一种从蛇床子中分离纯化蛇床子素和欧前胡素的方法技术

本发明专利技术属于化工与制药领域，涉及一种从蛇床子提取物中分离纯化蛇床子素和欧前胡素的方法。蛇床子药材粉碎，加入无水乙醇冷浸提取，将提取液过滤、减压浓缩得浸膏，将浸膏分散于水中,用石油醚萃取。合并石油醚层，减压蒸馏得蛇床子浸膏。将蛇床子浸膏用甲醇溶解，经过滤后，进行超临界流体色谱分离，色谱柱为C18色谱柱，流动相为超临界流体，改进剂为甲醇。本发明专利技术纯化过程中使用超临界二氧化碳，不使用对环境有危害的有机溶剂，生产过程绿色环保，所得产品无有害物质残留。

【技术实现步骤摘要】
一种从蛇床子中分离纯化蛇床子素和欧前胡素的方法
本专利技术属于化工与制药领域，具体是涉及一种从蛇床子提取物中分离纯化蛇床子素和欧前胡素的方法。
技术介绍
蛇床子为伞形科蛇床属植物蛇床cnidiummonnieri(L.)Guss.的干燥成熟果实，其所含的香豆素类成分具有抗心率失常、抗骨质疏松、抗爱滋病、抗真菌、抗病毒、抗肿瘤及抗诱变等重要作用。目前，对蛇床子中香豆素类成分的分离纯化主要采用硅胶柱层析法或高速逆流色谱法。硅胶柱层析法虽然工艺成熟，但操作繁琐，高速逆流色谱法中溶剂体系的选择较困难，分离规模难以扩大。此外，硅胶柱层析法和高速逆流色谱法两种方法均需要消耗大量的有机溶剂，有机溶剂回收成本高，回收再利用较困难，产品中有机试剂残留严重。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足，提供一种操作简便、分离量大、综合成本低、绿色环保的快速纯化制备蛇床子素和欧前胡素的方法，通过一步分离纯化即可从蛇床子提取物中得到高纯度蛇床子素和欧前胡素单体化合物。本专利技术的方案如下：一种从蛇床子中分离纯化蛇床子素和欧前胡素的方法，步骤为：步骤1：蛇床子药材粉碎，加入无水乙醇冷浸提取，将提取液过滤、减压浓缩得浸膏，将浸膏分散于水中,用石油醚萃取。合并石油醚层，减压蒸馏得蛇床子浸膏。步骤2：将蛇床子浸膏用甲醇溶解，经过滤后，进行超临界流体色谱分离，色谱柱为C18色谱柱，流动相为超临界流体，改进剂为甲醇。分离过程由紫外检测器检测，根据检测信号收集目标组分馏分。前面所述的方法，优选的方案是，步骤1中无水乙醇冷浸提取乙醇与药材的比例是3：1～10：1，最优为5：1；提取的次数为3次，冷浸时间为8-24小时。前面所述的方法，优选的方案是，步骤1中将浸膏分散于水中，水与浸膏的比例为100：1～10：1，最优为50：1。前面所述的方法，优选的方案是，步骤1中用石油醚萃取，石油醚与水相的比例为1：1，萃取次数为3次。前面所述的方法，优选的方案是，步骤2中过滤所用滤膜为0.45μm滤膜。前面所述的方法，优选的方案是，步骤2中超临界流体为超临界二氧化碳，超临界二氧化碳的压力为10~20MPa，最优为15MPa；超临界二氧化碳的流速为1-10倍柱体积/分钟，最优为3倍柱体积/分钟。前面所述的方法，优选的方案是，步骤2中色谱柱温度为35~50°C，最优为40°C。前面所述的方法，优选的方案是，步骤2中改进剂甲醇的比例为0%~10%，最优为0.1%。本专利技术一种从蛇床子提取物中分离纯化蛇床子素和欧前胡素的方法，具有如下优势：（1）所得到的蛇床子提取物中有效成分含量高（从图1可以看出）。（2）不需要像已有技术一样对样品进行多次分离纯化，只需要一个分离步骤即可得到两种高纯度化合物，经过一步分离纯化就可以得到蛇床子素和欧前胡素。（3）纯化过程中使用超临界二氧化碳，不使用对环境有危害的有机溶剂，生产过程绿色环保，所得产品无有害物质残留。（4）二氧化碳回收利用容易，能耗低，生产成本低。（5）方法操作简单，易于自动化控制，效率高，工艺周期短。附图说明图1是实施例1超临界流体色谱图。具体实施方式下面结合实施例和附图详细说明本专利技术的技术方案，但保护范围不被此限制。