f为馨葫皂巧； 【具体实施方式】 由穿山龙和刺五加为药材的中药复方制剂，按质量比为1. 5:1的比例称取穿山龙 和刺五加，其中的穿山龙是经水提醇沉后获得的提取物，刺五加用75%己醇溶液回流提取 后获得提取物，两种提取物合并后浓缩干燥成干浸膏，按干浸膏与药用辅料（磯酸氨巧、硬 脂酸儀等）的质量比为10:1的比例按常规技术制备成胶囊剂、片剂或颗粒剂。 本专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
由穿山龙和刺五加为药材的中药复方制剂中6个化学成分的定量分析方法,其特征是包括如下步骤：(1)配制混合对照品溶液：取薯蓣皂苷、伪原薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷、绿原酸、紫丁香苷和异嗪皮啶对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含145μg薯蓣皂苷、231μg伪原薯蓣皂苷、245μg原薯蓣皂苷、81μg绿原酸、57μg紫丁香苷和95μg异嗪皮啶的混合对照品溶液；(2)配制第一种供试品溶液：取由穿山龙和刺五加为药材的中药复方制剂，研细，过四号筛，取约1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积浓度为70％～90％的甲醇水溶液10mL，称定重量，在功率120W、频率40kHz的条件下超声处理50‑60min，放冷至室温，再称定重量，用体积浓度为70％～90％的的甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；(3)含量测定：分别取步骤(1)获得的混合对照品溶液和步骤(2)获得的第一种供试品溶液在高效液相色谱检测条件为：C18键合硅胶为填充剂的色谱柱，以乙腈和体积浓度为0.1％～0.5％的甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，检测器为二极管阵列检测器与蒸发光散射检测器联用进行高效液相色谱检测，获得混合对照品溶液和第一种供试品溶液的高效液相色谱图，以外标法计算供试品中伪原薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷、绿原酸、紫丁香苷和异嗪皮啶的含量；另取步骤(2)获得的第一种供试品溶液，用体积浓度为70％～90％的甲醇水溶液稀释10倍，在高效液相色谱检测条件为：C18键合硅胶为填充剂的色谱柱，以乙腈和体积浓度为0.1％～0.5％的甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，检测器为蒸发光散射检测器进行高效液相色谱检测，获得第二种供试品溶液的高效液相色谱图，以外标法计算供试品中薯蓣皂苷的含量；所述乙腈用A表示，所述体积浓度为0.1％～0.5％的甲酸水溶液用B表示。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋建兰，任为之，孙秀婷，王顺仙，
申请(专利权)人：天津大学，天津世纪天龙药业有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12