本发明专利技术公开了一株低温好氧反硝化菌及其应用。一株低温好氧反硝化菌Pseudomonas brassicacearum subsp.brassicacearum BW0806，保藏编号为：CCTCC NO: M 2015094。该菌株能够在10-15℃生长，并在好氧、低碳氮比条件下实现反硝化。在15℃，初始硝酸盐浓度为30mg/L的好氧条件下（DO>2mg/L），该菌72h硝酸盐与总氮的去除率达到100%。该低温好氧反硝化菌株适用于低温、好氧条件下进行富营养化水体及含氮废水的反硝化脱氮处理。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于环境微生物、环境工程
，涉及一株低温好氧反硝化菌 Pseudomonasbrassicacearumsubsp.brassicacearumBW0806及其在低温富营养化水体 及含氮废水中的脱氮应用。
技术介绍
水体中的氮过度积累会造成了水体富营养化现象，严重危害生态系统安全。水体 脱氮的方法主要有物理法、化学法和生物法。相较于物理化学方法，生物法具有处理成本 低、无二次污染等优点，所以一般采用生物法进行废水脱氮。 低温环境下的污水治理一直是水治理领域的热点和难点。低温对于菌体反硝化有 显著的抑制作用，有研宄表明温度每降低1°C，反硝化速率则降低9%，U.Welander等也研 宄了 了低温3~20°C下的反硝化工艺的运行性能，在:TC下反应器的反硝化速率仅为15°C 下的55%。目前的研宄更建议使用低温菌在低温环境下提高氮的去除。因此，筛选出高效 的低温反硝化细菌，更科学合理地利用低温菌资源，增强其在低温污水处理和水环境修复 方面的应用是十分必要的。 近年来，好氧反硝化脱氮技术成为国内外废水脱氮新的发展方向，较传统厌氧反 硝化脱氮有着先天的优势。目前，有关低温好氧反硝化菌的报道较少，中国专利文献号 CN102690 765A公布日2012. 9. 26,公开了一株耐冷假单胞菌Den-03及其应用，该耐低温菌 在低温条件下能够较好地脱除总氮。从自然界中筛选出的能够高效脱除污水中硝酸盐的低 温反硝化菌对冬季富营养水体及含氮废水的处理有着很好的实际应用价值。
技术实现思路
本专利技术的目的在于，针对低温、好氧环境下硝酸盐污水脱氮困难的问题，提供一株 低温好氧反硝化细菌，该细菌已于2015年3月9日送至中国典型培养物保藏中心进行保 藏，分类命名：Pseudomonasbrassicacearumsubsp.brassicacearumBW0806,保藏编号 为：CCTCCN0:M2015094,地址：中国武汉武汉大学。 本专利技术的另一个目的在于提供了一株低温好氧反硝化细菌在低温的富营养化水 体或含氮废水中进行生物强化脱氮中的应用。 为实现上述专利技术目的，本专利技术的技术方案如下：申请人从青海布哈河水体中采集样品，分离单菌落，于反硝化培养基中培养，通过 测定培养基中硝酸盐、亚硝酸盐、总氮的含量，最终获得了一株低温好氧反硝化菌，该细 菌已于2015年3月9日送至中国典型培养物保藏中心进行保藏，分类命名：Pseudomonas brassicacearumsubsp.brassicacearumBW0806,保藏编号为：CCTCCN0:M2015094,地 址：中国武汉武汉大学。 所述的低温好氧反硝化菌为革兰氏阴性菌，适应生长温度为10~15°C。在LB固 体培养基中培养，其菌落形态为：表面光滑，黄白色。生理生化特征为：好氧，氧化酶阳性， 过氧化氢酶阳性，具有硝酸盐还原能力。 所述的LB固体培养基组成为：胰蛋白胨10g，NaCl10g，酵母提取物5g，琼脂粉 15g，溶于1000mL蒸馏水中，调节PH7. 0。 所述的反硝化培养基组成为：KN030. 5g;KH2P041g;MgS04 ? 7H20 0.lg;NH4C1 0. 2g;乙酸钠4g，微量元素溶液2ml溶于lOOOmL蒸馏水中，调节PH7. 2。微量元素溶 液组成：EDTA50g;CaC125. 5g;ZnS042. 2g;MnC12 ? 4H20 5. 06g;FeS04 ? 7H20 5g; (NH4) 6M〇702 ? 4H20 1.lg;CuS04 ? 5H20 1. 57g,CoC12 ? 6H20 1. 