FOXM1 肽和包含FOXM1 肽的药剂制造技术

本发明专利技术的目的是通过如下提供对于日本约30％的以高水平表达叉头框M1(FOXM1)的各种类型的癌症患者实现癌症免疫治疗的手段：鉴定可结合于HLA‑A2的源自FOXM1的肽以活化可杀死癌细胞的人杀伤T细胞。具体公开的是选自如下(A)或(B)项的肽：(A)包括SEQ ID NO:1至3中任一个所示的氨基酸序列的肽，和(B)在包括SEQ ID NO:1至3中任一个所示的氨基酸序列的肽中取代、缺失、插入和/或添加一个、两个或数个氨基酸残基并且具有诱导细胞毒(杀伤)T细胞的活性的肽。

【技术实现步骤摘要】
本申请是中国申请200880112387.2的分案申请，该母案的国际申请日为2008年8月12日，本分案采用了与该母案一致的专利技术名称。
本专利技术涉及作为针对高表达叉头框M1(FOXM1)的癌症(如胆管癌、肺癌和胰腺癌)的疫苗有用的新肽，和包含这些肽的用于治疗和预防肿瘤的药物。
技术介绍
在日本，胆管癌(胆囊癌和胆管癌)死亡的数目正在增加，在2005年，有16,586人死于此癌。在大多数胆管癌病例中，在早期不存在主观症状。与消化道腔体内形成的癌症(如胃癌和结肠癌)相比，胆管癌的准确的显示和诊断显影(diagnostic imaging)是困难的。因此，胆管癌难以早期检测，当胆管癌被发现时，癌症往往已经发展并无法切除。除外科治疗之外，还进行放疗和化疗以治疗胆管癌，但它们疗效不佳，因此亟需建立新的治疗方法。在日本，肺癌死亡的数目也在增加，在2005年，有62,063人死于此癌。目前日本癌症死亡中肺癌占19.0％，并已成为2000年以来癌症死亡的首要原因。吸烟被认为是肺癌发生的最大原因。除吸烟外，吸入石棉或氡气也被认为引起肺癌。作为预防肺癌的措施，人们倡导戒烟和进行健康检查。然而，尽管吸烟人群在日本正在减少，但2005年仍估计有大约3千万人。此外，最近已证明，健康检查中广泛进行的简单胸部X-光显影和痰液测试对于肺癌的早期检测无效，而且它们并不导致癌症死亡的减少。考虑到上述情况，预期肺癌死亡的数目在未来会持续增加。肺癌的症状包括咳嗽、血痰、呼吸急促和胸痛，但在大多数情况下，症状在早期不存在。在很多病例中当症状出现时癌症已经发展。为此，当最先发现癌症时，一半以上的患者是不能手术治疗的，因此肺癌被看作难治性癌症中的一种。手术后恢复率不像其他癌症那么好，而且手术后的总的五年存活率仅不及50％。在近年来，随着以手术切除为中心，结合放疗、化疗等的多科性治疗的进步，早期肺癌的五年存活率正在增加；然而，晚期肺癌的治疗效果没有很大的改进，而且亟需建立新的治疗策略。在日本，胰腺癌死亡的数目正在增加，在2005年，有22,927人死于此癌。目前，日本癌症死亡中胰腺癌占7.0％，在肺癌、胃癌、结肠癌和肝癌后排名第五位。胰腺癌没有特异性的症状，而且在很多病例中，当症状出现时，癌症已经发展。即使是诊断显影发展的今天，全日本胰腺癌患者中大约40％属于具有远端转移的晚期病例，而且发现很多患者具有不能切除的局部发展的癌症。因此，患者总的五年存活率是5％以下，而且诊断后的预后非常差。由于诊断中的难度，胰腺癌发病作为癌症死亡的原因特别是发达国家中正逐渐增加。当先，虽然以手术切除为中心，结合放疗、化疗等的多科性治疗正在开展，但是在治疗效果方面没有明显的改进，亟需建立新的治疗策略。已显示胰腺癌的发病要因涉及多种因素，如生活习惯(包括吸烟、肥胖、饮食、饮酒和喝咖啡)，以及慢性胰腺炎、糖尿病、遗传因素等。在另一个方面，分子生物学和肿瘤免疫学的近期发展阐明，细胞毒性(杀伤)T细胞和辅助T细胞可识别癌细胞中特异性高表达的蛋白质被降解而产生、并经由HLA分子被呈递到癌细胞或抗原呈递细胞的表面的肽，并引起免疫反应以破坏癌细胞。此外，已经鉴定了许多源自这些细胞的、能刺激这样的免疫反应以攻击癌症的肿瘤抗原蛋白质和肽，而且抗原特异性肿瘤免疫治疗正在得到临床应用。HLA I类分子在身体的所有有核细胞的表面上表达。它结合于细胞质或细胞核中产生的蛋白质在胞内降解所产生的肽，并表达在细胞表面。在正常细胞的表面，源自正常自体蛋白质的肽结合于HLA I类分子，并且不被免疫系统的T细胞识别和破坏。在另一个方面，在形成癌症的过程中，癌细胞有时大量表达在正常细胞中几乎不表达或略微表达的蛋白质。此时HLA I类分子结合于癌细胞内特异性高表达的蛋白质胞内降解而产生的肽，然后在癌细胞的表面上表达肽，于是杀伤T细胞识别并仅破坏癌细胞。通过将所述癌症-特异性抗原或肽施用于个体，可破坏癌细胞且可抑制癌生长而不伤害正常细胞。这称为使用癌症-特异性抗原的癌症免疫疗法。HLA II类分子主要在抗原呈递细胞的表面上表达。所述分子结合于源自癌症-特异性抗原的肽，其通过胞内降解由细胞外并入抗原-呈递细胞的癌症-特异性的抗原而产生，然后在细胞的表面上表达肽。识别它们的辅助T细胞被活化，并通过产生活化其他免疫活性细胞的多个细胞因子来诱导或增强针对肿瘤的免疫反应。因此，如果开发靶向在癌症中特异性高表达的抗原的免疫疗法，这样的疗法可有效地仅仅消灭癌症，而不引起对正常自体组织的任何有害事件。还期望的是疗法可用于其他治疗均无能为力的任何末期癌症患者。此外，通过将癌症特异性抗原和肽作为疫苗预先施用于具有发生癌症的高风险的个体，可预防癌症的发生。本专利技术人首先使用cDNA微阵列对27,648个人基因进行了全基因组基因表达分析，以研究这些基因在25个肝内胆管癌病例中和在多个正常器官(包括它们在胚胎期)的表达谱(expression profile)。结果，本专利技术人发现叉头框M1(FOXM1)(GenBank登录号NM_202003)在许多肝内胆管癌病例的组织中非常高度表达。类似于且除肝内胆管癌之外，还发现FOXM1在几乎所有的肺癌、膀胱癌和胰腺癌病例中高度表达。此外，FOXM1的高表达见于多种癌症如子宫颈癌(cervical cancer)、卵巢癌、恶性淋巴瘤(malignant lymphoma)、乳腺癌、胃癌、食道癌、前列腺癌、肝细胞癌、结肠癌和慢性髓细胞性白血病的40％以上病例中。这些事实提示FOXM1可在多种癌症中作为癌症-特异性抗原。FOXM1在胚胎肝中并在正常成人器官中表达，其在消化道如胃、小肠和大肠、胸腺和睾丸中轻微表达；然而，表达水平明显低于癌部分。提示FOXM1与癌症发病和细胞增殖调节有关的文件的实例包括非专利文件1至10。然而，这些文件都没有描述FOXM1作为针对癌症的疫苗的用途。[非专利文件1]Yoshida Y,Wang I-C,Yoder HM,Davidson NO,Costa RH.:The forkhead box M1transcription factor contributes to the development and growth of mouse colorectal cancer.Gastroenterology 132:1420-1431,2007.[非专利文件2]Gusarcova GA,Wang I-C,Major 本文档来自技高网...

