本发明专利技术公开了一种miRNA和Cyfra21‑1联合在检测非小细胞肺癌中的应用。本发明专利技术公开检测miR‑652、miR‑660和Cyfra21‑1表达水平的物质在制备筛查和/或辅助诊断非小细胞肺癌患者产品中的应用。本发明专利技术发现miR‑652+miR‑660+Cyfra21‑1这种组合对非小细胞肺癌具有最优的检测效率，该组合对于非小细胞肺癌的检测效率要优于其中两个miRNA的组合和单独的Cyfra21‑1(p<0.01)。本发明专利技术公开的组合物在非小细胞肺癌的检测中具有重要应用。
【技术实现步骤摘要】
miRNA和Cyfra21-1联合在检测非小细胞肺癌中的应用
本专利技术涉及一种miRNA和Cyfra21-1联合在检测非小细胞肺癌中的应用，属于生物医疗领域。
技术介绍
肺癌是全世界发病率、死亡率最高的恶性肿瘤，大约80％的肺癌为非小细胞肺癌(NSCLC)，主要分为两种亚型：肺腺癌(ADC)和肺鳞癌(SCC)。到目前为止，治疗非小细胞肺癌最有效的方法是手术治疗，然而，患者通常在早期时没有明显的症状，这就使得部分患者丧失了最佳的治疗时机。目前常用的肺癌诊断方法有胸部X片、CT和其它影像学方法。但是，低剂量螺旋CT和胸部X片都有较高的假阳性率。此外，低剂量螺旋CT还存在过度诊断和射线诱导癌变这两个潜在的危险。因此，我们希望能够找到一个具有较高的诊断敏感度和特异度的方法来辅助肺癌的诊断。近年来，循环miRNA能够作为疾病标志物这一发现引起了众多科学工作者的兴趣，尤其是作为肿瘤诊断标志物方面更是备受关注。miRNA是一类内源性、高度保守的非编码小分子RNA，长度约为18-23个碱基。已有报道证明miRNA在癌症的发病机理和发生发展过程中起到了一定的作用，并且它能够起到类似癌基因或抑癌基因一样的功能。自从Mitchell等和Chen等对循环miRNA进行了一个较为系统的报道之后，循环miRNA立即受到了众多科研人员的关注。早先的研究发现miRNA可以在血清或者血浆中稳定存在，不受反复冻融或者pH变化的影响，并且能够被分离出来进行进一步的研究。更重要的是，通过抽血检测其中物质的变化就能指示患者的健康状况是一种微创的方法，能够减轻病人的痛苦，因此可以作为一种较好的筛查或者辅助诊断的方式。近几年来，有研究显示血清中的miRNA可以作为非小细胞肺癌的标志物，而且一些循环miRNA已被证实有助于那些需要进一步进行CT筛查患者的早期诊断。尽管miRNA对于癌症诊断来说是一个很有前景的标志物，某些miRNA的诊断价值在不同的研究中变化比较大。McDonald等人发现一些数据分析前和数据分析方法上的差异对循环miRNA的诊断效率影响颇大。他们发现不同的RNA的提取方法是导致实验内部不精确性的主要原因。因为miRNA较短并且在血液中的含量较低，通过柱子吸附来提取miRNA方法的稳定性还有待商榷。此外，尽管传统的Trizol提取方法的精确度要优于柱子吸附的方法，但其操作流程相对比较繁复。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是检测非小细胞肺癌。为了解决以上技术问题，本专利技术提供检测miR-652、miR-660和Cyfra21-1表达水平的物质在制备筛查和/或辅助诊断非小细胞肺癌患者产品中的应用；所述Cyfra21-1的表达水平为Cyfra21-1蛋白的表达水平。为了解决以上技术问题，本专利技术还提供miR-652、miR-660和Cyfra21-1作为标志物在制备筛查和/或辅助诊断非小细胞肺癌患者产品中的应用。为了解决以上技术问题，本专利技术还提供检测miR-652和miR-660表达水平的物质在制备筛查和/或辅助诊断非小细胞肺癌患者产品中的应用；或，为了解决以上技术问题，本专利技术还提供miR-652和miR-660作为标志物在制备筛查和/或辅助诊断非小细胞肺癌患者产品中的应用。为了解决以上技术问题，本专利技术还提供检测miR-652表达水平的物质在制备筛查和/或辅助诊断非小细胞肺癌患者产品中的应用；或，为了解决以上技术问题，本专利技术还提供miR-652作为标志物在制备筛查和/或辅助诊断非小细胞肺癌患者产品中的应用。上述任一所述的应用中，所述非小细胞肺癌为肺腺癌和/或肺鳞癌。