本发明专利技术公开了辛基葡聚糖微球及其制备方法和蛋白吸附应用，采用葡聚糖微球为主体，利用辛基缩水甘油醚和葡聚糖微球反应，以实现辛基对葡聚糖微球上官能团的改性，以辛基葡聚糖多孔微球作为包覆载体，利用多孔微球的吸附作用吸附蛋白，其蛋白吸附量为32.5～110.1mg/g。本发明专利技术制备多孔微球所需成本较低，且微球制备工艺简单，容易操作，所得微球的蛋白吸附量大，具有良好的蛋白吸附性能。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药
，更加具体地说，涉及一种吸附蛋白的微球及其制备方 法，特别是一种具有亲水性、生物相容性和可生物降解性高分子材料吸附牛血清白蛋白 (BSA)微球及其制备方法。
技术介绍
蛋白质的吸附一般在液固界面上进行，蛋白质与吸附介质间的相互作用是实现吸 附与分离的依据，主要分为以下三类：物理吸附、化学吸附以及离子交换。其中物理吸附的 原理是基于范德华力，即吸附剂与溶质之间的分子间力，溶质在吸附剂上吸附与否以及吸 附量的多少，主要取决于吸附剂与溶质之间极性的相似性以及溶剂的极性。一般而言，物理 吸附发生在吸附剂的整个表面，被吸附的溶质可通过改变溶剂的pH值以及盐浓度等物理 条件洗脱。物理吸附通常较温和，因而能用于蛋白质等生物物质的分离纯化。本文所合成 的葡聚糖微球对蛋白质的吸附主要通过物理吸附实现的。 吸附平衡行为是评价吸附剂性能的重要指标。常见的用于描述吸附行为的吸附 模型主要有Langmuir型、Henry型、Freundlich型和Toth型等。当液固两相间蛋白质分 子分配达到平衡，流动相中蛋白质平衡浓度很低时，溶质分配系数可近似看作一个常数， Langmuir模型常被用来描述这种吸附平衡。该模型建立在Langmuir单分子层吸附的理论 基础上，其要点是：吸附剂上具有活性点，每个活性点仅能吸附一个分子，而被吸附的分子 间无相互作用。其方程如下：【主权项】1. 辛基葡聚糖微球，其特征在于，利用辛基缩水甘油醚和葡聚糖微球反应，以实现辛基 对葡聚糖微球上官能团的改性，按照下述步骤进行： 步骤1，将葡聚糖溶于去离子水中作为水相，将环氧氯丙烷和司班溶于液体石蜡中作为 油相；加热至70°C时，将水相加入油相中搅拌均匀，然后加入氢氧化钠水溶液，反应2小时 后升温至90°C，固化5小时后停止反应，将所得产物过滤，洗漆，真空抽滤，其中葡聚糖使用 量为5质量份，葡聚糖使用量为3质量份，环氧氯丙烷使用量为5-6质量份，水相和油相的 体积比为1 :5 ; 步骤2,将步骤1制备的葡聚糖微球和辛基缩水甘油醚混合，在碱性条件pH为10 -12， 温度为60~80°C下反应4~9h制备辛基葡聚糖微球，葡聚糖使用量为1一3质量份，辛基 缩水甘油醚使用量为葡聚糖微球质量的5%~17. 5%; 步骤3,将步骤2制备的辛基葡聚糖微球浸泡在环己烷中，通过辛基和环己烷的相互作 用以及环己烷的挥发，制备辛基葡聚糖多孔微球。2. 根据权利要求1所述的辛基葡聚糖微球，其特征在于，在所述步骤1中，将5g葡聚糖 溶于IOml去离子水中搅拌至透明作为水相；5ml环氧氯丙烷和3g司班80溶解于50ml液 体石蜡中作为油相；水浴加热至70°C时，将油相加入到三口瓶中进行搅拌，然后加入水相 进一步搅拌均匀；加入质量分数50%的NaOH溶液3ml，反应2小时后升温至90°C，固化5小 时后停止反应；将所得产物过滤，洗涤，真空抽滤。3. 根据权利要求1所述的辛基葡聚糖微球，其特征在于，在所述步骤2中，所述辛基缩 水甘油醚使用量为葡聚糖微球质量的10 -15%，使用Imol/mL氢氧化钠水溶液4mL为体系 提供喊性条件。4. 根据权利要求1所述的辛基葡聚糖微球，其特征在于，在所述步骤3中，将步骤2制 备的辛基葡聚糖微球浸泡在10~30ml有机溶剂环己烷中，通过辛基和有机溶剂的相互作 用以及溶剂的挥发，制备辛基葡聚糖多孔微球。5. 