一种糖基化多肽及其制备方法和其应用技术

本发明专利技术公开了一种糖基化多肽及其制备方法和其应用。该糖基化多肽的结构式如式Ⅰ所示：式Ⅰ中X基团优选抗HIV多肽T-20，Y选自任意糖链化合物，Z优选为含巯基的半胱氨酸。本发明专利技术的部分糖基化多肽与T-20相比，抗HIV活性增强，体内半衰期延长、药效长、稳定性高。本发明专利技术公开的多肽定点糖基化修饰方法，可在温和的反应条件下进行，方法简单高效。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物制药领域，具有涉及一种抗HIV多肤及其制备方法和其用途。
技术介绍
从1981年美国首次发现并报导艾滋病至今，艾滋病的防治一直没有得到有效解 决。艾滋病由人类免疫缺陷病毒（HIV)感染引起，目前上市的HIV的治疗性药物多为针对 病毒逆转录酶、整合酶、蛋白酶等的一些小分子酶抑制剂，由于HIV的超高突变性，使得该 些小分子特效药物正在逐渐退化为常效、甚至无效药物。近年来，随着HIV入侵宿主细胞分 子机制的逐步阐明，抑制该过程的多肤药物逐渐成为艾滋病防治领域的研究热点，该种多 肤药物可特异性结合HIV囊膜上的融合蛋白从而抑制病毒进入宿主细胞，瑞± Roche和美 国Trimeris公司共同研制的T-20 (商品名：化zeon)是目前唯一上市的抗HIV多肤药物， 与传统的小分子抗HIV药物相比较，T-20具有很强的对抗突变株的能力，且无毒副作用，自 2003年上市至今已在艾滋病治疗中占有不可替代的位置。 近年来，随着生物技术的快速发展，越来越多的多肤药物在疾病的预防和治疗中 得到应用。虽然多肤类药物的作用位点专一、疗效确切，但溶解度低、免疫原性高、易被蛋白 酶降解和被肾脏清除等缺陷严重地制约了其临床应用。抗HIV多肤也存在同样问题，T-20 注射后很快会被患者体内血浆蛋白酶降解，患者通常需要1天多于2次的注射治疗，在美国 注射T-20-年要花费两万美元，在欧洲一年要花费两万五千美元，昂贵的药费使得T-20的 应用受到极大限制。因此，研究并建立延长T-20和皿212体内半衰期、提高其生物利用率 的化学修饰方法与技术对于抗HIV多肤药物的临床应用至关重要。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种糖基化多肤及其制备方法和其应用。 本专利技术提供的一种糖基化多肤，具有式I所示结构：【主权项】1. 一种糖基化多肽，具有式I所示结构：式I中，X为1)或2)所述的多肽：1)具有序列表中SEQ ID Ns . 1所示的氨基酸序列 的多肽；2)将序列表中的SEQ ID N2 . 1的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取 代和/或缺失和/或添加且具有抗HIV活性的由1)衍生的多肽；Y取代基选自式II所示取 代基，式II中R取代基选自任意糖取代基，a和b为大于零的整数；式I中Z选自含有巯基的氨基酸；m为O或I ;n为O或I ;p为O或I ;q为O或I ;p和 q不同时为〇 ;m和η不同时为O ;p为O时，m也为O ;q为O时，η也为O ;优选的，式I中m 为O或l;n为O或l;p为O或l;q为O或l;p和q不同时为1或0;m和η不同时为O或 I ;ρ为O时，m也为O ;q为O时，η也为O ;再优选的，式I中m为I ;η为O ;ρ为I ;q为0。2. 根据权利要求1所述的糖基化多肽，其特征在于：所述式I中，Z选自半胱氨酸；Y取 代基中，式II中a为1，b为3。3. 根据权利要求2所述的糖基化多肽，其特征在于：所述式II中，R取代基选自乳糖 Lac取代基或唾液酸乳糖SiaLac取代基，所述SiaLac取代基的结构式为，式中的Ac表示乙 酰基：4. 一种多肽定点糖基化修饰方法，所述方法包括：将式III所示化合物同式IV所示化合 物反应即可：式III中，Y取代基选自式II所示取代基，式II中R取代基选自任意糖取代基，a和b为大 于零的整数；式IV中，X为1)或2)所述的多肽：1)具有序列表中SEQ ID Ns . 1所示的氨基酸序列 的多肽；2)将序列表中的SEQ ID N2 . 1的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取 代和/或缺失和/或添加且具有抗HIV活性的由1)衍生的多肽；Z选自含有巯基的氨基酸； P为O或I ;q为O或I ;p和q不同为0。5. 