IL-1结合蛋白制造技术

描述了结合IL-1α和IL-1β的IL-1结合蛋白以及它们在用于治疗、预防及诊断IL-1相关性病症和用于检测细胞、组织、样品及组合物中的IL-1α和IL-1β的组合物和方法中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【专利说明】 本申请是申请日为2011年5月13日的中国专利申请201180034631. X "IL-1结 合蛋白"的分案申请。 相关申请的夺叉引用 本申请对2010年5月14日提交的美国临时申请No. 61/334,917和2010年12月 21日提交的美国临时申请No. 61/425, 701要求优先权权益，所述临时申请的内容通过引用 的方式完整并入本文。
本专利技术涉及IL-I结合蛋白，并且更具体地涉及它们在预防和/或治疗急性和慢性 免疫学疾病如类风湿性关节炎、骨关节炎、银肩病、多发性硬化和其他自身免疫疾病中的用 途。
技术介绍
细胞因子如白介素（IL-I)和肿瘤坏死因子（TNF)是由各种细胞（如单核细胞和 巨噬细胞）产生的作为炎性过程介体的分子。白介素-1是具有广泛生物学和生理学效应 的细胞因子，所述效应包括发热、前列腺素合成（在例如成纤维细胞、肌肉细胞和内皮细胞 中）、T-淋巴细胞活化和白介素生-2产生。 IL-I超家族的原始成员是IL-I a、IL-I β和IL-I受体拮抗物（IL-lRa、IL-1RA、 IL-lra、IL-IRa )。IL-I α和IL-I β是参与对抗感染的免疫防御的促炎细胞因子。IL-IRa 是与IL-Ia和IL-Ιβ竞争受体结合的分子，阻断它们在免疫活化中的作用。近年来， 已经见到其他分子加入IL-I超家族，包括IL-18(见Dinarello等人，FASEB J.，8(15): 1314-3225 (1994) ;Huising 等人，Dev. Comp. Immunol.，28 (5) :395-413 (2004))和另外 6 种与IL-I a、IL-I β或IL-IRA具有结构同源性的基因。这些后6个成员命名为IL1F5、 IL1F6、IL1F7、IL1F8、IL1F9 和 IL1F10。因此，IL-I a、IL-1 β 和 IL-IRA 已经分别重命名为 IL-IFl、IL-1F2 和 IL-1F3 (见 Sims 等人，Trends Immunol.，22 (10) :536-537 (2001) ;Dunn 等人，Trends Immunol.，22 (10) :533-536 (2001))。已经描述了 IL-I 家族的另外一个推定 成员，称作IL-33或IL-IFl 1，但是这个名称未在HGNC基因家族命名数据库中被正式接受。 IL-Ia和IL-I β均由巨噬细胞、单核细胞和树突细胞产生。它们形成身体对抗 感染的炎性反应的重要部分。这些细胞因子增加内皮细胞上黏附因子的表达，以使白细 胞（对抗病原体的细胞）能够移行至感染部位并重新设定下丘脑体温调节中心，导致本身 表现为发热的增加的体温。IL-I因此称作内源性热原。增加的体温帮助身体的免疫系统 对抗感染。IL-I还在血细胞生成的调节中是重要的。周围组织中的IL-I β产生也与痛 觉过敏（增加的疼痛敏感性）相关、与发热相关（Morgan等人，Brain Res.，1022(1-2): 96-100(2004))。大多数情况下，这两种形式的IL-I与相同的细胞受体结合。这种受体由 两个相关但是不相同的亚单位组成，所述亚单位经由大多与某些其他受体共享的途径传递 胞内信号。这些受体包括Toll家族先天免疫受体和IL-18的受体。IL-Ia和IL-I β也拥 有相似的生物学特性，包括诱导发热、慢波睡眠和嗜中性粒细胞增多、T-淋巴细胞和B-淋 巴细胞活化、成纤维细胞增殖、某些细胞的细胞毒性、诱导胶原酶、合成肝脏急性期蛋白和 增加集落刺激因子和胶原的产生。 已经分离并且表达了编码这两种不同形式的IL-I的cDNA ;这些cDNA代 表两种不同的基因产物，命名为IL-I β (Auron等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA，81 : 7907-7911(1984))和 IL-Ia (Lomedico 等人，Nature，312 :458-462(1984))。IL-Ιβ 是由 人单核细胞产生的在mRNA水平和蛋白质水平上均占优势的形式。这两种形式的人IL-I仅 共享26%氨基酸同源性。尽管它们的多肽序列不同，然而这两种形式的IL-I具有结构相似 性（Auron等人，J. Mol. Cell Immunol.，2 :169-177(1985))，所述相似性在于氨基酸同源性 局限于IL-I分子的离散区域。 IL-I α和IL-I β作为前体肽产生。换而言之，它们作为长蛋白质制备，所述长蛋 白质随后经加工以释放较短的活性分子，该分子称作成熟蛋白。例如，在被胱天蛋白酶蛋 白质家族的某个成员（称作胱天蛋白酶-1或白介素-1转化酶（ICE))切割后从前（pro) IL-I β中释放成熟的IL-I β。人IL-I超家族的每个成员的成熟形式的三维结构由产生桶 形蛋白质的12-14条β -链组成。 虽然自从发现这种重要的促炎细胞因子起，已经在接近二十年的研宄中描述了针 对IL-I的各种抗体，但是仍需要可有效介导或中和炎性反应和自身免疫病症中IL-I的活 性以及用于检测样品和组织中IL-I β的改进抗体。
技术实现思路
本专利技术涉及结合人IL-I α和IL-I β的蛋白质。本专利技术的结合蛋白包括但不限于 可以结合人IL-Ια和IL-I β的抗体、其抗原结合部分和多价多特异性结合蛋白如DVD-Ig? 结合蛋白。本专利技术还提供了制造和使用本文所述的IL-Ια和IL-I β结合蛋白的方法，以 及各种组合物，所述组合物可以在检测样品中IL-Ια和IL-I β的方法中或在治疗或预防 个体中与IL-I活性相关或疑似与IL-I活性相关的病症的方法中使用。 在一个实施方案中，本专利技术提供一种结合蛋白，其包含第一和第二多肽链，其中所 述第一多肽链包含第一 VDl- (Xl) n-VD2-C- (Χ2) η，其中： VDl是第一重链可变域； VD2是第二重链可变域； C是重链恒定域； Xl是接头，条件是，它不是CHl ; Χ2是Fc区；并且 η独立地是0或1 ;并且 其中所述第二多肽链包含第二VDl-(Xl)n-VD2-C-(X2)n，其中： VDl是第一轻链可变域； VD2是第二轻链可变域； C是轻链恒定域； Xl是接头，条件是，它不是CHl ; X2不包含Fc区；并且 η独立地是0或I ; 其中，在所述第一多肽链中，VDl 包含选自 SEQ ID NO :60-148、196、198、200、202、 204、 206、208和210的氨基酸序列；并且VD2包含选自SEQ ID NO :213和227的氨基酸序 列； 其中，在所述第二多肽链中，VDl包含选自 SEQ ID NO :149-189、197、199、201、203、 205、 207、209和211的氨基酸序列；并且VD2包含选自SEQ ID N0:216和229的氨基酸序 列；并且 其中所述结合蛋白结合人IL-I β和人IL-I α。 在一个实施方案中，上文描述的结合蛋白包含第一多肽链，所述第一多肽链包含 选自 SEQ ID NO :212、217、226、230、232、234和 236 的氨基酸序列。 在另一个实施方案中，上文描述的结合蛋白包含第本文档来自技高网...

