一种检测茶叶中咖啡碱的方法技术

本发明专利技术涉及一种检测茶叶中咖啡碱的方法，属于检测技术领域。该方法包括以下步骤：试液制备；咖啡碱标准曲线的制作；结果计算。本发明专利技术的优点是：采用本发明专利技术方法检测茶叶中咖啡碱的含量，检测结果重复性好，误差能达到国家标准的要求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于检测
，具体涉及。
技术介绍
茶叶咖啡碱属于生物碱，是茶叶嘌呤碱的一种，味苦，具有药用价值和保健价值， 一般在茶叶里占干物质含量的2. 0%~5. 0%，多的达6. 0%以上，是组成茶叶滋味的主要 化学成分之一，测定其含量多少对衡量茶叶品质优次有重要作用。茶叶中咖啡碱有多种检 测方法，包括碘量法、重量法、紫外分光光度法、定氮法、比色法、气相法、高效液相色谱法、 层析法以及近红外光谱法等，目前较为常用的有两种：高效液相色谱法、紫外分光光度法。 高效液相色谱法，要求实验条件相对较高，紫外分光光度法因其具有简便、快速 的特点而为大多数检测单位所采用。紫外分光光度法是利用咖啡碱溶液在紫外光区波 长274nm处有一个最大的吸收峰，用碱式乙酸铅作为沉淀剂，除去茶多酚、蛋白质及色素 等物质，然后直接用274nm波长的紫外光，测定提取液光密度数值，计算咖啡碱含量。GB/ T8312-2002茶叶咖啡碱检验中记载了采用紫外分光光度法计算咖啡碱含量的方法，其中试 液的制备：称取3g(准确至0.0 Olg)磨碎试样于500mL锥形瓶中，加沸蒸馏水450mL，立即 移入沸水浴中浸提45min (每隔IOmin摇动一次）。浸提完毕后立即趁热减压过滤，滤液移 入500mL容量瓶中，残渣用少量热蒸馏水洗涤2~3次，并将滤液滤入上述容量瓶中，冷却 后用蒸馏水稀释至刻度。现有的紫外分光光度法测定茶叶咖啡碱时制作的标准曲线线性范 围较窄，标准溶液浓度设定、以试剂空白作参比等不太科学。线性范围窄，当茶叶样品的咖 啡碱含量较大时，所测得的吸光度对应浓度常超出线性范围，误差较大。以现有线性范围来 检测，茶叶咖啡碱含量最大值约4. 0%，而实际上很大部分茶叶咖啡碱含量在4. 0%以上， 标准溶液浓度范围设定不科学，按传统方法检测结果重复性不好。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供，该方法能检测的含量范围 广，重复性好，检测结果更接近真实值。 本专利技术所采取的技术方案是一种茶叶咖啡碱含量检测方法，包括以下步骤： a、试液制备：称取3g(准确至0.0 Olg)磨碎试样于500mL锥形瓶中，加沸蒸馏水 450mL，立即移入沸水浴中，浸提45min (每隔IOmin摇动一次），浸提完毕后立即趁热减压过 滤，滤液移入500mL容量瓶中，残渣用少量热蒸馏水洗涤2~3次，并将滤液滤入上述容量 瓶中，冷却后用蒸馏水稀释至刻度，试样测定的同时作试剂空白； b、用移液管准确吸取试液IOmL移入IOOmL容量瓶中，加入4mL0.0 lmol/L盐酸 和ImL碱式乙酸铅溶液，用水稀释至刻度，混匀，静置澄清过滤，得滤液，准确吸取该滤液 25mL，注入50mL容量瓶中，加入0.1 mL 4. 5mol/L硫酸溶液，加水稀释至刻度，混匀，静置澄 清过滤。用IOmm比色杯，在波长274nm处，以标准曲线0管作参比，测定吸光度㈧； c、咖啡碱标准曲线的制作 咖啡碱标准溶液：称取IOOmg咖啡碱（纯度不低于99% )溶于IOOmL水中作为母 液。准确吸取5mL母液于IOOmL容量瓶，加水至刻度摇匀作为咖啡碱工作液（ImL工作液含 咖啡碱50ug)。 分别吸取0、0. 5、1、3、5、7、IOmL咖啡碱工作液于一组25mL容量瓶中，各加入1.0 mL 盐酸，用水稀释至刻度，混匀，用IOmm石英比色杯，在波长274nm处，以标准曲线0管作参 比，测定吸光度（A)。