【技术保护点】
下面(A)或(B)的肽：(A)包含SEQ ID NO:2或3氨基酸序列的肽；(B)包含SEQ ID NO:2或3氨基酸序列的肽，其中取代、缺失、插入和/或添加一个、两个或数个氨基酸，并且其中所述肽显示细胞毒性(杀伤)T细胞诱导活性。

【技术特征摘要】
2007.08.20 JP 214001/071.下面(A)或(B)的肽：
(A)包含SEQ ID NO:2或3氨基酸序列的肽；
(B)包含SEQ ID NO:2或3氨基酸序列的肽，其中取代、缺失、插入和
/或添加一个、两个或数个氨基酸，并且其中所述肽显示细胞毒性(杀伤)T细
胞诱导活性。
2.权利要求1的肽，其中自N末端起第二个氨基酸是亮氨酸或甲硫氨
酸。
3.权利要求1或2的肽，其中C-末端氨基酸是缬氨酸或亮氨酸。
4.一种用于诱导针对癌症的免疫力的试剂，其包含一种或多种权利要求
1的肽作为活性成分。
5.一种用于治疗和/或预防癌症的药剂，其包含一种或多种权利要求1
的肽作为活性成分。
6.一种用于诱导显示细胞毒性(杀伤)T细胞诱导活性的抗原呈递细胞
的药剂，其中所述药剂包含一种或多种权利要求1的肽作为活性成分。
7.一种用于诱导显示细胞毒性(杀伤)T细胞诱导活性的抗原呈递细胞
的药剂，其中所述药剂包含一种或多种编码权利要求1的肽的多核苷酸作为
活性成分。
8.一种用于诱导细胞毒性(杀伤)T细胞的药剂，其中所述药剂包含一种
或多种权利要求1的肽作为活性成分。
9.针对权利要求1的肽的抗体。
10.使用权利要求1的肽诱导的细胞毒性(杀伤)T细胞、辅助T细胞或
包含它们的免疫细胞群体。
11.一种抗原呈递细...

【专利技术属性】
技术研发人员：西村泰治，横峰和典，角田卓也，中村佑辅，
申请(专利权)人：肿瘤疗法科学股份有限公司，
类型：发明
国别省市：日本;JP