GFRα3的人抗体及其使用方法技术

本发明专利技术提供了与人GFRα3结合的抗体以及使用其的方法。根据本发明专利技术的某些实施方式，所述抗体是与人GFRα3结合的全人源抗体。本发明专利技术的抗体用于治疗与一种或多种GFRα3的生物学活性相关的疾病或病症，包括治疗急性或慢性疼痛状况或炎症状况。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】GFRa3的人抗体及其使用方法 专利
本专利技术涉及与人胶质细胞系来源的神经营养因子（GDNF)家族受体a3(GFRa3) 特异性地结合的人源抗体和人源抗体的抗原结合片段，以及使用这些抗体的治疗方法。 相关领域的声明 胶质细胞系来源的神经营养因子相关家族由胶质细胞系来源的神经营养因子 (GDNF)、neurturin(NRTN)、artemin(ARTN)和persephin(PSPN)组成。GDNF家族的各个 成员均与锚定于与质膜结合的受体的糖基磷脂酰肌醇（GPI)结合。这一家族的受体被称 为⑶NF家族受体a(GFRa)。这一受体家族由四个不同的GFRa受体组成，GFRal-4。 ⑶NF优先与GFRa1结合、NRTN优先与GFRa2结合、ARTN优先与GFRa3结合和PSPN优 先与GFRa4结合。各GDNF家族配体均通过RET( "在转染期间被重排的"）受体酪氨酸激 酶传递信号，RET受体酪氨酸激酶是首个发现的原癌基因。仅当所述配体先与其GFRa受 体结合的条件下RET才能够被⑶NF家族成员活化（Airaksinen，M.S.等，NatureReviews Neuroscience(2002)，3:383-394) 〇ARTN和GFRa3均在发育过程中高表达并且其参与交感神经系统的发育。在成人 中，GFRa3的表达主要局限于背根神经节（DRG)的感受神经元（Orozco,O.E.等，European J.Neuroscience, (2001)，13:2177-2182)。在成年小鼠中，artemin在睾丸、子宫、甲状腺、 前列腺和附睾以及在嗅球和肠道和肠系膜的小动脉中表达（Airaksinen，M.S.等，Nature ReviewsNeuroscience(2002), 3:383-394 ；Airaksinen,M.S.等，Brain,Behaviorand Evolution, (2006) ,68:181-190)。 已在若干研宄中显示了GFRa3和artemin在痛觉过敏中可能的作用。例如，已 证实将artemin蛋白注射进入嗤齿动物的后爪会引起热痛觉过敏，当artemin与NGF共同 注射时这一伤害感受增强（Malin，S.A?等，J.Neuroscience, (2006) ,26 (33): 8588-8599)。 其他研宄显示在小鼠炎症模型中arteminmRNA的表达上调（Elitt，C.M.等，J.Neuro science, (2006)，26(33) :8578-8587)。而且，其他研宄显示artemin转基因小鼠TRPV1 和TRPA1的表达增加并且其对冷和热的行为敏感性增加（Elitt，C.M.等，J.Neuroscien ce, (2006)，26 (33) : 8578-8587)。此外，已通过在GFRa3敲除小鼠中的研宄显示了GFRa3 在内脏高敏感性中可能的作用，在使用TNBS(2, 4, 6-三硝基苯磺酸）灌肠处理后与野生 型C57BL/6小鼠相比这些小鼠显示出内脏高敏感性的降低（Tanaka,T.等，Am.J.Physiol. Gastrointest.LiverPhysiol. (2011)，300:G418-G424)。还通过一项在接受了膜头切除的 患者中进行的研宄显示了artemin及其受体GFRa3在与胰腺炎相关的疼痛中可能的作用 (Ceyhan，G. 0?等，Gut, (2007)，56:534-544)。基于上述情况，获准进行进一步的研宄，以确 定使用GFRa3活性抑制剂的治疗是否对患有疼痛/痛觉过敏和/或高敏感性的患者可能 是有益的。 在US6, 861，509中描述了结合GFRa3的抗体。此外，US6, 677, 135中披露了全长 的GFRa3 序列，而在US7,026, 138、US2007/0232535 和US2006/0216289 中描述了GFRa3 分子的剪接变体。US7, 138, 251中披露了与全长的GFRa3具有99%-致性的序列并且在 这篇专利中描述了针对这一分子的人源化单克隆抗体的制备。 专利技术简沐 在第一个方面，本专利技术提供了全人源单克隆抗体（mAb)及其抗原结合片段，所述 全人源单克隆抗体及其抗原结合片段与人GFRa3结合并抑制或阻断其活性，例如阻断 GFRa3与胶质细胞系来源的神经营养因子artemin的结合，并且可能阻断RET受体酪氨酸 激酶随后的活化和/或阻断通过RET介导的信号和/或阻断通过RET以外的其他介质介导 的信号。