上述任一所述的应用中，所述miR-652的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示；所述miR-660的核苷酸序列如SEQIDNo.2所示；所述Cyfra21-1的氨基酸序列如更新日为2015年3月15日Genbank登录号为NP_002267.2的序列所示。上述应用中，所述检测miR-652、miR-660和Cyfra21-1表达水平的物质包含实时荧光定量PCR检测miR-652和miR-660表达水平所用的引物和/或探针以及检测Cyfra21-1表达水平所用的抗体。上述任一所述的应用中，所述检测miR-652、miR-660和Cyfra21-1表达水平的物质还包含提取miRNA所需的试剂和/或仪器，和/或，实时荧光定量PCR检测miRNA表达水平所需的试剂和/或仪器；所述实时荧光定量PCR检测miRNA表达水平所需的试剂包括外参athmiR-159a和/或内参miR-484；所述athmiR-159a的核苷酸序列如SEQIDNo.5所示；所述miR-484的核苷酸序列如SEQIDNo.4所示。上述应用中，所述检测miR-652和miR-660表达水平的物质包含实时荧光定量PCR检测miR-652和miR-660表达水平所用的引物和/或探针。上述任一所述的应用中，所述检测miR-652和miR-660表达水平的物质还包含提取miRNA所需的试剂和/或仪器，和/或，实时荧光定量PCR检测miRNA表达水平所需的试剂和/或仪器；所述实时荧光定量PCR检测miRNA表达水平所需的试剂包括外参athmiR-159a和/或内参miR-484；所述athmiR-159a的核苷酸序列如SEQIDNo.5所示；所述miR-484的核苷酸序列如SEQIDNo.4所示。上述应用中，所述检测miR-652表达水平的物质包含实时荧光定量PCR检测miR-652表达水平所用的引物和/或探针。上述任一所述的应用中，所述检测miR-652表达水平的物质还包含提取miRNA所需的试剂和/或仪器，和/或，实时荧光定量PCR检测miRNA表达水平所需的试剂和/或仪器；所述实时荧光定量PCR检测miRNA表达水平所需的试剂包括外参athmiR-159a和/或内参miR-484；所述athmiR-159a的核苷酸序列如SEQIDNo.5所示；所述miR-484的核苷酸序列如SEQIDNo.4所示。为了解决以上技术问题，本专利技术还提供一种系统，该系统包含如下(1)-(3)所示的系统中的至少一种：(1)检测miR-652表达水平的系统；(2)检测miR-660表达水平的系统；(3)检测Cyfra21-1表达水平的系统；所述Cyfra21-1的表达水平为Cyfra21-1蛋白的表达水平。上述系统中，所述检测miR-652表达水平的系统包含实时荧光定量PCR检测miR-652表达水平所用的引物和/或探针；所述检测miR-660表达水平的系统包含实时荧光定量PCR检测miR-660表达水平所用的引物和/或探针；所述检测Cyfra21-1表达水平的系统包含检测Cyfra21-1表达水平所用的抗体。所述系统还包含提取miRNA所需的试剂和/或仪器，和/或，实时荧光定量PCR检测miRNA表达水平所需的试剂和/或仪器。上述任一所述的实时荧光定量PCR检测miR-652表达水平所用的引物和/或探针的商品名称为MicroRNAAssays试剂盒，该试剂盒为ThermoFisher产品，产品目录号为002352；上述任一所述的实时荧光定量PCR检测miR-660表达水平所用的引物和/或探针的商品名称为MicroRNAAssays试剂本文档来自技高网...
【技术保护点】
检测miR‑652、miR‑660和Cyfra21‑1表达水平的物质在制备筛查和/或辅助诊断非小细胞肺癌患者产品中的应用。
【技术特征摘要】
1.检测miR-652、miR-660和Cyfra21-1表达水平的物质在制备筛查和/或辅助诊断非小细胞肺癌患者产品中的应用。2.miR-652、miR-660和Cyfra21-1作为标志物在制备筛查和/或辅助诊断非小细胞肺癌患者产品中的应用。...
【专利技术属性】
技术研发人员：赫捷，陈照丽，周成诚，
申请(专利权)人：中国医学科学院肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：北京;11
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