本发明专利技术公开了一种高精度测量饲料中的莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇含量的方法，包括以下步骤：步骤1：取饲料样品，加入到缓冲溶液中，经过漩涡混合器混合处理后再经过离心处理，取离心处理后的上清液少量；步骤2：将上清液加入到SLE柱后，静置2～4分钟；步骤3：采用三元洗脱剂对SLE柱洗脱至少两次，接收洗脱液，得到含有莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇的洗脱液，步骤4：绘制含有莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇的各个标准溶液的线性回归曲线，并测量步骤3的洗脱液中莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇的含量。本发明专利技术的目的在于提供一种分离效率高、操作简单的高精度测量饲料中的莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇含量的方法。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及动物组织和排泄物的检测领域，特别是一种。
技术介绍
样品前处理是分析检测过程的关键环节，是浓缩被测定的痕量组分，提高方法的灵敏度，及除去对分析系统有干扰的物质的重要手段。萃取是从样品集体中分离出目标化合物的一项技术，是样品预处理中最重要的方法之一。目前，液液萃取仍然是应用最广泛的样品制备方法之一，但是，传统的液液萃取的操作繁琐费时、有机溶剂消耗量大，而且容易出现乳化现象的缺陷，使得在实际应用中具有一定的局限性。1998年，科学家提出了在传统的液液萃取的基础上，利用一种具有吸附性和较大的比表面积的惰性多空填料作为介质，建立的一种新型高效样品的制备方法-介质液液萃取(supported liquid extract1n简称SLE)，SLE萃取技术就是选用一种多孔性惰性材料-煅烧硅藻土作为介质，取代分液漏斗，增大了两相接触时的作用面积，实现高效、快速的萃取过程。当水溶液样品加样到固定的聚丙烯注射管中的煅烧硅藻土上后，经过一定时间(一般分为几分钟)，水相溶液以一层薄薄的液膜形式分布在填料表面，之后，将有机溶剂从柱管上端加入，当互不相溶的两相在硅藻土表面接触的同时萃取立即发生，最后萃取液在重力作用下流出，必要情况下，可以施加较小的压力，而水相保留在介质中。盛接的流出液直接将溶剂吹干，复溶后，即可用于下一步分析检测。农业部1063号公告-6-2008《饲料中13种β —受体激动剂的检测液相色谱——串联质谱法》采用阳离子型交换柱来提取饲料中的β —受体激动剂，如何降低上述检测的用时，提高上述检测的准确度是本领域技术人员需要思考的问题。【专利技术内容】本专利技术的目的在于提供一种分离效率高、操作简单的。本专利技术的技术方案为:一种，包括以下步骤:步骤1:取饲料样品，加入到缓冲溶液中，经过漩涡混合器混合处理0.5?1.5分钟后再经过离心处理，将经混合处理的溶液在离心机中以9000?11000转/分钟的速度离心0.5?1.5分钟，取离心处理后的上清液少量；步骤2:将上清液加入到SLE柱后，静置2?4分钟；步骤3:采用三元洗脱剂对SLE柱洗脱至少两次，接收洗脱液，得到含有莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇的洗脱液；步骤4:采用高效液相色谱法对步骤3得到的洗脱液进行检测，并分别绘制莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇的不同浓度标准溶液的标准回归曲线，所述的高效液相色谱法的具体参数为:色谱柱:C18柱，150mm*3.9mmID柱温:室温流动相:0.05%磷酸水溶液和乙腈的混合液，其中0.05%磷酸水溶液和乙腈的体积比为100:12 ；检测器:UV检测器；检测波长:217nm;其中，所述的三元洗脱剂为正丁醇、正己烷和乙酸甲酯的混合物，其中，所述的三元洗脱剂由以下重量份组成:正丁醇2?4份；正己烷2?4份；乙酸甲酯2?8份；所述的缓冲溶液为:Ph范围为6.5?7.0的磷酸缓冲液。在上述的中，所述的饲料样品为lg，缓冲溶液为5ml，步骤2中所取的上清液为0.5ml，所述的步骤3中，每次洗脱时所用的洗脱剂为0.5ml。在上述的中，所述的SLE柱为奥秘山东科技有限公司生产的介质液液萃取SLE柱，液相色谱仪为LC-2010型高效液相色谱仪(日本岛津)。本专利技术的有益效果如下:采用SLE法分离饲料中的莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇，采用三元萃取剂可以有效的提高多组分萃取对象的萃取效率，结合HPLC法可以有效的提高检测的准确度和降低检测用时。【具体实施方式】下面结合【具体实施方式】，对本专利技术的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对本专利技术的任何限制。实施例1步骤1:取饲料样品lg，加入到5ml的缓冲溶液中，经过漩涡混合器混合处理处理I分钟后再经过离心处理，取离心处理后的上清液0.5ml ;离心处理的转速为10000转/分钟，离心时间I分钟。所述的缓冲溶液为:ph为6.5的磷酸缓冲液。步骤2:将上清液加入到SLE柱后，静置3分钟；步骤3:采用三元洗脱剂对SLE柱(奥秘山东科技有限公司生产的介质液液萃取SLE柱)洗脱两次，接收洗脱液，得到含有莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇的洗脱液；每次消耗的洗脱剂为0.5ml。