本发明专利技术提供了一种饲料用抗菌肽脱霉剂及其制备方法和动物饲料添加剂,其中,饲料用抗菌肽脱霉剂包括酵母细胞壁和抗菌肽。本发明专利技术的脱霉剂的酵母细胞壁成分主要是葡萄糖甘露聚糖的化学结构与同样属于有机类的霉菌毒素的亲和性非常优良,能够形成较好的亲和吸附,相比无机的吸附剂,具有更好的吸附亲和能力;并且联合抗菌肽使用,在吸附的同时用抗菌肽进行增强杀菌,提升脱霉剂的效果,并且抗菌肽在家畜使用后对已经产生的免疫抑制有修复作用;整体上本发明专利技术的脱霉剂可同时具有杀霉、脱霉、吸附及修补多重功效。本发明专利技术进一步还提出包含有上述饲料用抗菌肽脱霉剂的动物饲料添加剂。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于动物饲料添加剂
,具体涉及一种饲料用抗菌肽脱霉剂及其制 备方法和动物饲料添加剂。
技术介绍
在畜牧业养殖中,长期存在的问题是饲料的存放中的微菌毒素污染;动物食用被 污染的饲料后,造成养殖动物出现免疫抑制、下痢、母猪流产、仔猪假发情等问题。而面对这 一问题,由于饲料的种植生产中与所生长的气候环境等相关,无法从源头保证隔绝微菌的 污染;因此在这一情形下,多采用添加吸附剂这一物理吸附的方式来有效解决饲料污染的 问题。其中,物理吸附的方式多采用"微菌毒素吸附剂"对饲料中的微菌毒素进行吸附去除, 以降低微菌毒素在养殖中的上述毒害。 常用的"微菌毒素吸附剂"有水和硅酸铝、活性炭等等。这些吸附脱霉剂能在液相 下与微菌毒素形成稳定的键合,进行吸附;但是上述的常用吸附剂,仅能对于部分的微菌毒 素具有吸附效果,比如:无机吸附剂对黄曲毒素(AFL)的吸附效果佳,但是却对其他霉菌毒 素(FUM、F2、DON、T2等)的吸附效果非常低。这些吸附剂使用中吸附片面的原因在于,一 方面吸附效果优劣UI吸附材料的结构相关,譬如吸附空洞的大小、吸附结构本身的电荷分 布方式、有效吸附面积等等,无法保证与所有的微菌毒素相匹配;另一方面不同的吸附结构 与不同毒素具有不同的亲和性,而产生亲和性的差异影响因素有亲水性、疏水性、结构式与 电荷分布等等,因此手吸附自身这些性质的限制,也不可能全面地吸附所有的霉菌毒素。 因此,现有的"微菌毒素吸附剂"在使用中对多种微菌毒素的吸附效果较为片面, 不能满足大量去除微菌污染的需求,同时在使用中这些微菌毒素会使养殖的动物产生免疫 抑制,而采用吸附剂在吸附之后也不能对动物食用污染饲料已经产生的免疫抑制有良好的 缓解和修复的功能。
技术实现思路
本专利技术实施例的目的在于克服现有脱霉剂吸附效果片面且无法修复已经造成的 免疫抑制问题的上述不足,提供一种。 为了实现上述专利技术目的,本专利技术实施例的技术方案如下: 一种饲料用抗菌肽脱霉剂包括酵母细胞壁和抗菌肽。 本专利技术的脱霉剂的酵母细胞壁成分主要是葡萄糖甘露聚糖的化学结构与同样属 于有机类的霉菌毒素的亲和性非常优良,能够形成较好的亲和吸附,相比无机的吸附剂,具 有更好的吸附亲和能力;并且联合抗菌肽使用,在吸附的同时用抗菌肽进行增强杀菌,提升 脱霉剂的效果,并且抗菌肽在家畜使用后对已经产生的免疫抑制有修复作用;整体上本发 明的脱霉剂可同时具有杀霉、脱霉、吸附及修补多重功效。 基于上述目的,本专利技术进一步还提出上述饲料用抗菌肽脱霉剂的制备方法,包括 如下步骤: 将含有目的抗菌肽的编码基因与质粒重组,获得重组表达载体; 将所述重组表达载体导入酵母细胞中,形成酵母工程菌; 将所述酵母工程菌进行发酵培养,获取发酵产物; 将所述发酵产物进行自溶破壁、分离、纯化处理。 本专利技术的制备方法,采用构建酵母工程菌进行发酵生产的方式进行,发酵培养的 过程中工程菌大量表达抗菌肽,因此在最终的发酵培养产物中同时具备有酵母菌的细胞体 和抗菌肽的表达产物;然后使产物中的酵母菌的细胞体自容破壁之后,然后进行分离纯化 收集酵母细胞壁和抗菌肽,即可大量获得脱霉剂产品;相比现有需要从含量甚微的生物体 内进行提取的方式,可以适用于大量生产并且方法上可以一次制备得到两种成分,工艺方 法简单。 进一步本专利技术还提出包含有上述饲料用抗菌肽脱霉剂的动物饲料添加剂。 采用本专利技术的动物饲料添加剂中采用的脱霉剂为本专利技术的上述饲料用抗菌肽脱 霉剂,其添加至饲料中之后,对饲料中微菌毒素的吸附亲和能力有提升,提升了脱霉的效 果;并且还可同时具有杀霉及修补多重功效。