本发明专利技术提供一株新分离的屎肠球菌(Enterococcus faecium)HEW‑A588，该菌具有显著的益生性以及抗逆性，由其制备的微生态制剂进入动物肠道，迅速活化、增殖，并能够形成有益优势菌群，维持肠道平衡，不但可以提高动物的饲料利用效率，节约成本，而且改善了动物体内消化道内环境的稳态，促进营养的吸收利用，促进动物生长，提高经济效益等功效，有着良好的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物学领域，具体地说，涉及一株屎肠球菌HEW-A588及其应用。
技术介绍
屎肠球菌（Enterococcus faecium)，是人和动物肠道中的正常菌群，其生长繁殖 速度快，为革兰氏阳性链球或球菌，多成对或短链状排列，通常不运动，无芽孢；其菌落呈圆 形、乳白色，表面凸起，边缘整齐，湿润光泽。屎肠球菌可以产乳酸和抑菌物质，能够抑制肠 道中致病菌及腐败菌的繁殖，降低腹泻率和死亡率，同时还可促进动物的消化吸收，改善肠 道内微生态平衡，提高采食量及饲料转化率，提高免疫力并保障动物健康。屎肠球菌能够附 着于肠道粘膜上并形成生物薄膜，抵御外界病原菌的入侵。 屎肠球菌是一种兼性厌氧乳酸菌，它还可用于改善食品、饲料的品质。相对于严格 厌氧、培养保存条件苛刻的双歧杆菌、乳杆菌来说，屎肠球菌更便于生产和使用。大量研宄 表明，直接饲喂含有屎肠球菌的微生态制剂可提高畜禽的体增重，提高饲料利用率，降低腹 泻率及死亡率。因此，屎肠球菌在畜牧生产中有广泛的应用前景。但大多益生菌对饲料加 工中的制粒工艺的高温、运输及胃肠液和胆汁的耐受性较差，进入肠道的活乳酸菌的种类 和数量不多，因此筛选获得耐高温、耐胃肠液和胆汁的乳酸菌可以解决这一系列的问题。 乳酸菌的来源很多，可购买工业菌株和标准菌株，也可以从自然环境、土壤、酸奶、 泡菜等分离乳酸菌。然而益生菌最终是要饲喂动物，因此相对其他来源的菌株，动物无疑是 最好的来源。来源于动物肠道的乳酸菌能够适应动物肠道环境，耐受胃酸和胆盐的消化。因 此，从动物肠道分离和筛选的乳酸菌将是动物用益生菌筛选的重要研宄方向。 现有的屎肠球菌耐热性、耐酸碱性、抑菌性能及发酵性能等都不理想，不能适应日 益发展的工业化需求，尤其离目前饲料工业及畜牧养殖业目标还有一定差距，因此，分离、 纯化更加适合畜牧业发展需求的益生屎肠球菌菌株成为亟待解决的技术问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一株抗逆性和益生性强的屎肠球菌HEW-A588及其应用。 本专利技术的另一目的是提供由屎肠球菌HEW-A588制备的微生态制剂及动物饲料。 为了实现本专利技术目的，本专利技术提供的屎肠球菌（Enterococcus faeciums) HEW-A588是从健康仔猪直肠内容物中分离获得乳酸菌，经过菌落形态观察、产酸及抑菌性 能测试等获得目标菌株，该菌株耐性强、抗逆性和益生性更显著。现已保藏于中国微生物菌 种保藏管理委员会普通微生物中心（简称CGMCC)，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号， 中国科学院微生物研宄所，邮编100101，保藏编号CGMCC No. 10547,保藏日期2015年2月 9曰。 菌株HEW-A588具有以下微生物学特征：革兰氏阳性菌，在MRS培养基上生长迅 速，37°C培养24h形成乳白色、圆形、表面光滑湿润、凸起、边缘整齐、直径约Imm左右，菌落 形态见图1，油镜下观察其菌体呈球形、成对成链或聚团排列、无芽孢，兼性厌氧生长；菌株 HEW-A588生长温度范围：4°C -65°C，最适生长温度：20°C -45°C ;生长适宜pH I. 5-11，最适 pH值为6-8。部分生理生化特性见表1。 表1屎肠球菌HEW-A588部分生理生化特性【主权项】1?屎肠球菌（Enterococcus faecium)HEW-A588,其保藏编号为 CGMCC No. 10547。2. 由权利要求1所述屎肠球菌HEW-A588制备的微生态制剂。3. 权利要求2所述微生态制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 1) 发酵培养：将屎肠球菌HEW-A588的种子液接种于发酵培养基中发酵培养得到发酵 液； 2) 发酵液经离心获得菌泥，然后经混合、制粒，包被，即得屎肠球菌HEW-A588微生态制 剂。