DMPP增强铵态氮杀灭辣椒疫霉菌的方法技术

本发明专利技术一种DMPP增强铵态氮杀灭辣椒疫霉菌的方法：将DMPP与碳酸氢铵混合后施入表层土壤，调节土壤含水量为田间持水量的60%，保持15天后即可栽植辣椒；本发明专利技术利用DMPP对土壤中硝化细菌的抑制作用，抑制铵态氮肥转变为硝态氮，增加土壤中的铵态氮的浓度，抑制疫霉菌游动孢子萌发和菌丝生长，减少辣椒疫病的发病率，提高辣椒产量；该方法操作简单，防治效果好，易于大规模推广使用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于农作物病虫害防治领域，特别是一种DMPP增强铵态氮杀灭辣椒疫霉 菌的方法。
技术介绍
辣椒疫病首次报导于1918年的美国新墨西哥州，是一种在世界范围内广泛发生 的的土传病害，可致大片植株枯死，对辣椒产量和品质影响极大，严重时减产高达50%以 上。在我国，辣椒疫病广泛分布在江苏、山东、陕西等20多个省份，发病面积占主产区栽培 面积的20% - 30%，且发病率呈逐年上升和蔓延趋势。 辣椒疫霉菌是辣椒疫病的致病菌，它能以各种菌体结构长期存活于土壤中，成为 下一生长季节病害的主要初侵染源。目前，辣椒疫病的主要防治方法有选育抗病品种、化学 药剂防治、生物防治及农业措施等。虽然这些方法均有成功的报道，但仍存在不足，如目前 已培育出的抗辣椒疫病品种，仅为抗病或者耐病品种，无尚抗品种或者免疫品种，应用于实 际生产时所表现出的抗病水平仍然较低；化学药剂防治方法容易造成农药在土壤及农产品 中的残留、富集，带来巨大的食品安全和环境安全隐患；而生物防治的效果容易受到拮抗菌 在土壤中的定殖能力限制而不易广泛推广采用，因此，迫切需要开发新的防效稳定、环境友 好、操作简便的辣椒疫病防治措施。 研宄发现，辣椒疫病的发生及严重程度与土壤中的辣椒疫霉菌的数量在一定范围 内呈正相关。大量文献报道，土壤中高浓度的铵态氮对包括辣椒疫霉菌在内的土传病原菌 有较强的杀灭作用，土壤溶液中铵态氮的含量越高，对病原菌的杀灭效果越好。然而在旱作 土壤下，施入土壤中的铵态氮很快会在土壤硝化微生物的作用下转化为硝态氮，失去对病 原菌的抑制作用，甚至硝态氮对土壤中辣椒疫霉菌的生长与繁殖还有促进作用。申请号为 201410327691. 6的中国专利公开一种通过在土壤中施入液氨并配合施用微生物有机肥以 降低土壤中黄瓜枯萎病菌的方法，但该方法施用过程中必须要结合高温闷棚等措施，且液 氨施用过程中释放出的氨气对操作人员和环境可能造成损害；申请号为201310229452. 2 的中国专利公开了一种在土壤中灌溉高浓度铵态氮含量的沼液以控制作物土传病害方法， 但该方法受到蔬菜种植地沼气来源问题的限制，不宜推广使用。 硝化抑制剂是具有抑制亚硝化细菌活动功能的一类物质，其在土壤中能抑制亚硝 化、硝化、反硝化细菌的生物活性，阻碍NH/-N向NCV-N转化。3,4-二甲基吡唑磷酸（3， 4-Dimethylpyrazol phosphate，DMPP)是一种新型的硝化抑制剂，可抑制土壤中氨氧化细 菌的活性，阻止铵态氮向硝态氮的转化，控制土壤中的氮尽量以NH4+-N的形式存在("德国 新型硝化抑制剂DMPP"，茶正早等，安徽农学通报，2007, 13 (12) :46- 48)。由于DMPP对植 物、人类、动物和土壤其他微生物无毒害，在土壤中无淋洗，有效期长等特点，在国际上被用 作特殊肥料而受到认可，但是DMPP发挥硝化抑制作用受到土壤类型、氮肥种类、土壤温度、 作物种类、栽培措施等多种因素影响，目前还没有通过向土壤中施入铵态氮肥和硝化抑制 剂，延长铵态氮在土壤中的半衰期，以杀灭土壤中的病原菌，克服土传病害的文献报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于，针对上述问题，提供一种增强杀灭辣椒疫霉菌，防控辣椒疫病 效果的方法，以降低土壤中辣椒疫霉菌数量，控制辣椒疫病发生率，提高辣椒产量，本专利技术 是这样实现的： 一种DMPP增强铵态氮杀灭辣椒疫霉菌的方法，具体步骤如下：将DMPP与碳酸氢铵混合 后施入表层土壤，与土壤充分混合，调节土壤含水量为田间持水量的60%，保持15天后即可 栽植辣椒。 