本发明专利技术公开了九龙藤总黄酮的一种新用途，其在制备防治冠心病药物中的应用。发明专利技术人通过科学研究发现，九龙藤防治冠心病的有效成分为黄酮类，因此，首先制得九龙藤总黄酮，再将其制成片剂、颗粒剂或口服液等剂型。经研究表明，九龙藤总黄酮可增加抗氧化力，减少CK-MB、iNOS、TNF-α、MPTP含量（活性），减轻心肌损伤；上调mTOR、P-Akt，下调Cyt-C、c-fos、CaSR、LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达；上调PI3K，下调Beclin-1、Caspase-3基因表达，抑制细胞凋亡和再灌注期自噬发生，显示出良好的抗冠心病作用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药新用途，具体是。
技术介绍
冠心病是危害人类健康的主要疾病之一，主要表现为心肌梗死和心绞痛，其死亡 率居我国人口死亡率第四位，并有患者年轻化趋势，提高冠心病的防治水平势在必行。随着 静脉溶栓、经皮冠状动脉腔内成形术及冠状动脉搭桥手术等技术方法治疗急性心肌梗死的 广泛开展，急性心肌梗死患者的预后得到明显改善，但是随之而来的心肌缺血/再灌注损 伤（myocardial ischemia/ reperfusion injury，MIRI)却严重制约着上述方法的救治成 功率，减轻MIRI是冠心病防治中亟待解决的重要问题。从来源广泛的天然药物中提取分离 活性成分，探讨其对MIRI的作用及机制，进而寻找有效的防治冠心病的药物，是目前该领 域研宄的热点。 九龙藤（别名过岗龙、过江龙等）系豆科羊蹄甲属植物龙须藤 的干燥藤莖，是一种广西民族特色中草药，在我国东南沿海亦 有广泛分布，植物资源丰富。其性平、味苦辛、无毒，富含黄酮、皂苷成分，具有祛风除湿、活 血止痛、健脾理气功效，用于风湿关节炎、腰腿痛、跌打损伤、胃及十二指肠溃疡等(广西壮 族自治区壮药质量标准(第一卷）.南宁：广西科学技术出版社，2008,11)。 目前，已公开的与九龙藤有关的专利文献总计80多条，多集中于用九龙藤全草组 方进行胃病、骨质增生、骨损伤、风湿性关节炎等的治疗，至今未见到用从九龙藤中提取的 活性成分防治冠心病的专利文献报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供九龙藤总黄酮的一种新用途。 本专利技术所提供的九龙藤总黄酮的新用途是九龙藤总黄酮在制备防治冠心病药物 中的应用；所述的九龙藤总黄酮是通过将九龙藤根茎粉碎，得到粗粉，用60%_80%乙醇水溶 液采用冷浸法提取8-10次，其料液比为1:8,合并提取液，回收溶剂，得浸膏悬浮于水中，用 5-8倍悬浮液体积的石油醚萃取，除色素、脂溶性成分，剩余水层用3-5倍水层体积的乙酸 乙酯萃取，萃取液挥干，浸膏用100~200目硅胶拌样，用硅胶柱色谱进行分离，用氯仿：甲 醇=9:1进行梯度洗脱，收集洗脱液挥干，再经聚酰胺树脂纯化，用50%-60%乙醇洗脱，洗脱 液减压浓缩，真空干燥制备得到。 所述的九龙藤总黄酮在制备防治冠心病药物中所占的比例为1. 0%~99. 5%，余量 为药剂成型辅料，可制成片剂、颗粒剂或口服液等剂型。 专利技术人通过科学研宄发现，九龙藤防治冠心病的有效成分为黄酮类，因此，首先制 得九龙藤总黄酮，再将其制成片剂、颗粒剂或口服液等剂型，其制备采用现有技术中相应剂 型的制法。 所述的九龙藤总黄酮片剂、颗粒剂是将九龙藤总黄酮打成细粉后与赋形辅料混匀 制成。 所述的九龙藤总黄酮口服液是取50%乙醇洗脱部位稀膏，加入白砂糖粉，溶解，混 匀制成。 本专利技术的技术方案述及了从九龙藤中提取具有抗冠心病作用的有效部位九龙藤 总黄酮的提取方法，将这一有效部位制备成中药制剂的方法，以及对这一中药制剂进行抗 冠心病动物实验的方法和结果。 本专利技术九龙藤总黄酮的制备方法简单，成本低。经动物实验表明，本专利技术的九龙藤 总黄酮具有保护心肌，减轻心肌缺血/再灌注损伤的作用，可用于制备防治冠心病的药物。【具体实施方式】 下面结合实施例对本
技术实现思路
