本发明专利技术公开了一种改进的鉴别苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱的薄层色谱鉴别法。改进的薄层色谱法，供试品溶液的制备采用浓氨水和三氯甲烷超声提取，分别采用不同的展开体系对苦参碱和氧化苦参碱进行薄层色谱鉴别；并且，以改良的碘化铋钾试液作为显色试剂，日光下，供试样品与对照品在薄层色谱相应的位置上，显示相同颜色的斑点。该鉴别方法，斑点清晰，重复性好，能够同时准确鉴别苦参药材中两种特征成分苦参碱和氧化苦参碱，与2010版药典方法相比样品处理简便快速、斑点清晰，显色时间适中，重现性好。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及到中药材鉴别
，具体涉及用一种改进的薄层色谱鉴别法同时快速准确对苦参药材中两种特征成分苦参碱和氧化苦参碱进行鉴别的方法。
技术介绍
苦参为常用中药，来源于豆科植物苦参Sop hor a f lavesens Ait.的干燥根，具清热燥湿，杀虫功效，主要含生物碱成分，其中苦参碱(matrine)为其有主要有效成分之一，具有抗肿瘤，平喘和抑菌作用；氧化苦参碱具有抗肿瘤，平喘等作用。因此鉴定苦参药材中苦参碱、氧化苦参碱是苦参药材质量控制的方法的关键。2010版《中华人民共和国药典一部》对苦参中苦参碱和氧化苦参碱的薄层色谱鉴别，样品处理方法为:苦参药材粉末0.5g，加浓氨试液0.3ml，三氯甲烷25ml，放置过夜，过滤，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷0.5ml使溶解；所用展开板为2%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板；展开剂以甲苯一丙酮一甲醇(8:3:0.5)与甲苯一乙酸乙酯一甲醇一水(2:4:2:1) 10C以下放置的上层溶液进行2次展开，显色剂为依次喷以碘化铋钾试液和亚硝酸钠乙醇试液。此法操作过程过于繁琐，费时，尤其是色谱结果不理想；用该法制备的薄层板，粘着力较差，有鼓包脱板现象，且双相展开剂二次展开操作较麻烦，拖尾现象严重；以碘化铋钾试液作为显色剂，显色快，但显现的斑点消失太快，不利于保持影像资料。此外，由于薄层色谱鉴别长时间测定结果存在偏差以及显色不明显等缺陷而实际应用效果不佳。
技术实现思路
本专利技术通过对苦参中苦参碱和氧化苦参碱鉴别方法的探索改变，提供了一种较为精确、快速、简便、无测定偏差以及显色持久明显的效果改进的苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱的薄层色谱法。为达到上述目的，改进的苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱的薄层色谱鉴别法主要包括以下步骤:(I)取苦参碱对照品和氧化苦参碱对照品，分别加入乙醇，制成每ImL乙醇含0.2?0.3mg苦参碱对照品或氧化苦参碱对照品的溶液，分别作为苦参碱对照品溶液和氧化苦参碱对照品溶液；(2)取苦参药材超微粉粉末0.3?0.5g，加0.25?0.3mL浓氨水和20?25mL三氯甲烷的混合溶液，250W超声15?25min，过滤，滤液水浴上蒸干，残渣加乙醇0.4?0.5mL使溶解，作为供试品溶液；(3)吸取苦参碱对照品溶液和供试品溶液各3?4uL，依次点样于同一硅胶H薄层板同一水平线的不同位置，以氯仿-甲醇-浓氨-甲苯试液为展开剂，四者的质量比为5.5?6.5:0.6?0.7:0.5?0.6:0.5?0.8，展距为10?15cm，取出，晾干；所述11薄层色谱板在制备时掺有质量百分比为3?8%的十八烷基硅烷键合剂作为固色剂；(4)分别吸取氧化苦参碱对照品溶液和供试品溶液各3?4uL，依次点样于同一硅胶G薄层板同一水平线的不同位置，以氯仿-乙醇-浓氨-乙酸乙酯试液为展开剂，四者的质量比为5.0?5.5:0.2?0.4:0.5?0.6:1.0?1.5，展距为10?15cm，取出，晾干；所述G薄层色谱板在制备时掺有质量百分比为2?6%的十八烷基硅烷键合剂作为固色剂；(5)以碘化铋钾试液和质量浓度为0.5?0.6mol/L的盐酸按照体积比为1:3?5的混合试液作显色剂显色；白光下，在与对照品色谱相应的位置上，当显相同颜色的斑点则为合格苦参药材超微粉。进一步地，步骤(I)中制成每ImL乙醇含0.25?0.28mg苦参碱对照品或氧化苦参碱对照品的溶液。进一步地，步骤(2)中供试品溶液的制备方法为取苦参药材超微粉粉末0.4?0.5g，加0.3mL浓氨和25mL三氯甲烷的混合溶液，250W超声20?25min，过滤，滤液水浴上蒸干，残渣加乙醇0.5mL使溶解，作为供试品溶液。