实施例中所用设备或原材料皆可从市场获得。所用试剂均为分析纯，购自天津试剂四厂，所用二氧化碳为高纯二氧化碳。实施例1称取蛇床子500克，用粉碎机粉碎，放入玻璃容器中，加入2500ml无水乙醇冷浸提取12小时，提取3次，将提取液过滤、减压浓缩得浸膏，将浸膏分散于500ml水中，用500ml石油醚萃取3次。合并石油醚萃取液，减压蒸馏回收石油醚得蛇床子浸膏。将蛇床子浸膏用甲醇溶解，经过滤（所用滤膜为0.45μm滤膜）后，进行超临界流体色谱分离，色谱柱为C18色谱柱，色谱柱温度为40°C。流动相为超临界二氧化碳，流速为3倍柱体积/分钟，压力为15MPa。改进剂为甲醇，其比例为0.1%。分离过程由紫外检测器检测，检测波长为254nm，根据检测信号收集目标组分馏分，分别得到蛇床子素和欧前胡素。图1是实施例1超临界流体色谱图。所得各个组分的纯度很高，均在98%以上。实施例2称取蛇床子500克，用粉碎机粉碎，放入玻璃容器中，加入3000ml无水乙醇冷浸提取24小时，提取3次，将提取液过滤、减压浓缩得浸膏，将浸膏分散于1000ml水中，用1000ml石油醚萃取3次。合并石油醚萃取液，减压蒸馏回收石油醚得蛇床子浸膏。将蛇床子浸膏用甲醇溶解，经过滤后，进行超临界流体色谱分离，色谱柱为C18色谱柱，色谱柱温度为45°C。流动相为超临界二氧化碳，流速为5倍柱体积/分钟，压力为12MPa。改进剂为甲醇，其比例为0.05%。分离过程由紫外检测器检测，检测波长为254nm，根据检测信号收集目标组分馏分，分别得到蛇床子素和欧前胡素。实施例3称取蛇床子500克，用粉碎机粉碎，放入玻璃容器中，加入1500ml无水乙醇冷浸提取16小时，提取3次，将提取液过滤、减压浓缩得浸膏，将浸膏分散于800ml水中，用800ml石油醚萃取3次。合并石油醚萃取液，减压蒸馏回收石油醚得蛇床子浸膏。将蛇床子浸膏用甲醇溶解，经过滤后，进行超临界流体色谱分离，色谱柱为C18色谱柱，色谱柱温度为40°C。流动相为超临界二氧化碳，流速为4倍柱体积/分钟，压力为13MPa。改进剂为甲醇，其比例为0.08%。分离过程由紫外检测器检测，检测波长为254nm，根据检测信号收集目标组分馏分，分别得到蛇床子素和欧前胡素。经HPLC面积归一化法分析测试，实施例1-3所得到的各个组分的纯度很高，均在98%以上。经NMR、MS鉴定，图1中A为蛇床子素，B为欧前胡素，其化学结构如下：本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从蛇床子中分离纯化蛇床子素和欧前胡素的方法，其特征是，步骤为：步骤1：蛇床子药材粉碎，加入无水乙醇冷浸提取，将提取液过滤、减压浓缩得浸膏，将浸膏分散于水中，用石油醚萃取；合并石油醚层，减压蒸馏得蛇床子浸膏；步骤2：将蛇床子浸膏用甲醇溶解，经过滤后，进行超临界流体色谱分离，色谱柱为C18色谱柱，流动相为超临界流体，改进剂为甲醇；分离过程由紫外检测器检测，根据检测信号收集目标组分馏分。

【技术特征摘要】
1.一种从蛇床子中分离纯化蛇床子素和欧前胡素的方法，其特征是，步骤为：步骤1：蛇床子药材粉碎，加入无水乙醇冷浸提取，将提取液过滤、减压浓缩得浸膏，将浸膏分散于水中，水与浸膏的比例为100：1～10：1；用石油醚萃取，石油醚与水相的比例为1：1，萃取次数为3次；合并石油醚层，减压蒸馏得蛇床子浸膏；无水乙醇与药材的比例是5：1；提取的次数为3次，冷浸时间为8-24小时；步骤2：将蛇床子浸膏用甲醇溶解，经过滤后，进行超临界流体色谱分离，色谱柱为C18色谱柱，流动相为超临界流体，改进剂为甲醇；分离过程由紫外检测器检测，根据检测信号收集目标组分馏分；超临界流体为...

【专利技术属性】
技术研发人员：亢静静，孙爱玲，李爱峰，于琳琳，柳仁民，
申请(专利权)人：聊城大学，
类型：发明
国别省市：山东;37