本发明专利技术公开了一种高精度MS培养基质的规模化制作方法，属于植物生物技术领域。首先计算基质所含的16种元素扩大1000倍后的需求量以及CuSO4·5H2O和CoCl2·6H2O扩大10000倍后的需求量；准确称取药品；将16种元素按照需求量的少多进行先后混合、密封；将CuSO4·5H2O和CoCl2·6H2O用1L蒸馏水溶解后备用；根据需要分别进行启封使用。通过该方法可制备的基质具有精度高、操作方便、快速、应用简单、不同批次以及批次内误差小的特点，尤其是避免了含量极少的药品CuSO4·5H2O和CoCl2·6H2O的称量误差，可运用于植物组织培养等生物技术用途。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术公开了一种高精度MS培养基质的规模化制作方法，属于植物生物
更具体地说是一种包括有准确计算、精确称量、先少后多地混合、密封、单独母液制备、启封使用等六个步骤，以期获得不同批次和批次之间误差极小的培养基质、减少试验误差的方法。
技术介绍
植物组织培养技术或无土栽培技术通常需要配制培养基母液，即配制扩大一定倍数、含有各种类型试剂的液体。然而，由于母液含有不同类型试剂，常常分为大量元素、微量元素、铁盐和有机元素四大类，而四大类所扩大的倍数不同，导致药品使用质量不一致，一则容易出现计算误差；二则药品的厂家、质量不一致，即使计算、称量一致，也会影响试验结果；三则由于母液为液体状态，在春夏之交季节，由于气温上升以及湿度增大，极其容易导致母液感染细菌、霉菌，导致母液中呈现不同颜色或出现沉淀的现象，浪费了原料；四则会因称量者对容器刻度的认知(尤其是微量元素)、仪器精密度的不同而出现较大误差。鉴于母液配制的上述缺点，用常规的母液配制培养基，常常会出现因称量者、药品、季节等因素而导致的试验结果失败或无法重复的现象，极大的影响了运用植物组织培养或无土栽培技术开展试验的进程，打击了试验者的信心。
技术实现思路
一种高精度MS培养基质的规模化制作方法，其特征在于，所述的方法中包括有准确计算、精确称量、先少后多地混合、密封、单独母液制备、启封使用等六个步骤。根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的六个步骤具体操作如下: ①准确计算:将MS基本培养基所含的16种元素扩大1000倍，即盐酸硫胺素0.1g, 二水钼酸钠0.25g，烟酸0.5g，盐酸吡哆醇0.5g，碘化钾0.83g，甘氨酸2g，硼酸6.2g，七水硫酸锌8.6g，四水硫酸锰22.3g，乙二胺四乙酸钠铁36.5g，肌醇100g，磷酸二氢钾170g，七水硫酸镁370g，二水氯化钙440g，硝酸铵1650g，硝酸钾1900g ；2种元素六水氯化钴和五水硫酸铜扩大10000倍，即各0.25g ； ②精确称量:按照①中计算的结果准确称量，尤其是要用万分之一天平准确称量各0.25g的六水氯化钴和五水硫酸铜； ③先少后多地混合:按照量的少多进行先后混合，即按照盐酸硫胺素，二水钼酸钠，烟酸，盐酸吡哆醇，碘化钾，甘氨酸，硼酸，七水硫酸锌，四水硫酸锰，乙二胺四乙酸钠铁，肌醇，磷酸二氢钾，七水硫酸镁，二水氯化钙，硝酸铵，硝酸钾的顺序混合均匀，共计4707.78g ; ④密封:将混合后的固体基质按照250g每瓶的要求分装于塑料容器中，并进行密封； ⑤单独母液制备:六水氯化钴和五水硫酸铜各称量0.25g，溶于IL蒸馏水中，配制成10000倍母液； ⑥启封使用:根据需要，每IL蒸馏水中加入准确称量的上述固体基质4.7g，加热待其完全溶解后加入10PL六水氯化钴和五水硫酸铜的单独母液，进而加入其它所需试剂即可。本专利技术的有益效果:该高精密度培养基质的规模化制作方法具有以下特点，即不同批次的基质之间无计算误差；由于16种试剂都扩大了 1000倍，2种试剂扩大了 10000倍，不同批次的基质之间的称量误差极小，精密度高；理论上，由于固体基质每次为1000倍的使用量(以每次IL计算)，即可以配制1000L的上述配方，液体母液每次仅需要ΙΟΟμ?，批次内部不会出现因为使用不同厂家、不同时期的试剂而导致的人为误差；扩大后的固体基质为每250g密封于一个塑料容器中，可避免因天气、温度、水分等外界因素影响导致出现液体母液常见的沉淀、发霉等现象，而液体基质仅为两种元素的混合。