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一种WPM基本固体培养基质的规模化制作方法技术

技术编号:11646511 阅读:133 留言:0更新日期:2015-06-25 06:26
本发明专利技术公开了一种WPM基本固体培养基质的规模化制作方法,属于植物生物技术领域。首先计算WPM基本培养基质所含的17种元素扩大1000倍后的需求量;准确称取扩大后的药品量,其中的二水钼酸钠和五水硫酸铜需要用万分之一天平准确称量;将上述17种元素按照需求量的少多进行先后混合、密封;根据需要分别进行启封使用。通过该方法可制备出扩大了1000倍的WPM基本固体培养基,具有操作方便、快速、应用简单、不同批次以及批次内误差小的特点,可运用于植物组织培养等生物技术用途。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术公开了一种WPM基本固体培养基质的规模化制作方法,属于植物生物
更具体地说是一种包括有准确计算、精确称量、先少后多地混合、密封、启封使用等五个步骤,以期获得不同批次和批次之间误差极小的培养基质、减少试验误差的方法。
技术介绍
植物组织培养技术或无土栽培技术通常需要配制培养基母液,即配制扩大一定倍数、含有各种类型试剂的液体。然而,由于母液含有不同类型试剂,常常分为大量元素、微量元素、铁盐和有机元素四大类,而四大类所扩大的倍数不同,导致药品使用质量不一致,一则容易出现计算误差;二则药品的厂家、质量不一致,即使计算、称量一致,也会影响试验结果;三则由于母液为液体状态,在春夏之交季节,由于气温上升以及湿度增大,极其容易导致母液感染细菌、霉菌,导致母液中呈现不同颜色或出现沉淀的现象,浪费了原料;四则会因称量者对容器刻度的认知(尤其是微量元素)、仪器精密度的不同而出现较大误差。鉴于母液配制的上述缺点,用常规的母液配制培养基,常常会出现因称量者、药品、季节等因素而导致的试验结果失败或无法重复的现象,极大的影响了运用植物组织培养或无土栽培技术开展试验的进程,打击了试验者的信心。
技术实现思路
一种WPM基本固体培养基质的规模化制作方法,其特征在于,所述的方法中包括有准确计算、精确称量、先少后多地混合、密封、启封使用等五个步骤。根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的五个步骤具体操作如下: ①准确计算:将WPM基本固体培养基所含的17种元素扩大1000倍,即五水硫酸铜0.25g,二水钼酸钠0.25g,烟酸0.5g,盐酸吡哆醇0.5g,盐酸硫胺素lg,甘氨酸2g,硼酸6.2g,七水硫酸锌8.6g,四水硫酸锰22.5g,乙二胺四乙酸钠铁36.5g,二水氯化钙96g,肌醇100g,磷酸二氢钾170g,硫酸镁370g,硝酸铵400g,四水硝酸钙556g,硫酸钾990g ; ②精确称量:按照①中计算的结果准确称量; ③先少后多地混合:按照量的少多进行先后混合,即按照五水硫酸铜,二水钼酸钠,烟酸,盐酸吡哆醇,盐酸硫胺素,甘氨酸,硼酸,七水硫酸锌,四水硫酸锰,乙二胺四乙酸钠铁,二水氯化钙,肌醇,磷酸二氢钾,硫酸镁,硝酸铵,四水硝酸钙,硫酸钾的顺序混合均匀,共计2760.3g ; ④密封:将混合后的固体基质按照250g每瓶的要求分装于塑料容器中,并进行密封; ⑤启封使用:根据需要,每IL蒸馏水中加入准确称量的上述基质2.76g,加热待其完全溶解后,加入其它所需试剂即可。本专利技术的有益效果:不同批次的基质之间无计算误差;由于所有试剂都扩大了1000倍,不同批次的基质之间的称量误差极小;理论上,由于每次为1000倍的使用量(以每次IL计算),即可以配制1000L的上述配方,批次内部不会出现因为使用不同厂家、不同时期的试剂而导致的人为误差;扩大后的基质为每250g密封于一个塑料容器中,可避免因天气、温度、水分等外界因素影响导致出现液体母液常见的沉淀、发霉等现象;上述的诸多优点都为以该培养基为基质开展的后续试验,获得准确的试验结果奠定基础。【具体实施方式】: 下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步的描述。本实施例中一种WPM基本固体培养基质的规模化制作方法,包括有准确计算、精确称量、先少后多地混合、密封、启封使用等五个步骤。