降解苯嗪草酮的红球菌菌株及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种降解苯嗪草酮的红球菌菌株及其应用，该菌株命名为红球菌(Rhodococcus sp.)MET，保藏编号为CCTCC No.M2014116，保藏日期为2014年4月7日，保藏于中国武汉市武汉大学的中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)。本发明专利技术菌株能够快速、高效地降解苯嗪草酮，可有效防治土壤和水体中苯嗪草酮的污染。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及环境微生物领域，尤其涉及一种降解苯嗪草酮的红球菌菌株及其应用。
技术介绍
苯嗪草酮，化学名称为4-氨基-4，5-二氢-3-甲基-6-苯基-1，2，4-三嗪-5酮，分子式为C10H10N4O，分子量为202.2。苯嗪草酮的外观为淡黄色至白色晶状固体；熔点为166℃；蒸汽压(20℃)：86nPa；溶解度(25℃)：水中1.7g/L，环己酮中10-50g/kg，二氯甲烷中20-50g/L，己烷中＜100mg/L，异丙醇中5-10g/L，甲苯中2-5g/L；主要用于制备除草剂。苯嗪草酮属三嗪酮类选择性芽前除草剂，经植物根部吸收，木质部转导输送至叶子内。通过与QB结合位点结合，同时接收QA传递的电子，阻止光合系统II中的电子从初级醌类QA向次级醌类QB传递，导致植物ATP合成和固碳作用受到抑制，从而起到除草的作用。苯嗪草酮主要用于防除甜菜田一年生杂草，并可有效防除黎、反枝苋、香薷、苦荞麦、蓼等杂草。在推荐剂量下，苯嗪草酮对于甜菜是安全的，持效期在60天左右，一般对后茬作物无明显影响。但是，当苯嗪草酮采用倍量使用时，苯嗪草酮可影响甜菜的出苗率，并产生一定程度的药害。药害的程度与土壤类型有关，施药剂量较大或遇大雨或灌溉等情况时，易发生淋溶药害，因此，在喷施含苯嗪草酮的除草剂时，需严格控制施药剂量。随着除草剂使用量的逐渐大，农田大量频繁施用除草剂后，除草剂容易随着地表径流、淋溶、沉降等途径进入到地表水和地下水中，这不仅对水生态系统构成了一定威胁，而且除草剂在土壤中易长期积累，对后茬农作物产生药害，对土壤生态健康和农产品安全也构成了潜在危害。目前，关于降解除草剂菌株的筛选和相关研究已有较多报道，例如：申请号为201210342762.0的专利技术专利申请文献公开了一种降解除草剂氰氟草酯的细菌Aquamcrobium Lusatiense JW-1，该菌株能够降解土壤和水体中的除草剂氰氟草酯。但是，对于处理和降解土壤和水体中三嗪酮类选择性芽前除草剂的研究还鲜有报道，因此，有必要筛选一种能够降解和处理三嗪酮类除草剂的菌株。
技术实现思路
本专利技术提供了一种降解苯嗪草酮的红球菌菌株及其应用，该菌株能够快速、高效地降解苯嗪草酮。一种红球菌菌株，其特征在于，命名为红球菌(Rhodococcus sp.)MET，保藏编号为CCTCC No.M 2014116，保藏日期为2014年4月7日，保藏于中国武汉市武汉大学的中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)。所述红球菌(Rhodococcus sp.)MET的16S rDNA序列的Genbank登录号为NC012490。所述红球菌(Rhodococcus sp.)MET的生物学特征为：生长初期菌落圆形透明，边缘整齐，表面隆起，生长后期菌落浅橙黄色，光滑湿润，革兰氏反应呈阳性，菌体杆状，无鞭毛，无芽孢，菌体长1.2μm～2.5μm、宽0.7μm～1.0μm。本专利技术还提供了一种所述的红球菌菌株的菌剂，该菌剂的制备方法为将上述菌剂与常规附加剂混合均匀后制成水剂。上述菌种可应用于土壤和水体中苯嗪草酮污染的防治。本专利技术提供了一种降解苯嗪草酮的红球菌菌株，该菌株能够快速、高效地降解苯嗪草酮，可有效防治土壤和水体中苯嗪草酮的污染。附图说明图1为本专利技术降解苯嗪草酮的红球菌菌株的透射电镜图。