【具体实施方式】 为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合实施例,对本专利技术 进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术,并不用于 限定本专利技术。 本专利技术实施例提供一种饲料用抗菌肽脱霉剂,包括酵母细胞壁和抗菌肽; 其中的酵母细胞壁本身成分主要是葡萄糖甘露聚糖的化学结构与同样属于有机类的 霉菌毒素的亲和性非常优良,能够形成较好的亲和吸附;相比无机的吸附剂,该种类型的 细胞壁吸附剂针对霉菌毒素所共有的表面有机结构进行,相对能弥补无机吸附剂的片面缺 点。同时,脱霉剂在酵母细胞壁吸附下混合抗菌肽,利用抗菌肽本身具有广谱抗菌活性的特 点,结合单纯的酵母细胞壁相对吸附广,在吸附的同时用抗菌肽进行增强杀菌,提升脱霉剂 的效果,并且抗菌肽在家畜使用后对已经产生的免疫抑制有修复作用;整体上本专利技术的脱 霉剂可同时具有杀霉、脱霉、吸附及修补多重功效。 其中,在本专利技术的上述脱霉剂中,抗菌肽由于本身是生物内在免疫的效应分子,在 生物体内含量甚微,从天然资源中提取成本高、得率低、工序繁琐,从生物体内直接提取大 量抗菌肽的生产不满足本专利技术中大量饲料中添加的使用需求。因此,基于上述目的,本专利技术 还提出一种能够满足上述饲料用抗菌肽脱霉剂大量制备的方法,包括如下步骤: S10,将含有目的抗菌肽的编码基因与载体重组,构建表达目的抗菌肽的重组表达载 体; S20,将步骤SlO所获得的重组表达载体导入酵母细胞中,形成酵母工程菌; S30,将步骤S20所获得的酵母工程菌进行发酵培养,获取发酵产物; S40,将步骤S30发酵培养所获得的含有酵母细胞菌体和工程菌表达产物的发酵产物 进行自溶破壁、分离、纯化后即可获得同时含有酵母细胞菌体和目的抗菌肽的产物,即得到 本专利技术的上述脱霉剂。 在上述整体制备的方法步骤的立意下,采用构建酵母工程菌进行发酵生产的方式 进行,发酵培养的过程中工程菌大量表达抗菌肽,因此在最终的发酵培养产物中同时具备 有酵母菌的细胞体和抗菌肽的表达产物;然后使产物中的酵母菌的细胞体自容破壁之后, 然后进行分离纯化收集酵母细胞壁和抗菌肽,即可大量获得脱霉剂产品。 进一步在上述整体的方法立意下,本专利技术中进一步根据本身酵母细胞所能够进行 非融合表达的特性,其中步骤SlO中构建的工程菌中表达的目的基因为抗菌肽IsCT编码基 因;本身IsCT是一种天然的α -螺旋抗菌肽,来源于马达加斯加黑爪蝎(Opisthacanthus madagascariensis),是抗菌肽中最短的多肽,仅由13个氨基酸残基(ILGKIWEGIKSLF)组 成,没有半胱氨酸,对哺乳动物和细菌细胞都有活性。本专利技术中进行采用是基于这个原因设 计的 IsCT 衍生物中的-IsCT(ILGKILKGIKKLF)中与 IsCT-样,对 E. coli, P. aeruginosa, S. trphimurium, S. epidermidis, S. aureus有相同的抑菌活性,同时当-IsCT浓度达到100 μ M时的溶血活性仅为20%,能够具备在饲料中添加使用的能力。 在上述情形下,本申请步骤SlO中针对采用的抗菌肽IsCT的表达,重组表达载体 的步骤可以包括如下: S11,根据酵母密码子的偏好性,设计上述IsCT表达的编码基因,该基因为具有序列表 SEQ. ID. No. 1的碱基序列的IsCT基因;【主权项】1. 一种饲料用抗菌肽脱霉剂,其特征在于,包括酵母细胞壁和抗菌肽。2. 如权利要求1所述的饲料用抗菌肽脱霉剂,其特征在于,所述抗菌肽为IsCT抗菌 肽。3. 如权本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种饲料用抗菌肽脱霉剂,其特征在于,包括酵母细胞壁和抗菌肽。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:詹士贤,
申请(专利权)人:深圳市圣西马生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:广东;44
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