4. 根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中用于制备种子液的 摇瓶培养基成分为：蔗糖1-5%，葡萄糖0.5-1. 5%，蛋白胨1-3%，酵母膏0.5-2. 0%， MgSO4 ? 7H200. 1-0. 5%，MnSO4 ? 4H200. 01-0. 05%，NaClO. 5-2. 0%，柠檬酸二铵 0? 1-0. 5%， CaCO30.0 5-1. 0 %，余量为水，pH7. 0±0. 4 ;摇瓶培养条件为：pH6. 3-7. 8,28-45°C，转速 100-300r/m 培养 5-24h。5. 根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中用于制备种子液的摇瓶培 养基成分为：蔗糖1.5%，葡萄糖0.5%，蛋白胨1.6%，酵母膏0.8%，MgSO 4 ? 7H200. 3%， MnSO4.4400. 02%，NaClO. 5%，柠檬酸二铵 0? 1%，CaCO30.0 5%，余量为水，pH6. 8±0. 2 ;摇 瓶培养条件为：pH6. 8, 37°C，转速150r/m培养6. 5h。6. 根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中发酵培养基成分为：绵 白糖0. 5-1. 0 %，柠檬酸钠0. 5-1. 5%，酵母膏1. 0-2. 0%，氯化镁0. 04-0. 08%，氯化钠 0? 05-0. 3%，硫酸锰 0? 01-0. 05%，磷酸氢二钾 0? 05-0. 2%，柠檬酸铁铵 0-0? 008%，吐 温-800.05-0.15%，余量为水，？117.0±0.2;发酵条件为：装液量为20-401培养基，接种 量为 100-300mL 种子液，pH6. 3-7. 8, 28-45°C，转速 100-300r/min 发酵 4-24h，得二级种子 液；将二级种子液转接到2 X IO4L发酵罐中，装液量70%，然后pH6. 3-7. 8, 28-45°C，转速 100-200r/min，发酵 10-14h。7. 根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，发酵条件为：装液量为20L培养基， 接种量为l〇〇mL，pH6. 8, 37°C，转速120r/min发酵10h，得二级种子液；将二级种子液转接到 2 X IO4L发酵罐中，装液量70%，然后pH6. 8, 37°C，转速120r/min发酵10h。8. 权利要求1所述屎肠球菌HEW-A588、权利要求2所述微生态制剂在制备动物饲料中 的应用。9. 含有权利要求1所述屎肠球菌HEW-A588、权利要求2所述微生态制剂的动物饲料。【专利摘要】本专利技术提供一株新分离的屎肠球菌(Enterococcus faecium)HEW-A588，该菌具有显著的益生性以及抗逆性，由其制备的微生态制剂进入动物肠道，迅速活化、增殖，并能够形成有益优势菌群，维持肠道平衡，不但可以提高动物的饲料利用效率，节约成本，而且改善了动物体内消化道内环境的稳态，促进营养的吸收利用，促进动物生长，提高经济效益等功效，有着良好的应用前景。CGMCC No.1054720150209【IPC分类】C12R1-46, C12N1-20, A23K1-16【公开号】CN104862254【申请号】CN201510275127【专利技术人】李雪平 【申请人】北京好实沃生物技术有限公司【公开日】2015年8月26日【申请日】2015年5月26日本文档来自技高网...
【技术保护点】
屎肠球菌(Enterococcus faecium)HEW‑A588，其保藏编号为CGMCC No.10547。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李雪平，
申请(专利权)人：北京好实沃生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11
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