其中，所述的三元洗脱剂为正丁醇、正己烷和乙酸甲酯的混合物，其中，所述的三元洗脱剂由以下成分组成:正丁醇30wt% ；正己烷30wt% ；乙酸甲酯40wt%。实施例2步骤1:取饲料样品lg，加入到5ml的缓冲溶液中，经过漩涡混合器混合处理处理I分钟后再经过离心处理，取离心处理后的上清液0.5ml ;离心处理的转速为10000转/分钟，离心时间I分钟。所述的缓冲溶液为:ph为7的磷酸缓冲液。步骤2:将上清液加入到SLE柱后，静置4分钟；步骤3:采用三元洗脱剂对SLE柱(奥秘山东科技有限公司生产的介质液液萃取SLE柱)洗脱两次，接收洗脱液，得到含有莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇的洗脱液；每次消耗的洗脱剂为0.5ml。其中，所述的三元洗脱剂为正丁醇、正己烷和乙酸甲酯的混合物，其中，所述的三元洗脱剂由以下成分组成:正丁醇20wt% ；正己烷30wt% ；乙酸甲酯50wt%。分析:检测方法具体为:仪器:LC_2010型高效液相色谱仪(日本岛津)色谱柱:C18柱，150mm*3.9mmID柱温:室温流动相:0.05%磷酸水溶液:乙腈=100:12 ；检测器:UV检测器；检测波长:217nm；进样量:50μ L采用上述的检测方法分别测量莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇的标准样，并分别绘制莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇的回归方程，同时，采用实施例1的样品按上述参数进行检测，根据217nm条件下的莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇的回归方程测定莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇的含量，其中，沙丁胺醇出峰时间为7.2min，莱克多巴胺出峰时间为9.3min，克仑特罗的出峰时间为10.2min。以上所述的仅为本专利技术的较佳实施例，凡在本专利技术的精神和原则范围内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。【主权项】1.一种，其特征在于，包括以下步骤: 步骤1:取饲料样品，加入到缓冲溶液中，经过漩涡混合器混合处理0.5?1.5分钟后再经过离心处理，将经混合处理的溶液在离心机中以9000?11000转/分钟的速度离心.0.5?1.5分钟，取离心处理后的上清液少量； 步骤2:将上清液加入到SLE柱后，静置2?4分钟； 步骤3:采用三元洗脱剂对SLE柱洗脱至少两次，接收洗脱液，得到含有莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇的洗脱液； 步骤4:采用高效液相色谱法对步骤3得到的洗脱液进行检测，并分别绘制莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇的不同浓度标准溶液的标准回归曲线，所述的高效液相色谱法的具体参数为: 色谱柱:C18 柱，150mm*3.9mmID 柱温:室温 流动相:0.05%磷酸水溶液和乙腈的混合液，其中0.05%磷酸水溶液和乙腈的体积比为 100:12 ； 检测器:uv检测器； 检测波长:217nm ； 其中，所述的三元洗脱剂为正丁醇、正己烷和乙酸甲酯的混合物，其中，所述的三元洗脱剂由以下重量份组成: 正丁醇2?4份； 正己烧2?4份； 乙酸甲酯2?8份； 所述的缓冲溶液为:Ph范围为6.5?7.0的磷酸缓冲液。2.根据权利本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种高精度测量饲料中的莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：取饲料样品，加入到缓冲溶液中，经过漩涡混合器混合处理0.5～1.5分钟后再经过离心处理，将经混合处理的溶液在离心机中以9000～11000转/分钟的速度离心0.5～1.5分钟，取离心处理后的上清液少量；步骤2：将上清液加入到SLE柱后，静置2～4分钟；步骤3：采用三元洗脱剂对SLE柱洗脱至少两次，接收洗脱液，得到含有莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇的洗脱液；步骤4：采用高效液相色谱法对步骤3得到的洗脱液进行检测，并分别绘制莱克多巴胺、克仑特罗、沙丁胺醇的不同浓度标准溶液的标准回归曲线，所述的高效液相色谱法的具体参数为：色谱柱：C18柱，150mm*3.9mmID柱温：室温流动相：0.05％磷酸水溶液和乙腈的混合液，其中0.05％磷酸水溶液和乙腈的体积比为100:12；检测器：UV检测器；检测波长：217nm；其中，所述的三元洗脱剂为正丁醇、正己烷和乙酸甲酯的混合物，其中，所述的三元洗脱剂由以下重量份组成：正丁醇 2～4份；正己烷 2～4份；乙酸甲酯 2～8份；所述的缓冲溶液为：Ph范围为6.5～7.0的磷酸缓冲液。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：陈学松，陈启钊，叶小强，郭振旺，吴岚，邓水德，
申请(专利权)人：广西壮族自治区梧州食品药品检验所，
类型：发明
国别省市：广西;45
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