所述抗体或其抗原结合片段可以用于治疗针对任意感官刺激导致的痛觉过敏、异 常疼痛和/或高敏感性，包括但不限于压力、热和/或冷。所述抗体还可以用于治疗与广泛 的状况和病症相关的疼痛/高敏感性，在所述状况和病症中需要阻断GFRa3与artemin的 相互作用。所述抗体还可以用于抑制肿瘤细胞生长、增殖和/或转移。 在一个实施方式中，本专利技术提供了一种分离的抗体或其抗原结合片段，所述抗体 或其抗原结合片段特异性地与人GFRa3结合并且具有一个或多个下述特征： ⑴通过表面等离子体共振测定显示出的Kd范围为约10,至约1(T13M; (ii)显示出将GFRa3与其配体artemin的结合阻断约50-100%的能力，其IC5Q 值范围为约40pM至约15nM; (iii)显示出将GFRa3与使用artemin和RET的混合物涂覆的固体支持物的结合 阻断约20 %至约100%的能力； (iv)阻断或抑制artemin依赖性RET的活化，其IC5Q范围为约200pM至约50nM ; (v)在骨癌疼痛体内模型中抑制或减轻一种或多种疼痛感受性反应； (vi)在体内抑制或减轻artemin敏感性热痛觉过敏； (vii)在骨关节炎体内模型中抑制或减轻触诱发痛； (viii)不与RET的其他GFR共受体发生交叉反应； (ix)包含重链可变区（HCVR)，所述重链可变区具有选自下组的氨基酸序列：SEQ IDN0 :2、18、34、50、66、82、98、114、130、146、162、178、194、210、226、242、258、274、290、 306、322、338、354、381和 397;或 (x)包含轻链可变区（LCVR)，所述轻链可变区具有选自下组的氨基酸序列：SEQID NO:10、26、42、58、74、90、106、122、138、154、170、186、202、218、234、250、266、282、298、314、 330、346、362、389 和 405。 在一个实施方式中，所述分离的单克隆抗体或其抗原结合片段选自下组：鼠源性 抗体、嵌合抗体、人源化抗体和人源抗体。 在一个实施方式中，所述分离的单克隆抗体或其抗原结合片段不与人GFRa 1或 人GFRa 2发生交叉反应。 在一个实施方式中，所述分离的单克隆抗体或其抗原结合片段包含（a)重链可变 区（HCVR)，所述重链可变区具有选自下组的氨基酸序列：SEQIDN0:2、18、34、50、66、82、 98、114、130、146、162、178、194、210、226、242、258、274、290、306、3本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段特异性地与GFRα3结合，所述抗体或其抗原结合片段具有一个或多个下述特征：(i)通过表面等离子体共振测定显示出的KD范围为约10‑8M至约10‑13M；(ii)显示出将GFRα3与其配体artemin的结合阻断约50‑100％的能力，其IC50值范围为约40pM至约15nM；(iii)显示出将GFRα3与使用artemin和RET的混合物涂覆的固体支持物的结合阻断约20％至约100％的能力；(iv)阻断或抑制artemin依赖性RET的活化，其IC50范围为约200pM至约50nM；(v)在骨癌疼痛体内模型中抑制或减轻一种或多种疼痛感受性反应；(vi)在体内抑制或减轻artemin敏感性热痛觉过敏；(vii)在骨关节炎体内模型中抑制或减轻触诱发痛；(viii)不与RET的其他GFR共受体发生交叉反应；(ix)包含重链可变区(HCVR)，所述重链可变区具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：2、18、34、50、66、82、98、114、130、146、162、178、194、210、226、242、258、274、290、306、322、338、354、381和397；或(x)包含轻链可变区(LCVR)，所述轻链可变区具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：10、26、42、58、74、90、106、122、138、154、170、186、202、218、234、250、266、282、298、314、330、346、362、389和405。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏珊·D·柯罗，黎恩·麦克当诺，安德鲁·J·墨菲，
申请(专利权)人：瑞泽恩制药公司，
类型：发明
国别省市：美国;US