辛基葡聚糖微球的制备方法，其特征在于，按照下述步骤进行： 步骤1，将葡聚糖溶于去离子水中作为水相，将环氧氯丙烷和司班溶于液体石蜡中作为 油相；加热至70°C时，将水相加入油相中搅拌均匀，然后加入氢氧化钠水溶液，反应2小时 后升温至90°C，固化5小时后停止反应，将所得产物过滤，洗漆，真空抽滤，其中葡聚糖使用 量为5质量份，葡聚糖使用量为3质量份，环氧氯丙烷使用量为5-6质量份，水相和油相的 体积比为1 :5 ; 步骤2,将步骤1制备的葡聚糖微球和辛基缩水甘油醚混合，在碱性条件pH为10 -12， 温度为60~80°C下反应4~9h制备辛基葡聚糖微球，葡聚糖使用量为1一3质量份，辛基 缩水甘油醚使用量为葡聚糖微球质量的5%~17. 5% ; 步骤3,将步骤2制备的辛基葡聚糖微球浸泡在环己烷中，通过辛基和环己烷的相互作 用以及环己烷的挥发，制备辛基葡聚糖多孔微球。6. 根据权利要求5所述的辛基葡聚糖微球的制备方法，其特征在于，在所述步骤1中， 将5g葡聚糖溶于IOml去离子水中搅拌至透明作为水相；5ml环氧氯丙烷和3g司班80溶解 于50ml液体石蜡中作为油相；水浴加热至70°C时，将油相加入到三口瓶中进行搅拌，然后 加入水相进一步搅拌均匀；加入质量分数50%的NaOH溶液3ml，反应2小时后升温至90°C， 固化5小时后停止反应；将所得产物过滤，洗涤，真空抽滤。7. 根据权利要求5所述的辛基葡聚糖微球的制备方法，其特征在于，在所述步骤2中， 所述辛基缩水甘油醚使用量为葡聚糖微球质量的10 -15 %，使用Imol/mL氢氧化钠水溶液 4mL为体系提供碱性条件。8. 根据权利要求5所述的辛基葡聚糖微球的制备方法，其特征在于，在所述步骤3中， 将步骤2制备的辛基葡聚糖微球浸泡在10~30ml有机溶剂环己烷中，通过辛基和有机溶 剂的相互作用以及溶剂的挥发，制备辛基葡聚糖多孔微球。9. 如权利要求1一4之一所述的辛基葡聚糖微球在吸附蛋白质领域的应用。10. 根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述蛋白质为牛血清白蛋白。【专利摘要】本专利技术公开了，采用葡聚糖微球为主体，利用辛基缩水甘油醚和葡聚糖微球反应，以实现辛基对葡聚糖微球上官能团的改性，以辛基葡聚糖多孔微球作为包覆载体，利用多孔微球的吸附作用吸附蛋白，其蛋白吸附量为32.5～110.1mg/g。本专利技术制备多孔微球所需成本较低，且微球制备工艺简单，容易操作，所得微球的蛋白吸附量大，具有良好的蛋白吸附性能。【IPC分类】B01J20-28, G01N21-33, B01J20-22, B01J20-30【公开号】CN104759255【申请号】CN201410008360【专利技术人】侯信, 王艳荣 【申请人】天津大学【公开日】2015年7月8日【申请日】2014年1月2日本文档来自技高网...
【技术保护点】
辛基葡聚糖微球，其特征在于，利用辛基缩水甘油醚和葡聚糖微球反应，以实现辛基对葡聚糖微球上官能团的改性，按照下述步骤进行：步骤1，将葡聚糖溶于去离子水中作为水相，将环氧氯丙烷和司班溶于液体石蜡中作为油相；加热至70℃时，将水相加入油相中搅拌均匀，然后加入氢氧化钠水溶液，反应2小时后升温至90℃，固化5小时后停止反应，将所得产物过滤，洗涤，真空抽滤，其中葡聚糖使用量为5质量份，葡聚糖使用量为3质量份，环氧氯丙烷使用量为5—6质量份，水相和油相的体积比为1：5；步骤2，将步骤1制备的葡聚糖微球和辛基缩水甘油醚混合，在碱性条件pH为10—12，温度为60～80℃下反应4～9h制备辛基葡聚糖微球，葡聚糖使用量为1—3质量份，辛基缩水甘油醚使用量为葡聚糖微球质量的5%～17.5%；步骤3，将步骤2制备的辛基葡聚糖微球浸泡在环己烷中，通过辛基和环己烷的相互作用以及环己烷的挥发，制备辛基葡聚糖多孔微球。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：侯信，王艳荣，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：天津;12
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