61g，溶于lOOOmL蒸馏水 中；PH7. 2。 本专利技术提供的的低温好氧反硝化菌在温度为15°C时，在初始N03M为80mg/L的反 硝化培养基中培养，8d后硝酸盐的降解率为100%，总氮的降解率约97%。10°C的培养温度 下在反硝化培养基中8d后硝酸盐的降解率为100%，总氮的降解率约60%。在30°C的生长 及反硝化情况不及低温条件，属于嗜低温菌。本专利技术中的低温好氧反硝化菌适应低碳氮比（C/N= 2~10)，特别是在C/N= 5， 15°C、硝酸盐初始浓度为80mg/L的培养条件下，3d内硝酸盐能够被完全降解，总氮含量降 解约95%。 本专利技术中的低温好氧反硝化菌适应好氧环境，在15°C、硝酸盐初始浓度为80mg/ L，溶氧量>2mg/L，C/N= 5的培养条件下，4d内硝酸盐能够被完全降解，总氮含量降解约 82 %，较厌氧环境能够更好地生长及反硝化反应。 本专利技术中的低温好氧反硝化菌在15°C、C/N= 5的好氧条件（溶氧量>2mg/L)下 能够负荷高浓度的硝酸盐，硝酸盐初始浓度为300mg/L的反硝化培养基中，72h硝酸盐去除 率约为75%。在硝酸盐初始浓度为160mg/L的中浓度反硝化培养基中72h能够去除100% 的硝酸盐。在硝酸盐初始浓度为30mg/L的较低浓度反硝化培养基中72h能够去除100%的 硝酸盐及总氮含量。 一种低温好氧反硝化菌在低温的富营养化水体或含氮废水中进行生物强化脱氮 中的应用，将低温好氧反硝化菌BW0806培养至对数增长期，以104~10 6cfu/mL的投菌量投 入富营养化水中，能够有效降解富营养化水中的硝酸盐、总氮含量及C0D。 以上所述的应用中，优选的，将水体中的环境人工调整至C/N= 2~10。 与现有技术相比，本专利技术具有以下优点： (1)在低温15°C，初始硝酸盐浓度为30mg/L的好氧条件下，低温好氧反硝化菌 Pseudomonasbrassicacearumsubsp.brassicacearumBW080672h内能够降解100%的硝 酸盐及总氮含量，达到低温条件下硝酸盐及总氮的高效脱除。 (2)本专利技术中的低温好氧反硝化菌属于嗜低温菌，适应10~15°C的生长环境，为 冬季河流湖泊、排放污水的脱氮提供新的思路，打破生物法低温治理污水的局限性。 (3)本专利技术中的低温好氧反硝化菌能够在低碳氮比的培养条件下大量繁殖，为污 水治理降低了成本。 (4)本专利技术中的低温好氧反硝化菌适应好氧条件，具有应用于富营养化水体以及 在好氧污水处理池中联合硝化细菌进行同步硝化-反硝化的潜力。 (5)本专利技术中的低温好氧反硝化菌应用于富营养化水中，能够在低温条件下有效 脱氮以及降解C0D。【具体实施方式】 以下结合实施例对本说明进行进一步的说明，但本专利技术使用范围不仅限于此。 实施例1: 低温好氧反硝化菌的获得： A.从青海布哈河水体中采集样品，分离单菌落并鉴定。 B.将A步骤分离到的菌株于15°C牛肉膏蛋白胨液体培养基培养，得到在15°C能够 生长的低温菌。 C.将B步骤筛选出的低温菌接种于反硝化培养基中，15°C培养，通过测定培养基 中硝酸盐、亚硝酸盐、总氮的含量，来判断筛选高效的低温反硝化菌。 最终获得了一株低温反硝化菌，该细菌已于2015年3月9日送至中国典型培养 物保藏中心进行保藏，分类命名：Pseudomonasbrassicacearumsubsp.brassicacearum BW0806,保藏编号为：CCTCCN0:M2015094,地址：中国武汉武汉大学。本文档来自技高网...
【技术保护点】
一株低温好氧反硝化菌,其特征在于：所述的低温好氧反硝化菌的分类命名为Pseudomonas brassicacearum subsp. brassicacearum BW0806，保藏编号为：CCTCC NO: M 2015094。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王慧，梁运祥，陈正军，吴定心，赵述淼，张会，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42
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