用于同时检测或定量多种目标物质的分析方法和分析试剂盒技术

技术编号:11650493 阅读:138 留言:0更新日期:2015-06-25 20:54
为了同时检测或定量多种目标物质,将来自探针微珠的信号光局部化。一种分析方法,其通过收容在单一容器内的、分别固定有用于捕获多种目标物质的多个载体发光,并从容器外部测定该发光,来同时检测或定量多种目标物质,其中,通过隔着滤光器来测定源自载体的发光,由此选择性地接受源自所需的载体的发光。一种分析试剂盒,其包括:分别固定有用于捕获多种目标物质的多个载体,和用于选择性地接受源自所需的载体的发光的滤光器,所述分析试剂盒用于通过收容在单一容器内的、分别固定有用于捕获多种目标物质的多个载体发光,并从容器外部测定该发光,来同时检测或定量多种目标物质。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于同时检测或定量多种目标物质的分析方法和分析试剂盒
技术介绍
作为用于同时检测多个分析对象的技术,开发了 BIST (Beads array In Single Tip)(非专利文献1)。BIST是指,在圆筒状的芯片(以下称为"毛细管")部分排列封 入有直径Imm的探针微珠的器件。所述探针微珠固定有与抗原、基因等测定对象物质 结合的抗体、抗原或者DNA片段等生物体分子。该BIST能够嵌合于Magtration装置 的喷嘴,因此能够使用与核酸提取相同的自动化装置(例如,Magtration(注册商标) System 6GC,Magtration (注册商标)System 12GC Plus (Precision system Science 公司 制))来进行杂交反应或抗原抗体反应和清洗操作。产生的信号可以利用扫描仪(例如, BISTnner(Precision system Science 公司制))进行检测。 BIST技术的最大特征在于,毛细管中配置有多个用于捕获不同目标物质的探针微 珠,能够实现多项目的同时检测。在应用到甲状腺刺激激素(TSH:thyroid stimulating hormone)、通过与其同时检验而临床上的有用性高的FT3 (Free Triiodo thyronine)、 FT4(Free thyroxine)的定量检验中,实用上所要求的检测浓度域涉及广范围(TSH: 0· 05-50uIu/mL,FT3 :0· 5-20pg/mL,FT4 :0· Ι-lOng/dL,以动态范围计为 IO3左右)。因此, 为了实现多项目同时检验,必须使来自各探针微珠的信号光(强度与目标物质的浓度成比 例地增加的光)局部化、并抑制与来自其他探针微珠的信号光的干渉。但是,至今为止,信 号光的局部化还不能说是充分达到的。 现有技术文献 非专利文献 非专利文献1 :遺伝子多型簡易測定法CMC出版刊"月刊八彳才彳y夂只卜y - 2008年9月号"
技术实现思路
专利技术要解决的课题 为了同时检测或定量多种目标物质,本专利技术的目的在于使来自探针微珠的信号光 局部化。 解决课题的方法 本专利技术人经过广泛深入的努力,结果发现,通过在BIST中隔着滤光器来测定来自 探针微珠的发光,能够选择性地接受来自所需的探针微珠的发光,并完成了本专利技术。 本专利技术的要旨如下所述。 (1) -种分析方法,其通过收容在单一容器内的、分别固定有用于捕获多种目标物 质的物质的多个载体发光,并从容器外部测定该发光,来同时检测或定量多种目标物质,其 中,通过隔着滤光器来测定源自载体的发光,由此选择性地接受源自所需的载体的发光。 (2)如⑴所述的方法,其中,滤光器设置于容器表面,或者容器本身为滤光器。 (3)如⑴或⑵所述的方法,其中,容器本身为滤光器。 (4)如⑴~⑶中任一项所述的方法,其中,使用测定对象的发光的波长区域中 的光线透射率为70 %以下的滤光器。 (5)如⑴~⑷中任一项所述的方法,其中,载体呈球状。 (6)如⑴~(5)中任一项所述的方法,其中,1维或2维地配置载体。 (7)如⑴~(6)中任一项所述的方法,其中,发光为化学发光或焚光,发光的波长 区域在340-900nm的范围内。 (8) -种分析试剂盒,其包括:分别固定有用于捕获多种目标物质的物质的多个 载体,和用于选择性地接受源自所需的载体的发光的滤光器,所述分析试剂盒用于通过收 容在单一容器内的、分别固定有用于捕获多种目标物质的物质的多个载体发光,并从容器 外部测定该发光,来同时检测或定量多种目标物质。 (9)如(8)所述的分析试剂盒,其中,容器本身为滤光器。 (10)如⑶或(9)所述的分析试剂盒,其中,发光为化学发光或焚光,发光的波长 区域在340-900nm的范围内。 专利技术效果 根据本专利技术,在同时检测或定量多种目标物质的体系中,能够使源自固定有用于 捕获目标物质的物质的探针微珠的信号光局部化,并抑制与源自其他探针微珠的信号光的 干渉。 本说明书包括作为本申请优先权基础的日本专利申请日本特愿2012 - 232488的 说明书和/或附图中记载的内容。【附图说明】 图1示出BIST毛细管内构成。 图2-1(左上)示出基于BIST的TSH(0. 5uIU/mL)测定中源自位于毛细管中央部 的探针微珠的发光峰。图2-2 (右上)示出基于BIST的TSH (25uIU/mL)测定中源自位于毛 细管中央部的探针微珠的发光峰。图2-3(下)示出毛细管材料的吸光度与信号光峰的值 的关系。 图3-1 (左上)是以峰值将图2-2的数据归一化并用log尺度显示纵轴的图表。 图3-2 (右上)示出毛细管材料的吸光度与峰宽度(纵轴为1/3, 000的宽度)的关系。图 3-3 (下)示出毛细管材料的吸光度和峰值与峰宽度之比(P/W比)的关系(将Abs = 0. 0 时的P/W比设为1,以相对P/W比进行绘图)。【具体实施方式】 以下对本专利技术的实施方式进行更详细的说明。 本专利技术提供一种分析方法,其通过收容在单一容器内的、分别固定有用于捕获多 种目标物质的物质的多个载体发光,并从容器外部测定该发光,来同时检测或定量多种目 标物质,其中,通过隔着滤光器来测定源自载体的发光,由此选择性地接受源自所需的载体 的发光。 对于容器而言,只要能够从容器外部测定发光,则可以为任意容器,但适合具有透 光性,优选树脂、玻璃等透射光的材质。另外,容器的形状没有特别限制,可以为细管、移液 管状等形状。例如,在BIST的情况下,容器为能够进行收容在内部的液体的吸引、吐出的圆 筒状芯片。 本专利技术的方法中,通过提高容器的透明度,能够降低信号光的扩散。容器的厚度 Imm的雾度值适合为20 %以下,优选为10 %以下,更优选为1 %以下。作为厚度Imm的雾度 值为20%以下的容器的材质,可例示:聚丙烯、聚碳酸酯、聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、环 状聚烯烃、聚甲基戊烯等。 雾度值为表示透明性的程度的值,JIS K7136中定义为扩散透射率与总光线透射 率之比。 另外,发光或放射的波长区域中的容器的折射率适合为1.6以下,优选为1.55以 下,更优选为1. 50以下。作为折射率为1. 6以下的容器的材质,可以例示:聚丙烯、聚碳酸 酯、聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、环状聚烯烃、聚甲基戊烯等。 目标物质可以为血液、血清、尿、淋巴液、口腔内粘膜、指甲、喀痰等生物体试样、河 水、湖水、海水、土壌等试样中含有的作为分析对象的物质。作为目标物质,可以例示:核酸、 蛋白质、抗原、抗体、酶、糖等生物体物质,沙门氏菌、大肠杆菌等细菌类,钴、铁、钼、铜、锌、 神、锦、I凡等金属等。 目标物质可以进行能够测定的标记,作为能够测定的标记,可以例示:荧光标记、 化学发光标记、电化学发光标记、酶标记、放射性标记、磁标记等。作为标记物质,可以例 示:海军蓝(Marine Blue)、级联蓝(Cascade Blue)、级联黄(Cascade Yellow)、焚光黄 (Fluorescein)、罗丹明(Rhodamine)、藻红蛋白(Phycoerythrin)、CyChrome、PerCP、德州 红(Texas Red)、别藻蓝蛋白(本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种分析方法,其通过收容在单一容器内的、分别固定有用于捕获多种目标物质的物质的多个载体发光,并从容器外部测定该发光,来同时检测或定量多种目标物质,其中,通过隔着滤光器来测定源自载体的发光,由此选择性地接受源自所需的载体的发光。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员:杉元崇纪上田哲也小林修一田岛秀二
申请(专利权)人:环球生物研究株式会社
类型:发明
国别省市:日本;JP

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