上述五个步骤具体操作如下: ①准确计算:将WPM基本固体培养基所含的17种元素扩大1000倍,即五水硫酸铜0.25g,二水钼酸钠0.25g,烟酸0.5g,盐酸吡哆醇0.5g,盐酸硫胺素lg,甘氨酸2g,硼酸6.2g,七水硫酸锌8.6g,四水硫酸锰22.5g,乙二胺四乙酸钠铁36.5g,二水氯化钙96g,肌醇100g,磷酸二氢钾170g,硫酸镁370g,硝酸铵400g,四水硝酸钙556g,硫酸钾990g ; ②精确称量:按照①中计算的结果准确称量; ③先少后多地混合:按照量的少多进行先后混合,即按照五水硫酸铜,二水钼酸钠,烟酸,盐酸吡哆醇,盐酸硫胺素,甘氨酸,硼酸,七水硫酸锌,四水硫酸锰,乙二胺四乙酸钠铁,二水氯化钙,肌醇,磷酸二氢钾,硫酸镁,硝酸铵,四水硝酸钙,硫酸钾的顺序混合均匀,共计2760.3g ; ④密封:将混合后的固体基质按照250g每瓶的要求分装于塑料容器中,并进行密封; ⑤启封使用:根据需要,每IL蒸馏水中加入准确称量的上述基质2.76g,加热待其完全溶解后,加入其它所需试剂即可。将上述基质配制后的IL溶液加入30g的蔗糖和5g琼脂粉,进而加入Iml的IN的Κ0Η,溶解完全后分装于30个200ml的玻璃瓶中,121°C灭菌20min后。于超净工作台上接种红叶石楠茎段,25°C 12h光照条件下培养45d后,茎段生长良好且出现大量腋芽。【主权项】1.一种WPM基本固体培养基质的规模化制作方法,其特征在于,所述的方法中包括有准确计算、精确称量、先少后多地混合、密封、启封使用等五个步骤。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的五个步骤具体操作如下: ①准确计算:将WPM基本固体培养基所含的17种元素扩大1000倍,即五水硫酸铜0.25g,二水钼酸钠0.25g,烟酸0.5g,盐酸吡哆醇0.5g,盐酸硫胺素lg,甘氨酸2g,硼酸6.2g,七水硫酸锌8.6g,四水硫酸锰22.5g,乙二胺四乙酸钠铁36.5g,二水氯化钙96g,肌醇100g,磷酸二氢钾170g,硫酸镁370g,硝酸铵400g,四水硝酸钙556g,硫酸钾990g ; ②精确称量:按照①中计算的结果准确称量; ③先少后多地混合:按照量的少多进行先后混合,即按照五水硫酸铜,二水钼酸钠,烟酸,盐酸吡哆醇,盐酸硫胺素,甘氨酸,硼酸,七水硫酸锌,四水硫酸锰,乙二胺四乙酸钠铁,二水氯化钙,肌醇,磷酸二氢钾,硫酸镁,硝酸铵,四水硝酸钙,硫酸钾的顺序混合均匀,共计2760.3g ; ④密封:将混合后的固体基质按照250g每瓶的要求分装于塑料容器中,并进行密封; ⑤启封使用:根据需要,每IL蒸馏水中加入准确称量的上述基质2.76g,加热待其完全溶解后,加入其它所需试剂即可。3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,该培养基质的规模化制作方法具有以下特点,即不同批次的基质之间无计算误差;由于所有试剂都扩大了 1000倍,不同批次的基质之间的称量误差极小;理论上,由于每次为1000倍的使用量(以每次IL计算),即可以配制1000L的上述配方,批次内部不会出现因为使用不同厂家、不同时期的试剂而导致的人为误差;扩大后的基质为每250g密封于一个塑料容器中,可避免因天气、温度、水分等外界因素影响导致出现液体母液常见的沉淀、发霉等现象;上述的诸多优点都为以该培养基为基质开展的后续试验,获得准确的试验结果奠定基础。【专利摘要】本专利技术公开了一种WPM基本固体培养基质的规模化制作方法,属于植物生物
首先计算WPM基本培养基质所含的17种元素扩大1000倍后的需求量;准确称取扩大后的药品量,其中的二水钼酸钠和五水硫酸铜需要用万分之一天平准确称量;将上述17种元素按照需求量的少多进行先后混合、密封;根据需要分别进行启封使用。通过该方法可制备出扩大了1000倍的WPM基本固体培养基,具有操作方便、快速、应用简单、不本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种WPM基本固体培养基质的规模化制作方法,其特征在于,所述的方法中包括有准确计算、精确称量、先少后多地混合、密封、启封使用等五个步骤。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:钱夕刚
申请(专利权)人:钱夕刚
类型:发明
国别省市:安徽;34

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