本发明专利技术公开了一种用于痰液标本的星状诺卡氏菌选择培养基。属于检验微生物培养领域，其特征在于，配制1000ml培养基的配方中含有：牛肝粉、麦芽浸粉、酵母浸出粉、氯化钠、琼脂、卟啉铁、乳酸钙、萘啶酮酸、毛子草酮、维生素K1、无菌脱纤维绵羊血，蒸馏水加至1000ml。本发明专利技术与现有技术相比较，具有检出可靠，星状诺卡氏菌分离率高的特点。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及检验微生物培养领域，具体涉及一种用于痰液标本的星状诺卡氏菌选 择培养基。
技术介绍
微生物培养是一种用人工方法使微生物生长繁殖的技术，而选择性培养基是用来 促进或抑制一定类型的生物体(如细胞或细菌等）而设计的培养基，利用这种培养基可以将 所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。星状诺卡氏菌（Actinomyces印pingeri)是 需氧土壤腐生菌，属于放线菌的一种，是条件致病菌，该菌广泛存在于空气、尘埃、土壤和家 畜体表，通过呼吸系统引起发病，也可经皮肤伤口或外伤创面侵入，引起人的诺卡氏菌病， 星状诺卡菌主要通过呼吸道引起人的原发性、化脓性肺部感染，可出现肺结核的症状。肺部 病灶可转移到皮下组织，形成脓肿、溃疡和多发性瘘管，也可扩散到其他器官。临床症状上 与肺结核、肺曲菌病、肺韦格氏肉芽肿相似，很容易误诊。 近年来，星状诺卡氏菌病已不罕见，在有或无免疫异常的人群中均可发生。早期诊 断并早期治疗，可100%治愈。若诊断延误，病死率可达30~50%，因此作为确诊唯一依据的临 床细菌检查的正确与快速鉴定极为重要。目前，该菌属的鉴定金标准为PCR鉴定，但是PCR 检测设备要求和操作成本均较高，因此临床培养多用普通血琼脂培养板（BAP)培养。而星 状诺卡氏菌属于苛养菌，即对生长环境、营养要求较苛刻的细菌，在普通环境中不能或难以 生长。星状诺卡氏菌生长缓慢，而痰液标本中金黄色葡萄球菌、肺炎球链菌、其他放线菌等 病原菌在目前的培养基上比星状诺卡氏菌生长更快，很快就覆盖了培养基，星状诺卡菌无 法生长，阳性率低，使用传统方法需要96小时方可有阳性表现，1周左右方能较准确地做出 鉴定，结果延误时间，造成多处病灶转移，如转移至脑部极易造成死亡。
技术实现思路
本专利技术的技术任务是针对以上现有技术的不足，提供一种适合于痰液标本星状诺 卡氏菌生长的选择培养基。 本专利技术解决其技术问题的技术方案是：一种用于痰液标本的星状诺卡氏菌选择培 养基，其特征在，配制1000ml培养基的配方中含有： 牛肝粉5. 0~15. 0g ; 麦芽浸粉2. 0~5. 0g ; 酵母浸出粉5. 0~10. 0g ; 氯化钠5. 0g ; 琼脂 15. 0 ~20. 0g ; 卟啉铁〇. 01~〇. 〇5g ; 乳酸钙0. 01~0. 05g ; 萘啶酮酸0. 01~0. 05g ; 毛子草酮〇? 001~〇? 〇〇5g ; 维生素I 0.01~0? lg ; 无菌脱纤维绵羊血80~100ml ; 蒸馏水加至l〇〇〇ml。 上述培养基的制备方法为：称取牛肝粉；麦芽浸粉；酵母浸出粉；氯化钠；琼脂； 乳酸钙；毛子草酮混匀蒸馏水溶解，210°C，灭菌15min，冷却到45°C，加入灭菌卟啉铁；灭菌 萘啶酮酸；灭菌维生素K1;无菌脱纤维绵羊血混匀，灭菌蒸馏水定容到1000ml后分装。 优化方案中，每1000ml培养基还含有酪蛋白磷酸肽0. 1~0. 5g。 优化方案中，每1000ml培养基还含有天冬酰胺0.01~0.lg。 优化方案中，每1000ml培养基还含有浓度200g/L的生地黄水煮液200~300ml。 上述优化方案的培养基的制备方法，其特征在于包括以下步骤： (1) 取生生地黄加水煮沸30-60min，过滤，取滤液，调整体积到浓度为200g/L，得生地 黄水煮液； (2) 称取牛肝粉；麦芽浸粉；酵母浸出粉；氯化钠；琼脂；乳酸钙；毛子草酮；天冬酰胺 混匀溶于步骤（1)所得的生地黄提取液中混匀，210°C灭菌15min，冷却到45°C，加入灭菌卟 啉铁；灭菌萘啶酮酸；灭菌络蛋白磷酸肽；灭菌维生素K 1;无菌脱纤维绵羊血混匀，灭菌蒸 馏水定容到l〇〇〇ml后分装。 