将测得的吸光度与对应的咖啡碱浓度绘制标准曲线； d、结果计算 茶叶中咖啡碱含量以干态质量分数表示，按下式计算 式中：【主权项】1. ，其特征在于，包括以下步骤： a、 试液制备：称取3g磨碎试样于500mL锥形瓶中，加沸蒸馏水450mL，立即移入沸水浴 中，浸提45min，浸提完毕后立即趁热减压过滤，滤液移入500mL容量瓶中，残渣用少量热蒸 馏水洗涤2~3次，并将滤液滤入上述容量瓶中，冷却后用蒸馏水稀释至刻度，得试液；试样 测定的同时作试剂空白； b、 用移液管准确吸取上述试液10mL移入lOOmL容量瓶中，加入4mL0.Olmol/L盐酸 和lmL碱式乙酸铅溶液，用水稀释至刻度，混匀，静置澄清过滤，得滤液，准确吸取该滤液 25mL，注入50mL容量瓶中，加入0.lmL4. 5mol/L硫酸溶液，加水稀释至刻度，混匀，静置澄 清过滤；用l〇mm比色杯，在波长274nm处，以标准曲线0管作参比，测定吸光度； c、 咖啡碱标准曲线的制作 咖啡碱标准溶液：称取l〇〇mg咖啡碱溶于lOOmL水中作为母液；准确吸取5mL母液于lOOmL容量瓶，加水至刻度摇匀，得咖啡碱工作液； 分别吸取〇、〇. 5、1、3、5、7、10mL上述咖啡碱工作液于一组25mL容量瓶中，各加入1.OmL盐酸，用水稀释至刻度，混匀，用l〇mm石英比色杯，在波长274nm处，以标准曲线0管作参 比，测定吸光度；将测得的吸光度与对应的咖啡碱浓度绘制标准曲线； d、 结果计算 茶叶中咖啡碱含量以干态质量分数表示，按下式计算式中： C2一一试样测得的吸光度从咖啡碱标准曲线上查得的咖啡碱相应含量，减去试剂空白 测得的吸光度从咖啡碱标准曲线上查得的咖啡碱的含量后的值； L3--试液_总量mL; M2--试样用量g; m2一一试样干物率％。【专利摘要】本专利技术涉及，属于检测
该方法包括以下步骤：试液制备；咖啡碱标准曲线的制作；结果计算。本专利技术的优点是：采用本专利技术方法检测茶叶中咖啡碱的含量，检测结果重复性好，误差能达到国家标准的要求。【IPC分类】G01N21-33【公开号】CN104807770【申请号】CN201510197084【专利技术人】刘晓霞, 周国兰, 周顺珍, 赵华富, 郭灿, 龚雪, 郑文莉 【申请人】贵州省茶叶研究所【公开日】2015年7月29日【申请日】2015年4月23日本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测茶叶中咖啡碱的方法，其特征在于，包括以下步骤：a、试液制备：称取3g磨碎试样于500mL锥形瓶中，加沸蒸馏水450mL，立即移入沸水浴中，浸提45min，浸提完毕后立即趁热减压过滤，滤液移入500mL容量瓶中，残渣用少量热蒸馏水洗涤2～3次，并将滤液滤入上述容量瓶中，冷却后用蒸馏水稀释至刻度，得试液；试样测定的同时作试剂空白；b、用移液管准确吸取上述试液10mL移入100mL容量瓶中，加入4mL 0.01mol/L盐酸和1mL碱式乙酸铅溶液，用水稀释至刻度，混匀，静置澄清过滤，得滤液，准确吸取该滤液25mL，注入50mL容量瓶中，加入0.1mL 4.5mol/L硫酸溶液，加水稀释至刻度，混匀，静置澄清过滤；用10mm比色杯，在波长274nm处，以标准曲线0管作参比，测定吸光度；c、咖啡碱标准曲线的制作咖啡碱标准溶液：称取100mg咖啡碱溶于100mL水中作为母液；准确吸取5mL母液于100mL容量瓶，加水至刻度摇匀，得咖啡碱工作液；分别吸取0、0.5、1、3、5、7、10mL上述咖啡碱工作液于一组25mL容量瓶中，各加入1.0mL盐酸，用水稀释至刻度，混匀，用10mm石英比色杯，在波长274nm处，以标准曲线0管作参比，测定吸光度；将测得的吸光度与对应的咖啡碱浓度绘制标准曲线；d、结果计算茶叶中咖啡碱含量以干态质量分数表示，按下式计算式中：C2——试样测得的吸光度从咖啡碱标准曲线上查得的咖啡碱相应含量，减去试剂空白测得的吸光度从咖啡碱标准曲线上查得的咖啡碱的含量后的值；L3——试液总量mL；M2——试样用量g；m2——试样干物率％。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘晓霞，周国兰，周顺珍，赵华富，郭灿，龚雪，郑文莉，
申请(专利权)人：贵州省茶叶研究所，
类型：发明
国别省市：贵州;52