图2为本专利技术降解苯嗪草酮的红球菌菌株对不同浓度苯嗪草酮的降解曲线；CK为不接种红球菌(Rhodococcus sp.)MET的对照；Treatment为接种红球菌(Rhodococcus sp.)MET的处理。图3为本专利技术降解苯嗪草酮的红球菌菌株在不同pH下对苯嗪草酮的降解曲线；Control为不接种红球菌(Rhodococcus sp.)MET的对照；Inoculation为接种红球菌(Rhodococcus sp.)MET的处理。图4为本专利技术降解苯嗪草酮的红球菌菌株在不同温度下对苯嗪草酮的降解曲线；Control为不接种红球菌(Rhodococcus sp.)MET的对照；Inoculation为接种红球菌(Rhodococcus sp.)MET的处理。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步阐释。下列实施例中采用的培养基如下：无机盐培养基：MgSO4·7H2O 0.2g；K2HPO4 1.5g；KH2PO4 0.5g；(NH4)2SO4 1.5g；NaCl 0.5g；蒸馏水1000mL，pH 7.0；高压蒸汽灭菌(121℃，20min)；普通培养基：牛肉膏10g；蛋白胨5.0g；氯化钠10.0g；琼脂20.0g；去离子水1000mL，pH 7.0，高压蒸汽灭菌(121℃，20min)；分离纯化培养基：在无机盐培养基中添加20g琼脂，高压蒸汽灭菌(121℃，20min)。实施例1 菌种的分离和鉴定一、菌种的分离、纯化(1)从安徽中山化工有限公司农药生产厂废水曝气池取活性污泥共3份，各称取5g置于100mL三角瓶中，加50mL无机盐培养基和5mg苯嗪草酮，置于摇床中振荡培养(30℃，150rpm)，隔5d加5mg苯嗪草酮，同样条件下培养3次；(2)取0.5mL培养液接种于50mL含50mg/L苯嗪草酮和1/10LB的无机盐培养基中，置于摇床中振荡培养(30℃，150rpm)5d。每次培养均取前一次的培养液0.5mL作为接种液，并将苯嗪草酮的浓度依次增加至100mg/L、200mg/L、400mg/L，LB浓度依次减小为1/20、1/100、1/500；(3)将培养液稀释10-2后，用平板划线法分离筛选，挑取单菌落接种于含有50mg/L苯嗪草酮的无机盐培养基中，置于摇床中振荡培养(30℃，150rpm)，观察菌的生长并测定苯嗪草酮的降解情况。选取能在含苯嗪草酮的无机盐培养基中生长并能快速降解苯嗪草酮的单菌落进行鉴定。菌种保存于含50mg/L苯嗪草酮的普通斜面培养基上。将该菌种命名为MET。二、菌种的鉴定将分离株MET置于普通培养基上30℃培养3d，分离株MET的透射电镜图如图1所示。该菌株的主要形态及生物学特征为：初期菌落圆形透明，边缘整齐，表面隆起，后期菌落浅橙黄色，光滑湿润。革兰氏反应阳性，菌体杆状，无鞭毛，无芽孢，大小约为(0.7μm～1.0μm)×(1.2μm～2.5μm)。该菌最适生长条件为pH＝7.0，温度30℃。分离株MET的生理生化特征如下表1所示。表1项目结果项目结果项目...

【技术保护点】
一种红球菌菌株，其特征在于，命名为红球菌(Rhodococcus sp.)MET，保藏编号为CCTCC No.M 2014116，保藏日期为2014年4月7日。

【技术特征摘要】
1.一种红球菌菌株，其特征在于，命名为红球菌(Rhodococcus sp.)MET，保藏编号为
CCTCC No.M 2014116，保藏日期为2014年4月7日。
2.如权利要求1所述的红球菌菌株，其特征在于，所述红球菌(Rhodococcus sp.)MET
的生物学特征为：菌落生长初期呈圆形透明，边缘整齐，表面隆起，菌落生长后期呈浅橙黄
色，光滑湿润，菌体杆状，无鞭毛，无芽孢，菌体长1.2μm～2.5μm、宽0.7μm～...

【专利技术属性】
技术研发人员：虞云龙，许天衡，程龙吟，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33