一种富锶发菜细胞及其培养方法技术

本发明专利技术公开了一种富锶发菜细胞及其培养方法，属于食品生物富集技术领域。该富锶发菜细胞由发菜细胞置于富锶培养基中培养获得，富锶培养基中加入氯化锶，并加入FeSO4·7H2O、Na2SiO3等物质，共同作用，促进发菜细胞对锶的吸收，发菜细胞从培养基中吸收的无机锶通过细胞转化为有机锶，从而提高了发菜细胞中锶含量，同时提高发菜细胞的生物量。本发明专利技术富锶发菜细胞的制备方法，采用将发菜浸泡于含有FeSO4·7H2O、Na2SiO3等物质的培养基中培养获得发菜细胞，再将发菜细胞在富锶培养基中培养的方法，提高了发菜细胞中的锶含量，操作简便，过程易于控制，适于工业化推广应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于食品生物富集加工
，具体涉及一种富锶发菜细胞及其制备方 法。
技术介绍
锶是人体组织进行正常生命活动所需的微量元素之一。锶对人体的功能主要是与 骨骼的形成密切相关，是人体骨骼及牙齿的正常组成部分。它与血管的功能及构造有关系， 锶在肠内与钠竞争吸收部位，可减少人体对钠的吸收，增加钠的排泄。体内钠过多，易引起 高血压、心血管疾病，而锶却能减少人体对钠的吸收，有预防疾病的作用。 发菜，又称发状念珠藻，因其色黑而细长，如人的头发而得名，且发菜与"发财"谐 音，千百年来深受人们的喜爱，发菜营养价值丰富，每l〇〇g天然发菜中含蛋白质22. 8g，是 鸡蛋的1. 5倍，脂肪含量低，富含钙、铁、碘、镁、锌、硒、锰等微量元素。近年来，由于发菜过 度的采收已经带来了严重的环境问题，给生态环境和社会稳定造成了极大的危害。目前，从 发菜藻体中分离发菜细胞进行液体悬浮培养逐渐受到人们的重视，发菜细胞培养技术是从 发菜藻体中分离纯化出具有旺盛分裂能力的发菜细胞，通过液体悬浮培养使发菜细胞大量 繁殖，通过再加工处理，实现发菜细胞工厂化生产，培养过程中发菜细胞的生长速率是野生 发菜生长速率的30倍，实现了发菜资源的快速生长繁殖。 锶在发菜细胞中有两种存在形态：其一是锶的离子态形式，其二是与有机物结合 的有机锶形式。离子态锶能够溶解于水，被吸收到细胞内，其中一部分与蛋白质结合进一步 转化成有机锶，这是发菜细胞富集有机锶的前提。而溶于水中的离子态锶，在生产过程中特 别容易流失，导致利用率不高，经济效益不明显。如果长时间摄食高含量离子态锶，不仅造 成浪费，还会出现锶中毒现象；相反，有机锶毒性低，生物活性高，易被人和动物吸收利用， 是安全高效的锶制剂。富集有机锶发菜细胞有生产利用率高、食用安全的特点，有机锶发菜 细胞可用于因缺锶而引起的多种疾病。因此，利用发菜细胞作为载体进行生物富集和转化 无机锶为有机锶是目前具有发展前景的途径。 中国专利CN103976411A公开了一种发菜产品的制造方法，通过在培养基中加入 土壤提取液和锶溶液的方式，促进发菜细胞对锶的吸收，同时起到了防止心血管病，但是该 公开的发菜产品的制备方法培养的发菜细胞中锶含量仍然较低，如何通过调整培养基的组 成成分，提高发菜细胞的锶含量，对锶的富集和发菜细胞的开发利用具有重要的意义。
技术实现思路
为了克服现有技术的缺陷，本专利技术的目的之一在于提供一种生物量高、锶含量高 的发菜细胞。 同时，本专利技术还在于提供一种富锶发菜细胞的培养方法。 为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下： 一种富锶发菜细胞，将发菜细胞置于富锶培养基中培养获得，所述富锶培养基为将 SrCl2添加至基本培养基中混合制得，SrCl 2的浓度为0. 5~4mg/L ;其中每lOOOmL基本培养 基主要由以下质量的原料配制而成：NaN03 2 50mg，MgS04 ? 7H20 75mg，CaCl2 ? 2H20 36mg， H3B04 0? 286mg，MnCl2 ? 4H20 0? 18mg，ZnS04 ? 7H20 0? 02mg，CuS04 ? 5H20 0? 08mg，NaMo04 ? 2H20 0? 04mg，CoC12? 6H20 0? OOlmg，EDTA-Na2 (乙二酸四乙酸二钠）0? lmg，FeS04 ? 7H20 0? 48mg， 柠檬酸 0.06mg，Na2Si03 58mg，K2HP04 40mg，余量为水。 所述富锶培养基中SrClJ^浓度与Na 2Si03的浓度比为（1~8) : 116。 