根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述式III所示化合物的制备方法为：将式 V所示化合物与式VI所示化合物反应生成式W所示化合物，式W所示化合物再与式VDI所示 化合物反应即得式III所示化合物；其中，式VDI所示化合物中R取代基选自任意糖取代基，a 为任意整数；式V和式W所示化合物中，b为任意整数：6. 根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于： 所述式IV中，Z选自半胱氨酸； 所述式III所示化合物的制备方法为：将化合物3与化合物11反应生成化合物4,化合 物4再与式IX所示化合物反应即得式III所示化合物；其中，式IX所示化合物中R取代基选自 任意糖取代基；所述方法制备得到的式III所示化合物的具体结构式如下所示，其中，R取代基选自任意 糖取代基：7. 根据权利要求4-6所述的方法，其特征在于：所述式II中，R取代基选自乳糖Lac取 代基或唾液酸乳糖SiaLac取代基，所述SiaLac取代基的结构式为，式中的Ac表示乙酰基：8. 根据权利要求4-7任一所述的方法，其特征在于：所述式III所示化合物同式IV所示 化合物反应的pH范围为7. 2-9. O ;优选7. 2、8. O或9. O ;最优选7. 2。9. 权利要求1-3任一所述的糖基化多肽或由权利要求4-9任一所述的方法制备得到的 糖基化多肽在制备下述至少一种产品中的应用： 1) 抗HIV产品； 2) 治疗和/或预防艾滋病的产品。10. 下述式W所示化合物、化合物4、化合物8或化合物10,其中，式W所示化合物中，b 为任意整数：或，式W所示化合物的制备方法，其中，式W所示化合物中，b为任意整数，所述制备方 法包括：将式V所示化合物与式VI所示化合物反应生成式W所示化合物；或，化合物4的制备方法，所述制备方法包括：将化合物3与化合物11反应生成化合物 4；或，化合物8或10的制备方法，所述制备方法包括：将化合物4与化合物7或化合物9 反应即得；或，式W所示化合物、化合物4、化合物8或化合物10在制备权利要求1-3任一所述的 糖基化多肽或权利要求10所述的糖基化多肽中的应用，其中，式W所示化合物中，b为任意 整数。【专利摘要】本专利技术公开了。该糖基化多肽的结构式如式Ⅰ所示：式Ⅰ中X基团优选抗HIV多肽T-20，Y选自任意糖链化合物，Z优选为含巯基的半胱氨酸。本专利技术的部分糖基化多肽与T-20相比，抗HIV活性增强，体内半衰期延长、药效长、稳定性高。本专利技术公开的多肽定点糖基化修饰方法，可在温和的反应条件下进行，方法简单高效。【IPC分类】C07H1-00, A61P31-18, C07H15-26, C07K1-107, C07K14-00, A61K38-16, C07D207-452, C08G65-00【公开号】CN104725484【申请号】CN201310704596【专利技术人】李学兵, 程水红, 马丽英, 邵一鸣 【申请人】中国科学院微生物研究所, 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心【公开日】2015年6月24日【申请日】2013年12月19日本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种糖基化多肽，具有式Ⅰ所示结构：式Ⅰ中,X为1）或2）所述的多肽：1）具有序列表中SEQ ID №.1所示的氨基酸序列的多肽；2）将序列表中的SEQ ID №.1的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有抗HIV活性的由1)衍生的多肽；Y取代基选自式Ⅱ所示取代基，式Ⅱ中R取代基选自任意糖取代基，a和b为大于零的整数；式Ⅰ中Z选自含有巯基的氨基酸；m为0或1；n为0或1；p为0或1；q为0或1；p和q不同时为0；m和n不同时为0；p为0时，m也为0；q为0时，n也为0；优选的，式Ⅰ中m为0或1；n为0或1；p为0或1；q为0或1；p和q不同时为1或0；m和n不同时为0或1；p为0时，m也为0；q为0时，n也为0；再优选的，式Ⅰ中m为1；n为0；p为1；q为0。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李学兵，程水红，马丽英，邵一鸣，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：北京;11