一种处理HE染色后废酒精的还原液及其制备方法技术

一种处理HE染色后废酒精的还原液及其制备方法，所述还原液按重量份数计，由以下原料制成，硫酸铝钾8～10份、氯化钠0.5～0.9份、100％乙醇30～65份，蒸馏水100份。本发明专利技术还包括处理HE染色后废酒精的还原液的制备方法。本发明专利技术废酒精的还原液，能够将经过HE组织切片染色多次后、淘汰下来的废酒精，重复使用，不仅沉淀后各级浓度梯度的废酒精上清液制作出来的组织病理切片和新开瓶的酒精没有任何的区别；而且可使废酒精变废为宝，延长了酒精的使用寿命；也为实验室节约了实验经费，尤其是减少了环境的污染。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种处理废酒精的还原液及其制备方法，具体涉及一种处理HE染色后废酒精的还原液及其制备方法。
技术介绍
苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining)，简称HE染色法，是组织病理切片技术里常用的染色方法之一。其中，苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。HE染色法在理工类的科学实验中，尤其是生物类、病理类的科学实验中，是一种年轻而古老的技术，在国内外运用特别广泛。目前，在染色中需要用到大量的酒精来配制成不同浓度梯度的酒精，用于组织细胞的脱水和复水，切片染色时需要二十个左右的染色缸，来配制各级浓度梯度的酒精，而酒精使用几次后，就成了混悬液，无法重复使用，必须倒掉，这样一来，不但酒精使用成本高，而且造成了极大的浪费，还污染了环境。因此，迫切需要研宄一种可使HE染色后废酒精重复利用的还原液。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是，提供一种处理HE染色后废酒精的还原液及其制备方法，该还原液可处理废弃的酒精混悬液，使其重复利用。本专利技术解决其技术问题采用的技术方案是，本专利技术之一种处理HE染色后废酒精的还原液，按重量份数计，由以下原料制成，硫酸铝钾8?10份、氯化钠0.5?0.9份、100%乙醇30?65份，蒸馏水100份。进一步，按重量份数计，由以下原料制成，硫酸销钾10份、氯化钠0.89份、100%乙醇80份，蒸馏水100份。本专利技术之一种处理HE染色后废酒精的还原液的制备方法，包括下述步骤: (1)按配比准确称量硫酸铝钾、氯化钠，乙醇和蒸馏水。 (2)将氯化钠与蒸馏水配置成盐水，备用。 (3)将硫酸铝钾与步骤(2)备用的盐水加热至完全融化。 (4)加入乙醇混匀。 (5)静置1.5?2.5小时，过滤，取其上清液，即成。本专利技术废酒精的还原液，能够将经过HE组织切片染色多次后，淘汰下来的废酒精，重复使用，不仅沉淀后各级浓度梯度的废酒精上清液，制作出来的组织病理切片，和新开瓶的酒精，没有任何的区别；而且可使废酒精变废为宝，延长了酒精的使用寿命；也为实验室节约了实验经费，尤其是减少了环境的污染(废液填埋之地，寸草不生)。【附图说明】图1为脊髓4*10倍镜下加入还原液制作的切片图。 图2为脊髓10*10倍镜下加入还原液制作的切片图。 图3为脊髓40*10倍镜下加入还原液制作的切片图。 图4为脊髓4*10倍镜下废酒精制作切片图(带染色颗粒杂色背景)。 图5为脊髓10*10倍镜下废酒精制作切片图(带染色颗粒杂色背景)。 图6为脊髓40*10倍镜下废酒精制作切片图。(带染色颗粒杂色背景)。 图7为新酒精制作切片。 图8为废酒精制作切片。 图9为加入还原液后制作切片。图10为新酒精废酒精和加入了还原液制作的切片以及三种方法制作的切片对比照。【具体实施方式】 下面结合实施例对本专利技术进一步加以说明。实施例1:HE染色后废酒精还原液的制备 (1)准确称量:硫酸铝钾8g、氯化钠0.5g，蒸馏水100ml，乙醇100% 40ml ； (2)0.5g氯化钠加10ml蒸馏水配置成盐水； (3)Sg硫酸铝钾用盐水加热至完全融化； (4)加入100%乙醇40ml与前液混匀； (5)静置1.5小时，过滤，取其上清液； (6)倒入棕色广口瓶中，贴上标签，写好签名和日期，冰箱冷藏保存备用。