进一步地，步骤(3)中以氯仿-甲醇-浓氨-甲苯试液为展开剂，四者的质量比为6.0 ?6.5:0.6 ?0.7:0.55:0.7 ?0.8。进一步地，步骤(4)中以氯仿-乙醇-浓氨-乙酸乙酯试液为展开剂，四者的质量比为 5.5:0.3 ?0.4:0.5 ?0.6:1.2 ?1.5。进一步地，步骤(5)中以碘化铋钾试液和质量浓度为0.6mol/L的盐酸按照体积比为1:3的混合试液作显色剂显色。本专利技术以改良的碘化铋钾试液作为显色试剂，显色时间短且保留时间长，斑点清晰，重复性，稳定性好。再者，本专利技术通过对苦参碱对照品、氧化苦参碱对照品不同特性的研宄，分别开发了不同的展开体系，从而得到展开效果精确、无拖尾、有针对性的鉴别方法。此夕卜，薄层色谱板在制备时，通过多项研发，开发了掺有质量百分比为2?6 %的十八烷基硅烷键合剂作为固色剂，从而避免了薄层色谱显色不够持久的缺陷。经系统适用性考察证实，本专利技术方法具有良好的重复性和显色稳定性，能够良好地适用于苦参的薄层色谱鉴别。【附图说明】图1为采用2010年版中国药典规定方法鉴别苦参中苦参碱和氧化苦参碱薄层色谱图，其中第I个斑点为氧化苦参碱对照品，第2个斑点为苦参碱对照品，第3个斑点为苦参供试品。图2为采用本专利技术改进方法鉴别苦参中苦参碱和氧化苦参碱的薄层色谱图。图3为采用改进方法鉴别苦参中苦参碱和氧化苦参碱的实验结果。【具体实施方式】下面结合实施例和附图对本专利技术作进一步的说明。实施例1(I)取苦参碱对照品和氧化苦参碱对照品，分别加入乙醇，制成每ImL乙醇含0.2?0.3mg苦参碱对照品或氧化苦参碱对照品的溶液，分别作为苦参碱对照品溶液和氧化苦参碱对照品溶液；(2)取苦参药材超微粉粉末0.3?0.5g，加0.25?0.3mL浓氨水和20?25mL三氯甲烷的混合溶液，250W超声15?25min，过滤，滤液水浴上蒸干，残渣加乙醇0.4?0.5mL使溶解，作为供试品溶液；(3)吸取苦参碱对照品溶液和供试品溶液各3?4uL，依次点样于同一硅胶H薄层板同一水平线的不同位置，以氯仿-甲醇-浓氨-甲苯试液为展开剂，四者的质量比为6.0?6.5:0.6?0.7:0.55:0.7?0.8，展距为10?15cm，取出，晾干；所述H薄层色谱板在制备时掺有质量百分比为3?8%的十八烷基硅烷键合剂作为固色剂；(4)分别吸取氧化苦参碱对照品溶液和供试品溶液各3?4uL，依次点样于同一硅胶G薄层板同一水平线的不同位置，以氯仿-乙醇-浓氨-乙酸乙酯试液为展开剂，四者的质量比为5.5:0.3?0.4:0.5当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种改进的苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱的薄层色谱鉴别法，其特征在于检测过程按如下步骤操作：(1)取苦参碱对照品和氧化苦参碱对照品，分别加入乙醇，制成每1mL乙醇含0.2～0.3mg苦参碱对照品或氧化苦参碱对照品的溶液，分别作为苦参碱对照品溶液和氧化苦参碱对照品溶液；(2)取苦参药材超微粉粉末0.3～0.5g，加0.25～0.3mL浓氨水和20～25mL三氯甲烷的混合溶液，250W超声15～25min，过滤，滤液水浴上蒸干，残渣加乙醇0.4～0.5mL使溶解，作为供试品溶液；(3)吸取苦参碱对照品溶液和供试品溶液各3～4uL，依次点样于同一硅胶H薄层板同一水平线的不同位置，以氯仿‑甲醇‑浓氨‑甲苯试液为展开剂，四者的质量比为5.5～6.5:0.6～0.7:0.5～0.6:0.5～0.8，展距为10～15cm，取出，晾干；所述H薄层色谱板在制备时掺有质量百分比为3～8％的十八烷基硅烷键合剂作为固色剂。(4)分别吸取氧化苦参碱对照品溶液和供试品溶液各3～4uL，依次点样于同一硅胶G薄层板同一水平线的不同位置，以氯仿‑乙醇‑浓氨‑乙酸乙酯试液为展开剂，四者的质量比为5.0～5.5:0.2～0.4:0.5～0.6:1.0～1.5，展距为10～15cm，取出，晾干；所述G薄层色谱板在制备时掺有质量百分比为2～6％的十八烷基硅烷键合剂作为固色剂。(5)以碘化铋钾试液和质量浓度为0.5～0.6mol/L的盐酸按照体积比为1:3～5的混合试液作显色剂显色；白光下，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张国祖，马霞，李宇伟，金燕飞，王兴涛，刘梅，
申请(专利权)人：河南省康星药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41
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