【技术保护点】
包含抗原结合域的结合蛋白，所述结合蛋白能够结合人IL‑1β，所述抗原结合域包含如下文定义的6个CDR：CDR‑H1、CDR‑H2、CDR‑H3、CDR‑L1、CDR‑L2和CDR‑L3：CDR‑H1：X1‑Y‑D‑M‑S (SEQ ID NO: 190)，其中：X1是K或R；CDR‑H2：Y‑X2‑S‑X4‑G‑G‑X7‑G‑T‑Y‑Y‑P‑D‑X14‑X15‑K‑G (SEQ ID NO: 191)，其中：X2是I或V；X4是S或H；X7是G或A；X14是T或S；和X15是V或A；CDR‑H3：G‑G‑V‑X4‑K‑G‑X7‑F‑D‑X10 (SEQ ID NO: 192)，其中：X4是T或Y；X7是Y或C；和X10是V、E、L、M、Q或Y；CDR‑L1：R‑A‑S‑G‑N‑I‑X7‑X8‑X9‑L‑X11 (SEQ ID NO: 193)，其中：X7是H、Y或W；X8是N、G、T、Q、E、H、D或K；X9是Y或W；和X11是T、A或N；CDR‑L2：X1‑A‑K‑X4‑L‑X6‑X7 (SEQ ID NO: 194)，其中：X1是N、Q或D；X4是T、N、I、E或S；X6是A、M或E；和X7是D、E、S或A；和CDR‑L3：Q‑X2‑F‑W‑X5‑X6‑P‑X8‑X9 (SEQ ID NO: 195)，其中：X2是H或Q；X5是S、N、T、K、R或M；X6是I或L；X8是Y或A；和X9是T、I和N；除了CDR‑H2不能是Y‑I‑S‑S‑G‑G‑G‑G‑T‑Y‑Y‑P‑D‑T‑V‑K‑G (SEQ ID NO: 18)；CDR‑H3不能是G‑G‑V‑T‑K‑G‑Y‑F‑D‑V (SEQ ID NO: 19)；CDR‑L1不能是R‑A‑S‑G‑N‑I‑H‑N‑Y‑L‑T (SEQ ID NO: 20)；CDR‑L2不能是N‑A‑K‑T‑L‑A‑D (SEQ ID NO: 21)；和CDR‑L3不能是Q‑H‑F‑W‑S‑I‑P‑Y‑T (SEQ ID NO: 22)。...

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：C吴，DJ安布罗西，C谢，T哈于尔，
申请(专利权)人：ABBVIE公司，
类型：发明
国别省市：美国;US