一种麒麟菜多肽提取物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开一种麒麟菜多肽提取物及其制备方法和应用，本发明专利技术从麒麟菜原料中制得一种多肽提取物，通过实验证明该提取物具有很好的抗血小板聚集，延长出血时间和凝血时间，抑制血栓形成的新性能，可以将该提取物应用于制备抗血小板聚集或抗血栓的药物、药物组分、药物前体或保健品。

【技术实现步骤摘要】

 本专利技术属于生物
，具体涉及一种麒麟菜多肽提取物及其制备方法和应用。
技术介绍
麒麟菜（Eucheuma），也叫鸡脚菜、鸡胶菜，属藻类的藻体肥厚多肉，圆柱状，扁压或扁平，辐射或两侧分枝，该属约有20种 ，中国约有5种 ，为热带性海藻，具有很高的药用价值。 麒麟菜多肽组份来源于麒麟菜。血栓性疾病是一类严重影响健康的疾病，常表现为心肌梗死、缺血性脑梗死、静脉血栓栓塞。目前临床上治疗血栓性疾病的药物主要分为抗血小板类药物、抗凝血药物和溶血栓药物。抗血小板类药物具有抑制血小板的粘附、聚集和释放功能，从而防止血栓形成。抗血小板药物可以有效地防止心血管疾病的发生，并可延长患者的生存期，抗血小板药物在临床应用日益广泛。从天然活性物质中寻找新的抗血小板药物是筛选新型抗血小板聚集药物或药物前体的一个重要策略。而目前暂无文献报道麒麟菜多肽组份抗血栓的功能，在国内外均未发现用麒麟菜多肽组份作抗血栓药物或保健品使用的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服上述现有技术的不足，提供一种麒麟菜多肽提取物及其制备方法。本专利技术的另一个目的是公开一种麒麟菜多肽提取物的新用途，改麒麟菜多肽提取物能够显著地抑制血小板聚集，防止血栓形成。本专利技术的上述目的通过如下技术方案予以实现：一种麒麟菜多肽提取物的制备方法，具体步骤如下：S1. 取新鲜麒麟菜粉碎，加入浓度为15~25 mmol/L 的HCl溶液匀浆制得粗制液，所述HCl溶液的加入量按每千克麒麟菜加入8~12 L；S2. 粗制液中加入适量饱和氯化钾溶液（20℃条件下，饱和氯化钾溶液的质量浓度约为25%），至氯化钾的浓度为1.3~1.8%，将粗制液的粘度适度降低，便于后续处理；S3. 将步骤S2的粗制液离心分离，取上清液，上清液粗过滤后采用凝胶柱层析分离，使用浓度为15~25 mmol/L 的HCl溶液洗脱，洗脱峰有两组；S4. 收集第二组洗脱产物，调节溶液酸碱度至pH值6.0~7.0后，离心分离，上清液冷冻干燥制得所需提取物。优选地，所述凝胶柱层析采用的凝胶柱为葡聚糖G-50凝胶柱（Sephadex G-50）。更优选地，所述葡聚糖G-50凝胶柱的柱高为28~32 cm，内径宽度为1.8~2.2cm。优选地，所述凝胶柱层析分离时，粗制液的上样高度为凝胶柱柱高的5~10%。优选地，所述凝胶柱层析分离时，洗脱液的流速控制为0.8~1.2 mL/min。所述上清液粗过滤具体为采用2~4层纱布过滤，所述纱布为本领域过滤常用的纱布。步骤S1或S3所述离心分离为低速离心分离，具体离心的转速为8000~12000转/min，离心时间为13~18 min。一种通过本专利技术所述制备方法制得的麒麟菜多肽提取物。本专利技术通过简单实验，如十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）证实提取物是单一电泳条带，主要成分为分子量低于10 KDa的多肽组份。麒麟菜多肽提取物在制备抗血小板聚集或抗血栓药物中的应用。麒麟菜多肽提取物在制备抗血小板聚集或抗血栓保健品中的应用。本专利技术通过实验测试，发现麒麟菜多肽提取物具有抑制血小板聚集，延长出血时间和凝血时间，抑制血栓形成的新性能，可以应用于制备抗血栓药物或保健品，用于防止血栓造成的心肌梗死、缺血性脑梗死、静脉血栓栓塞等。本专利技术所述麒麟菜多肽提取物的具体使用形式包括以下几种：1、可制成粉剂，用生理盐水溶解口服；2、可制成注射针剂，按注射针剂要求使用；3、可制添加糖饮料，制成口服液产品。本专利技术对所述麒麟菜多肽提取物的使用条件无特殊要求，可在室温条件下使用，剂量约为：10~400 μg/kg/每天，按蛋白多肽组份类食品或药物的条件使，同时参照目前市面的抗血栓药物和保健品的适用范围。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术成功从麒麟菜原料中制得多肽提取物，通过实验证明该提取物具有很好的抗血小板聚集，延长出血时间和凝血时间，抑制血栓形成的新性能，可以将该提取物应用于制备抗血小板聚集或抗血栓的药物、药物组分、药物前体或保健品。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的解释说明，但具体实施例并不对本专利技术作任何限定。除非特别说明，实施例中所涉及的试剂、方法均为本领域常用的试剂和方法。实施例1  麒麟菜多肽提取物的制备（1）称取20g 麒麟菜机械粉碎，用160 mL 25 mmol/L的HCl溶液匀浆制得粗制液。（2）粗制液较粘稠，加入适量的饱和氯化钾溶液（20℃条件下，饱和氯化钾溶液的质量浓度约为25%）到粗制液中，使得氯化钾的浓度为1.3%。（3）将步骤（2）的粗制液离心分离（8000转/min，离心18 min），收集上清液，用三层纱布过滤上清液后，采用葡聚糖G-50凝胶柱层析分离，凝胶柱的柱高为28 cm，内径宽度为1.8 cm，上样高度为凝胶柱柱高的5%。待平衡后，使用浓度为25 mmol/L的HCl溶液洗脱，洗脱液的流速控制为0.8 mL/min，得到两组洗脱峰。（4）收集第二组洗脱产物，调节溶液酸碱度至pH值6.0~7.0后，离心分离（8000转/min，离心18 min），取上清液冷冻干燥，制得麒麟菜多肽提取物。采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）证实本实施例制得的麒麟菜多肽提取物是单一电泳条带，主要成分为分子量低于10 KDa的多肽组份。实施例2  麒麟菜多肽提取物的制备（1）称取200g 麒麟菜机械粉碎，用2200 mL 15 mmol/L的HCl溶液匀浆制得粗制液。（2）粗制液较粘稠，加入适量的饱和氯化钾溶液到粗制液中，使得氯化钾的浓度为1.8%。（3）将步骤（2）的粗制液离心分离（12000转/min，离心13 min），收集上清液，用三层纱布过滤上清液后，采用葡聚糖G-50凝胶柱层析分离，凝胶柱的柱高为32 cm，内径宽度为2.2 cm，上样高度为凝胶柱柱高的7%。待平衡后，使用浓度为15 mmol/L的HCl溶液洗脱，洗脱液的流速控制为1.2 mL/min，得到两组洗脱峰。（4）收集第二组洗脱产物，调节溶液酸碱度至pH值6.0~7.0后，离心分离（12000转/min，离心13 min），取上清液冷冻干燥，制得麒麟菜多肽提取物。采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）证实本实施例制得的麒麟菜多肽提取物是单一电泳条带，主要成分为分子量低于10 KDa的多肽组份。实施例3  麒麟菜多肽提取物的制备（1）称取1000g 麒麟菜机械粉碎，用10 L 20 mmol/L的HCl溶液匀浆制得粗制液。（2）粗制液较粘稠，加入适量的饱和氯化钾溶液到粗制液中，使得氯化钾的浓度为1.5%。（3）将步骤（2）的粗制液离心分离（10000转/min，离心15 min），收集上清液，用三层纱布过滤上清液后，采用葡聚糖G-本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种麒麟菜多肽提取物的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：S1. 取新鲜麒麟菜粉碎，加入浓度为15~25 mmol/L 的HCl溶液匀浆制得粗制液，所述HCl溶液的加入量按每千克麒麟菜加入8~12 L；S2. 粗制液中加入适量饱和氯化钾溶液至氯化钾的浓度为1.3~1.8%；S3. 将步骤S2的粗制液离心分离，取上清液，上清液粗过滤后采用凝胶柱层析分离，使用浓度为15~25 mmol/L 的HCl溶液洗脱，洗脱峰有两组；S3. 收集第二组洗脱产物，调节溶液酸碱度至pH值6.0~7.0后，离心分离，上清液冷冻干燥制得所需提取物。