进一步，本专利技术中，碳酸氢铵的施入量为60kg/亩，DMPP的施入量为施入总N量的 1-2% 〇 本专利技术所述表层土壤是指0-20cm的土壤。 本专利技术的有益效果在于：向表层土壤施入的3,4_二甲基R比挫磷酸（DMPP)，对土 壤中的硝化细菌具有抑制作用，抑制铵态氮肥转变为硝态氮，同时由于土壤表面带负电荷， 对阳离子NH 4+具有很强的吸持能力，可增加土壤中的铵态氮的浓度，抑制疫霉菌游动孢子 萌发和菌丝生长；含水量的控制以及15天的时间，既为土壤中的微生物提供适宜的生存环 境，又保证土壤中的疫霉菌数量有充足的时间下降到致使辣椒发病的阈值之下；该方法操 作简单，易于推广使用，实验表明，经该方法处理后的大田土壤中的辣椒疫霉菌数量可减少 1个数量级，且辣椒发病率降低64. 5%，产量增加8. 6%。【附图说明】 图1为实施例土壤铵态氮含量测定结果示意图； 图2为实施例土壤硝态氮含量测定结果示意图。【具体实施方式】 实施例中涉及的辣椒疫霉菌分离自江苏省淮安市辣椒根腐病病株根际土壤，由江 苏省农科院资环所土壤肥料研宄室保存； 实施例中涉及培养基配方： PDA培养基：土豆200g，葡萄糖20g，琼脂20. 0g，蒸馏水1000mL，pH自然； V8 培养基：V8 果汁 200g，CaC03 3.0g，琼脂 20.0g，蒸馏水 1000 ml pH 5. 8〇 实施例1碳酸氢铵对辣椒疫霉菌游动孢子萌发的抑制作用实验 辣椒疫霉菌游动孢子悬液的制备：将辣椒疫霉菌在V8培养基中培养5 d，打孔取菌落 边缘20个菌丝块(直径6 mm)放入装有15 ml灭菌水培养皿中，长有菌丝的一面朝上，液面 淹没菌丝块，光暗交替培养（12 h/12 h) 2 d;再将菌丝块转移入含有5 mL灭菌水的试管 中，放入4 °C冰箱后冷藏30 min，待释放出游动孢子，挑出菌丝块，配成辣椒疫霉菌游动孢 子悬浮液，用血球计数板计得孢子浓度为IX IO5个/ml。 辣椒疫霉菌游动孢子萌发的抑制试验方法：将碳酸氢铵和DMPP分别溶解于 0. lmol/L磷酸缓冲液（pH =7. 5)中，得到1000 mg/L的NH4+-N浓度的碳酸氢铵溶液和10 mg/L的DMPP溶液，将获得的碳酸氢铵溶液和DMPP溶液分别与辣椒疫霉菌游动孢子悬液混 合，观察各处理孢子萌发率。具体方法为：吸取10 μ 1辣椒疫霉菌游动孢子悬液分别加到 有凹面、经灭菌处理的载玻片上，再加入5 μ 1碳酸氢铵溶液或DMPP溶液，每个处理3个重 复，同时设立空白对照组(加入灭菌磷酸缓冲液）；将载玻片放入培养皿中，培养皿底部用无 菌湿润滤纸保湿，培养皿于28 °C恒温培养6 h后，在40倍镜下分别观察各处理游动孢子的 萌发状况，在每个视野中随即查数100个游动孢子，计算游动孢子萌发率，观察过程中及时 补水保湿，试验结果如表1所示： 表1 :碳酸氢铵对辣椒疫霉菌游动孢子萌发的抑制效果【主权项】1. 一种DMPP增强铵态氮杀灭辣椒疫霉菌的方法，其特征在于，具体步骤如下：将DMPP 与碳酸氢铵混合后施入表层土壤，与土壤充分混合，调节土壤含水量为田间持水量的60%， 保持15天后即可栽植辣椒。2. 根据权利要求1所述DMPP增强铵态氮杀灭辣椒疫霉菌的方法，其特征在于，碳酸氢 铵的施入量为60kg/亩，DMPP的施入量为施入总N的1-2%。【专利摘要】本专利技术一种DMPP增强铵态氮杀灭辣椒疫霉菌的方法：将DMPP与碳酸氢铵混合后施入表层土壤，调节土壤含水量为田间持水量的60%，保持15天后即可栽植辣椒；本专利技术利用DMPP对土壤中硝化细菌的抑制作用，抑制铵态氮肥转变为硝态本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种DMPP增强铵态氮杀灭辣椒疫霉菌的方法，其特征在于，具体步骤如下：将DMPP与碳酸氢铵混合后施入表层土壤，与土壤充分混合，调节土壤含水量为田间持水量的60%，保持15天后即可栽植辣椒。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：马艳，曹云，郭德杰，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：江苏;32