其中：所述的牛肝粉、麦芽浸粉提供碳源、氮源，酵母浸出粉富含蛋白质、氨基酸、 多肽、核苷酸、维生素、生长因子、微量元素等营养成分，为微生物提供均衡营养，这些物质 对促进星状诺卡氏菌的繁殖和生长都是很重要的因素；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂为 培养基的凝固剂；卟啉铁为营养剂，为星状诺卡氏菌繁殖生长提供必需的铁元素；乳酸钙 除了做营养增强剂外，还可以抑制革兰氏阳性菌生长；萘啶酮酸抑制革兰氏阴性菌的生长； 毛子草酮（2-Ethoxymethylene_3, 5-dihydroxy-y-pyrone)，实验室研宄表明毛子草酮可以 抑制金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎双球菌、卡他球菌、白喉杆菌、变 形杆菌、肠炎杆菌等杂菌的生长，但该浓度下由于对诺卡氏菌属无抗菌抑菌作用，因此提高 了星状诺卡氏菌的分离率。通过实验将同一星状诺卡氏菌接种到2个BAP培养基上，其中 一个BAP培养基添加0. 1%灭菌维生素匕于37°C下培养，48小时后观察菌株，发现添加维生 素匕的BAP培养基有小的星状诺卡氏菌菌落，没有添加维生素k :的BAP培养基未发现星状 诺卡氏菌菌落，维生素匕促进细胞生长、分化，是星状诺卡氏菌的生长因子；无菌脱纤维绵 羊血提供能量环境；酪蛋白磷酸肽为激活剂，可以促进星状诺卡氏菌对铁元素、钙元素的摄 取；天冬酰胺为营养强化剂，促进星状诺卡氏菌对氨基酸的摄取；生地黄为玄参科植物生 地黄的新鲜或干燥块根，现代医学研宄表明，生地黄根茎中含有20多种苷类；8种糖类；20 余种氨基酸和20余种无机元素，生地黄水提液是良好的营养强化剂，并且有抑制金黄色葡 萄球菌生长的作用。 本专利技术与现有技术相比较，具有检出可靠、星状诺卡氏菌分离率高的特点。【具体实施方式】 以下结合实际情况，对本专利技术的【具体实施方式】作详细说明。 实施例1，配制1000ml培养基的配方中含有：牛肝粉15. 0g ;麦芽浸粉2. 0g ;酵母 浸出粉5. Og ;氯化钠5. Og ;琼脂15. Og ;卟啉铁0.0 lg ;乳酸钙0. 05g ;萘啶酮酸0. 05g ;毛子 草酮0.0 Olg ;维生素& 0. lg ;无菌脱纤维绵羊血100ml ;蒸馏水加至1000ml。制备方法称取 牛肝粉；麦芽浸粉；酵母浸出粉；氯化钠；琼脂；乳酸钙；毛子草酮混匀蒸馏水溶解，210°C， 灭菌15min，冷却到45°C，加入灭菌卟啉铁；灭菌萘啶酮酸；灭菌维生素K 1;无菌脱纤维绵羊 血混匀，灭菌蒸馏水定容到l〇〇〇ml后分装。 实施例2,配制1000ml培养基的配方中含有：牛肝粉10. 0g ;麦芽浸粉5. 0g ;酵母 浸出粉8. 0g ;氯化钠5. 0g ;琼脂15. 0g ;卟啉铁0.0 lg ;乳酸钙0. 03g ;萘啶酮酸0. 03g ;毛子 草酮0. 003g ;维生素& 0.0 lg ;络蛋白磷酸肽0. lg ;无菌脱纤维绵羊血80ml ;蒸馏水加至 1000ml。制备方法称取牛肝粉；麦芽浸粉；酵母浸出粉；氯化钠；琼脂；乳酸钙；毛子草酮混 匀，蒸馏水溶解，210°C，灭菌15min，冷却到45°C，加入灭菌卟啉铁；灭菌萘啶酮酸；灭菌维 生素k 1;灭菌络蛋白磷酸肽；无菌脱纤维绵羊血混匀，灭菌蒸馏水定容到1000ml后分装。 实施例3,配制1000ml培养基的配方中含有：牛肝粉15. 0g ;麦芽浸粉3. 0g ;酵母 浸出粉10.〇g ;氯化钠5. 0g ;琼脂20. 0g ;卟啉铁0. 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于痰液标本的星状诺卡氏菌选择培养基，其特征在于配制1000ml培养基的配方中含有：牛肝粉5.0～15.0g；麦芽浸粉2.0～5.0g；酵母浸出粉5.0～10.0g；氯化钠5.0g；琼脂15.0～20.0g ；卟啉铁0.01～0.05g；乳酸钙0.01～0.05g；萘啶酮酸0.01～0.05g；毛子草酮0.001～0.005g；维生素K1 0.01～0.1g；无菌脱纤维绵羊血80～100ml；蒸馏水加至1000ml。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：康丛霞，
申请(专利权)人：康丛霞，
类型：发明
国别省市：山东;37
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