上述富锶发菜细胞的培养方法，包括以下操作： 1) 将干发菜浸泡于基本培养基，均浆后得到发菜细胞接种液； 2) 取步骤1)制备的发菜细胞接种液在固体培养基上划线接种，纯化培养得到发菜细胞 培养物，从中选出纯化的单藻落，备用； 3) 取步骤2)中纯化的单藻落置于基本培养基中扩大培养，得到发菜细胞； 4) 将步骤3)制备的发菜细胞接种在富锶发菜培养基中培养，培养完成后静置过滤分离 出发菜细胞，即得所述的富锶发菜细胞； 其中固体培养基为基本培养基中加入琼脂制备而得。 所述固体培养中基本培养基和琼脂的质量比为100:1. 7。 步骤1)中干发菜浸泡于基本培养基前进行预处理，具体方法为：将干发菜用蒸馏 水清洗干净晾干后消毒，再用水冲洗干净。 所述消毒为采用70%~75%的酒精消毒0. 5~1. Omin。 步骤1)中发菜在基本培养基中浸泡时间为8~llh。 步骤3)中扩大培养至对数生长期即得发菜细胞。 步骤4)中所述培养的培养条件为：温度为25°C;光照周期为12h光照12h黑暗， 光照强度为2000Lux;培养时间为15~20天。 上述富锶发菜细胞的培养方法，还包括将步骤4)中分离出的发菜细胞用水洗涤后 冷冻干燥，冷冻干燥过程中的捕水仓温度为-50~_55°C，时间为12~20h，即得所述的富锶发 菜细胞产品。 所述基本培养基由包括以下操作步骤的方法制备而得： I :原料预溶解： a:取CaCl2、MgS04 ? 7H20,用水溶解，得到溶液A ; b :取 NaMo04 CHW'ZnSC^ .fflW'EDTA-NarFeSC^ .71120、〇1504.5H20、 C〇Cl2 ? 6H20、柠檬酸，用水溶解，得到溶液B ; c :取K2HP04 ? 3H20,用水溶解，得到溶液C ; d :取Na2Si03 ? 9H20,用水溶解，得到溶液D ; II :将溶液A和溶液B混合后灭菌得到溶液E ;将溶液C和溶液D混合后，加入NaN03， 灭菌得溶液F; III :将溶液E和溶液F混合，即得所述的基本培养基。 所述溶液B 4°C冷藏保存备用。 所述溶液A、C、D常温保存备用。 步骤II中所述灭菌为湿热法灭菌，温度为121°C，时间为20min。 所述富锶培养基由以下方法制备而得：取SrCl2用水溶解后，得到SrCl 2母液，将 31~(：12母液灭菌后加入基本培养基中，即得所述的富锶发菜细胞培养基。调整富锶发菜细胞 培养基的pH为7. 5。 有益效果 本专利技术富锶发菜细胞，将发菜细胞置于富锶培养基中培养获得，富锶培养基中加入氯 化锶，并加入FeS04 ? 7H20、Na2Si03等物质，共同作用，促进发菜细胞对锶的吸收，发菜细胞 从培养基中吸收的无机锶通过细胞转化为有机锶，从而提高了发菜细胞中锶含量，同时提 高发菜细胞中的生物量。 本专利技术富锶发菜细胞的制备方法，采用将发菜浸泡于基本培养液中提取接种获得 纯化的发菜细胞单藻落，并通过基本培养基的扩大培养获得发菜细胞，将发菜细胞置于富 锶培养基中培养获得富锶发菜细胞，提高了发菜细胞对培养基中无机锶的吸收，进而提高 了发菜细胞中锶含量，同时提高发菜细胞中的生物量。本专利技术制备方法，操作简便，过程易 于控制，适于工业化推广应用。【具体实施方式】 下面结合具体实施例对本专利技术作进一步详细说明，但不构成对本专利技术的任何限 制。 实施例1 本实施例富锶发菜细胞为将发菜细胞在富锶培养基中培养获得，其中富锶培养基为将 SrCl2添加至基本培养基中混合制得，SrCl 2的浓度为2mg/L ;其中每1000mL基本培养基主 要由以下质量的原本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种富锶发菜细胞，其特征在于，将发菜细胞置于富锶培养基中培养获得，所述富锶培养基为将SrCl2添加至基本培养基中混合制得，富锶培养基中SrCl2的浓度为0.5~4mg/L；其中每1000mL基本培养基由以下质量的原料配制而成：NaNO3 250mg，MgSO4·7H2O 75mg，CaCl2·2H2O 36mg，H3BO4 0.286mg，MnCl2·4H2O 0.18mg，ZnSO4·7H2O 0.02mg，CuSO4·5H2O 0.08mg，NaMoO4·2H2O 0.04mg，CoCl2·6H2O 0.001mg，EDTA‑Na2 0.lmg，FeSO4·7H2O 0.48mg，柠檬酸0.06mg，Na2SiO3 58mg，K2HPO4 40mg，余量为水。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：郭金英，朱蓓茹，任国艳，
申请(专利权)人：河南科技大学，
类型：发明
国别省市：河南;41