作进一步的说明，但不是对本专利技术的限定。 实施例 1 :九龙藤总黄酮（Bauhinia championii (Benth)Benth flavones, BCF) 的提取将九龙藤根茎粉碎，得到粗粉，用80%乙醇水溶液采用冷浸法提取8次，其料液比为 1:8,合并提取液，回收溶剂，得浸膏悬浮于水中，用5倍悬浮液体积的石油醚萃取，除色素、 脂溶性成分，剩余水层用5倍水层体积的乙酸乙酯萃取，萃取液挥干，浸膏用200目硅胶拌 样，以硅胶柱色谱进行分离，用氯仿：甲醇=9:1进行梯度洗脱，收集洗脱液挥干，再经聚酰 胺树脂纯化，以50%乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩，真空干燥制得九龙藤总黄酮，黄酮含量为 64.8 % (以芦丁计)。 实施例2 :将九龙藤总黄酮制备成药物 (1)按有效部位的得率计算，取相当于1000 g九龙藤生药的九龙藤总黄酮，约重22g，加 淀粉至总量l〇〇g，制粒，压成片剂，素片重〇. 3g，每片含九龙藤生药2. 3g。 (2)按有效部位的得率计算，取相当于1000 g九龙藤生药的九龙藤总黄酮，约重 22g，加蔗糖粉与糊精的混合物至总量500g，制粒，得颗粒剂，分装，每小包5g，每小包含九 龙藤生药l〇g。 (3)按有效部位的得率计算，取相当于1000 g九龙藤生药的50%乙醇洗脱部位稀 膏，体积350ml，加白砂糖300g，食用白酒50mL，加热溶解，最后加水到1000ml，过滤，得口服 液，分装，每支l〇ml，每支含九龙藤生药10g。 实施例3 :九龙藤总黄酮对垂体后叶素致大鼠急性心肌缺血的保护作用 1材料 I. 1动物SPF级SD大鼠48只，S，体重250-300g，购于桂林医学院实验动物中心，试 验动物生产许可证（SCXK桂2009-0002)。 1.2药物与试剂九龙藤总黄酮(总黄酮含量以芦丁计为64. 8%);垂体后叶素 (pit，南京新百药业有限公司，批号H32026638);盐酸维拉帕米片（天津中央药业有限 公司，批号130301) JRIZOL-A+总RNA提取试剂（天根生化科技有限公司，货号DP421); FastQuant CDNA第一条链合成试剂盒(天根生化科技有限公司，货号KR106) ;RT-PCR试剂 盒（TaKaRa，货号DRR096A);DNA Marker I (北京艾德莱生物科技有限公司，货号DM06)。 1.3仪器小动物呼吸机DW-3000 (上海嘉鹏科技有限公司）；冷冻离心机 MikRro220R (美国Beckman公司）JY300C电泳仪(北京君意东方电泳设备有限公司）； TOO-Thermal Cycler PCR仪(美国BIO- RAD公司）;培清JS-780全自动凝胶成像分析仪(上 海培清有限公司）。 2?方法 2.1分组及给药随机分为生理盐水、模型、阳性药维拉帕米（8mg/kg)、九龙藤总黄酮 低、中、高剂量（60、120、240mg/kg)共6组（n = 8)。各组连续灌胃给药7d，于末次给药 后40 min.舌下静脉注射垂体后叶素（0.75U/kg)建立急性心肌缺血模型。 2. 2指标检测取缺血区心肌组织，以RT-PCR法测定Cyt-C、c-fos及CaSR的基 因表达。 2. 3数据处理应用SPSS 21.0统计软件进行数据处理，计量资料以（ I?土 s)表示，组间比较采用方差分析，组内比较采用t检验，P〈0. 05为有统计学意义。 3?结果 如表1所示，模型组大鼠Cyt-C、c-f〇s及CaSR基因表达明显高于正常生理盐水组(均 产〈0.01)，说明造模成功；九龙藤总黄酮低、中、高剂量组大鼠心肌组织Cyt-C、c-fos及 CaSR基因表达均明显低于模型组，具显著性差异（产〈0.05或产〈0.01)，表明九龙藤总黄 酮通过影响凋亡相关基因表达而抑制心肌细胞凋亡，抗心肌缺血损伤。 表1九龙藤总黄酮对心肌缺血大鼠Cyt-C、c-fos及CaSR基因表达的影响（土^1， n = 8)〇【主权项】1.本文档来自技高网...
【技术保护点】
九龙藤总黄酮在制备防治冠心病药物中的应用，其特征是：所述的九龙藤总黄酮是通过将九龙藤根茎粉碎，得到粗粉，用60%‑80%乙醇水溶液采用冷浸法提取8‑10次，其料液比为1:8，合并提取液，回收溶剂，得浸膏悬浮于水中，用5‑8倍悬浮液体积的石油醚萃取，除色素、脂溶性成分，剩余水层用3‑5倍水层体积的乙酸乙酯萃取，萃取液挥干，浸膏用100～200目硅胶拌样，用硅胶柱色谱进行分离，用氯仿:甲醇=9:1进行梯度洗脱，收集洗脱液挥干，再经聚酰胺树脂纯化，用50%‑60%乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩，真空干燥制备得到。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：简洁，林炜鑫，高杰，方瑜，孙瑶，张婵，廖平，
申请(专利权)人：桂林医学院，
类型：发明
国别省市：广西;45
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。