【技术特征摘要】
1.一种麒麟菜多肽提取物的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：
S1. 取新鲜麒麟菜粉碎，加入浓度为15~25 mmol/L 的HCl溶液匀浆制得粗制液，所述HCl溶液的加入量按每千克麒麟菜加入8~12 L；
S2. 粗制液中加入适量饱和氯化钾溶液至氯化钾的浓度为1.3~1.8%；
S3. 将步骤S2的粗制液离心分离，取上清液，上清液粗过滤后采用凝胶柱层析分离，使用浓度为15~25 mmol/L 的HCl溶液洗脱，洗脱峰有两组；
S3. 收集第二组洗脱产物，调节溶液酸碱度至pH值6.0~7.0后，离心分离，上清液冷冻干燥制得所需提取物。
2. 根据权利要求1所述麒麟菜多肽提取物的制备方法，其特征在于，所述凝胶柱层析采用的凝胶柱为葡聚糖G-50凝胶柱。
3. 根据权利要求2所述麒麟菜多肽提取物的制备方法，其特征在于，所述葡聚糖G-50凝胶柱的柱高为28~32 cm，内径宽度为1.8~2...

【专利技术属性】
技术研发人员：张海涛，林向阳，刘彬，伍俊，
申请(专利权)人：张海涛，
类型：发明
国别省市：广东;44