实施例2:HE染色后废酒精还原液的制备 (1)准确称量:硫酸铝钾6g、氯化钠0.8g，蒸馏水100ml，乙醇100% 55ml ； (2)0.8g氯化钠加10ml蒸馏水配置成盐水； (3)6g硫酸铝钾用盐水加热至完全融化； (4)加入100%乙醇55ml与前液混匀； (5)静置2小时，过滤，取其上清液； (6)倒入棕色广口瓶中，贴上标签，写好签名和日期，冰箱冷藏保存备用。实施例3:HE染色后废酒精还原液的制备 (1)准确称量:硫酸铝钾9g、氯化钠0.7g，蒸馏水100ml，乙醇100% 65ml ； (2)0.7g氯化钠加10ml蒸馏水配置成盐水； (3)9g硫酸铝钾用盐水加热至完全融化； (4)加入100%乙醇65ml与前液混匀； (5)静置2.5小时，过滤，取其上清液； (6)倒入棕色广口瓶中，贴上标签，写好签名和日期，冰箱冷藏保存备用。实施例4:HE染色后废酒精还原液的制备 (1)准确称量:硫酸铝钾10g、氯化钠0.89g，蒸馏水100ml，100%乙醇80ml ； (2)0.89g氯化钠加10ml蒸馏水配置成盐水； (3)1g硫酸铝钾用盐水加热至完全融化； (4)加入100%乙醇80ml与前液混匀； (5)静置2小时，过滤，取其上清液； (6)倒入棕色广口瓶中，贴上标签，写好签名和日期，冰箱冷藏保存备用。实施例5:HE染色后废酒精还原液的使用 (1)收集棕色的酒精瓶，分别标明各级废酒精的浓度梯度； (2)收集HE染色数次淘汰下来的、不能使用的废酒精混悬废液，每瓶装500ml，按各级浓度梯度装入对应的棕色瓶中(注意染色过程中，染色架上的切片一定要不带液体进入下一个浓度梯度，一旦酒精浓度分不清了，加入了还原剂也不能再使用了)； (3)在每10ml废酒精中加入还原液3?5滴，静置2个小时； (4)打开瓶盖，倒出其上清液，使用，倒掉沉淀下来的混悬液大约50ml左右。经实验验证，沉淀后各级浓度梯度的废酒精上清液，制作出来的组织病理切片，和新开瓶的酒精没有任何的区别，组织经HE染色后，细胞核和胞质内的嗜碱性物质被苏木精染成蓝紫色，细胞质基质和间质内的胶原纤维被伊红染成深浅不同的粉红色，色彩鲜艳、对比明显，载玻片特别的干净透明，没有任何的染料和杂色背景，利于学生显微镜下观察和区另IJ，例如脊髓在镜下4*10倍、10*10倍、40*10倍、切片图，见图1、2、3。而用废酒精染色出来的切片，背景有很多的染料附着和深浅不一的杂色背景，且掉片和组织不全严重，98%属于废片，影响学生读片观察，附:对比照(从废片里面选的相对好的切片拍照:4*10倍、10*10倍、40*10倍镜下切片图，见图4、5、6。附更直观的手机照片:见图7、8、9、10，进一步加以说明(新酒精制作切片、废酒精制作切片、加入还原液后制作切片及三种酒精制作切片对比照)。【主权项】1.一种处理HE染色后废酒精的还原液，其特征在于，按重量份数计，由以下原料制成，硫酸铝钾8?10份、氯化钠0.5?0.9份、100%乙醇30?65份，蒸馏水100份。2.根据权利要求1所述的处理HE染色后废酒精的还原液，其特征在于，按重量份数计，由以下原料制成，硫酸铝钾10份、氯化钠0.89份、100%乙醇80份，蒸馏水100份。3.一种如权利要求1或2所述生物处理HE染色后废酒精的还原液的制备方法，其特征在于，包括下述步骤: (1)按配比准确称量硫酸铝钾、氯化钠，乙醇和蒸馏水。 (2)将氯化钠与蒸馏水配置成盐水，备用。 (3)将硫酸铝钾与步骤(2)备用的盐水加热至完全融化。 (4)加入乙醇混匀。 (5)静置1.5?2.5小时，过滤，取其上清液，即成。【专利摘要】一种处理HE染色后废酒精的还原液及其制本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种处理HE染色后废酒精的还原液，其特征在于，按重量份数计，由以下原料制成，硫酸铝钾8～10份、氯化钠0.5～0.9份、100％乙醇30～65份，蒸馏水100份。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：廖秋萍，李莲瑞，高庆华，石长青，王艳萍，冯昕炜，郑海川，
申请(专利权)人：塔里木大学，
类型：发明
国别省市：新疆;65