扩大10000倍后精密度高；上述的诸多优点都为以该培养基为基质开展的后续试验，获得准确的试验结果奠定基础O O【具体实施方式】: 下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步的描述。本实施例中一种高精度MS(含碳源和固定介质)固体培养基质的规模化制作方法，包括有准确计算、精确称量、先少后多地混合、密封、单独母液制备、启封使用等六个步骤。上述六个步骤具体操作如下: ①准确计算:将MS基本培养基所含的16种元素扩大1000倍，即盐酸硫胺素0.1g, 二水钼酸钠0.25g，烟酸0.5g，盐酸吡哆醇0.5g，碘化钾0.83g，甘氨酸2g，硼酸6.2g，七水硫酸锌8.6g，四水硫酸锰22.3g，乙二胺四乙酸钠铁36.5g，肌醇100g，磷酸二氢钾170g，七水硫酸镁370g，二水氯化钙440g，硝酸铵1650g，硝酸钾1900g ；2种元素六水氯化钴和五水硫酸铜扩大10000倍，即各0.25g ； ②精确称量:按照①中计算的结果准确称量，尤其是要用万分之一天平准确称量各0.25g的六水氯化钴和五水硫酸铜； ③先少后多地混合:按照量的少多进行先后混合，即按照盐酸硫胺素，二水钼酸钠，烟酸，盐酸吡哆醇，碘化钾，甘氨酸，硼酸，七水硫酸锌，四水硫酸锰，乙二胺四乙酸钠铁，肌醇，磷酸二氢钾，七水硫酸镁，二水氯化钙，硝酸铵，硝酸钾的顺序混合均匀，共计4707.78g ; ④密封:将混合后的固体基质按照250g每瓶的要求分装于塑料容器中，并进行密封； ⑤单独母液制备:六水氯化钴和五水硫酸铜各称量0.25g，溶于IL蒸馏水中，配制成10000倍母液； ⑥启封使用:根据需要，每IL蒸馏水中加入准确称量的上述固体基质4.7g，加热待其完全溶解后加入10PL六水氯化钴和五水硫酸铜的单独母液，进而加入其它所需试剂即可。将上述基质配制后的IL溶液加入30g的蔗糖和5g琼脂粉，进而加入Iml的IN的Κ0Η，溶解完全后分装于30个200ml的玻璃瓶中，121°C灭菌20min后。于超净工作台上接种甜叶菊茎段，25°C光照12h条件下培养20d后，生根良好。【主权项】1.一种高精度MS培养基质的规模化制作方法，其特征在于，所述的方法中包括有准确计算、精确称量、先少后多地混合、密封、单独母液制备、启封使用等六个步骤。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的六个步骤具体操作如下: ①准确计算:将MS基本培养基所含的16种元素扩大1000倍，即盐酸硫胺素0.1g, 二水钼酸钠0.25g，烟酸0.5g，盐酸吡哆醇0.5g，碘化钾0.83g，甘氨酸2g，硼酸6.2g，七水硫酸锌8.6g，四水硫酸锰22.3g，乙二胺四乙酸钠铁36.5g，肌醇100g，磷酸二氢钾170g，七水硫酸镁370g，二水氯化钙440g，硝酸铵1650g，硝酸钾1900g ；2种元素六水氯化钴和五水硫酸铜扩大10000倍，即各0.25g ； ②精确称量:按照①中计算的结果准确称量，尤其是要用万分之一天平准确称量各0.25g的六水氯化钴和五水硫酸铜； ③先少后多地混合:按照量的少多进行先后混合，即按照盐酸硫胺素，二水钼酸钠，烟酸，盐酸吡哆醇，碘化钾，甘氨酸，硼酸，七水硫酸锌，四水硫酸锰，乙二胺四乙酸钠铁，肌醇，磷酸二氢钾，七水硫酸镁，二水氯化钙，硝酸铵，硝酸钾的顺序混合均匀，共计4707.78g ; ④密封:将混合后的固体基质按照250g每瓶的要求分装于塑料容器中，并进行密封； ⑤单独母液制备:六水氯化钴和五水硫酸铜各称量0.25g，溶于IL蒸馏水中，配制成10000倍母液； ⑥启封使用:根据需要，每IL蒸馏水中加入准确称量的上述固体基质4.7g，加热待其完全本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种高精度MS培养基质的规模化制作方法，其特征在于，所述的方法中包括有准确计算、精确称量、先少后多地混合、密封、单独母液制备、启封使用等六个步骤。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：钱夕刚，
申请(专利权)人：钱夕刚，
类型：发明
国别省市：安徽;34
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